水产品中亚硝酸盐、甲醛、亚硫酸盐的检测方法及应用

论文摘要

实验分为三部分,第一部分建立了亚硝酸盐检测方法,并研究了亚硝酸盐对水产养殖的影响及防治。利用NO2-与2,3-萘二铵反应生成强烈荧光物质的（C10H10N2 （DAN）+ HNO2→C10H7N3（NAT） +H2O）的原理,通过优化色谱条件:流动相V（双蒸水）:V（乙腈）=60︰40 （流速:0.8 mL/min）,荧光检测器在激发波长375 nm发射波长415 nm条件下检测,线性范围为0.01 mg/kg～4 mg/kg,线性回归系数r=0.9999,方法检出限为0.01 mg/kg,比分光光度计法检出限（1.0 mg/kg）,示波极谱法检出限（0.24 mg/kg）,荧光分析法（8 mg/kg）,离子色谱（0.8 mg/kg）均低,平均加标回收率83.6%～96.5%,方法相对标准平均偏差1.0%～5.0%。研究了亚硝酸钠在鲫鱼体内的代谢及残留情况,并对氯化钠、溴化钠可能影响鲫鱼吸收NO2-进行初步探索,以20 mg/kg亚硝酸钠浸浴,检测数据采用3P97药物代谢动力学软件进行分析。结果表明:亚硝酸钠的消除代谢可以用一级代谢二室模型来描述,亚硝酸钠在血液和肌肉中的消除半衰期:5.36,7.98 d,总体清除率:83.1,54.7 mg/L（kg）/d,结果表明亚硝酸钠在鲫鱼体内代谢较为缓慢,肝脏、肌肉是其残留的主要靶器官,易在其中积累,15d后亚硝酸钠在可食用肌肉的残留量为0.017 mg/kg,均低于目前国内外要求的残留量0.2 mg/kg。三组个体分别曝于20 mg/L亚硝酸钠环境下,两组分别添加18.4g氯化钠和30.0 g溴化钠NO2-、Cl-（Br-）物质量比=20∶1。三种组织:肝脏、鳃和肌肉的检测结果显示加入氯化钠、溴化钠后各组织亚硝酸钠的含量前者较后者低,表明Cl-对鲫鱼吸收NO2-抑制作用比Br-明显。同时用化学试剂二氧化氯、次氯酸钠,物理试剂人造沸石粉、碳酸钙、活性炭治理亚硝酸钠的效果进行比较,结果表明二氧化氯效果最佳。第二部分,建立甲醛液相检测方法,并研究了以鲫鱼为代表的鲜活水产品中甲醛残留。利用甲醛在酸性条件下与2,4-二硝基苯肼（2,4-dinitrophenylhydr azine,DNPH）反应生成2,4-二硝基苯腙的原理,甲醛含量在0.216～43.2μg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限为0.13 mg/kg。比滴定法检出限（100 mg/L）,分光光度法（1 mg/L）低,前处理过程比蒸馏法提取甲醛省时,避免了因甲醛熔点、沸点低可能造成甲醛的挥发。采集鲜活的鲫鱼等水产品进行检测,结果表明:淡水较海水鱼类平均甲醛天然含量较低,海水鱼类中龙头甲醛含量最高。鲫鱼养殖过程中甲醛杀菌消毒,检测体内含量较低,对人体健康危害较小。第三部分,建立了反相离子对色谱-柱后衍生法检测水产品中亚硫酸盐,检测方法采用DTNB柱后衍生反相离子对色谱法检测亚硫酸盐的含量。提取样品中亚硫酸盐之后与甲醛结合生成羟甲基磺酸盐,经过反相离子对色谱分离,在柱后衍生系统中,羟甲基磺酸盐与氢氧化钾反应重新生成亚硫酸根,后者与DTNB衍生生成5-巯基-2-硝基苯甲酸,在450 nm吸收波长处检测。本方法最低检出限为0.15 mg/kg,线性方程为y= 71.62855x +8.94270,相关系数为0.99972,平均回收率为93.6%。本方法与比色法相比避开了有毒物质四氯化汞的使用更环保,检出险比离子色谱（0.33 mg/kg）更灵敏,比蒸馏-碘量法操作更节省时间。这三种化学物质的检测方法均具有灵敏、快速、准确、简便的优点。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 第一节 亚硝酸盐的危害及检测方法的研究进展
• 1 亚硝酸盐引起的中毒
• 2 亚硝酸盐的危害
• 2.1 食品中亚硝酸盐的应用及危害
• 2.2 亚硝酸盐在水产养殖中的危害
• 2.3 亚硝酸盐对人体健康的危害
• 3 亚硝酸盐检测方法的研究进展
• 3.1 光谱检测法
• 3.2 色谱检测法
• 3.3 电化学检测法
• 3.4 毛细管电泳法
• 4 结论
• 第二节 甲醛的危害及检测方法的研究进展
• 1 甲醛的应用及危害
• 2 甲醛检测方法的研究进展
• 3 鲫鱼体内甲醛残留分析及代表性水产品本底值调查
• 第三节 亚硫酸盐的应用、危害及检测方法的研究进展
• 1 亚硫酸盐的应用及危害
• 2 亚硫酸盐的食品安全性与安全限
• 3 亚硫酸盐检测方法的研究进展
• 第二章 亚硝酸钠检测及对水产养殖的影响
• 第一节 FLD-HPLC 快速检测水产品中的亚硝酸钠
• 1 材料与方法
• 1.1 仪器与试剂
• 1.2 样品处理
• 1.3 亚硝酸钠与DAN的衍生化
• 1.4 色谱条件
• 1.5 分析方法
• 2 结果与讨论
• 2.1 前处理的优化与选择
• 2.2 色谱条件的优化与选择
• 2.3 温度对衍生化反应的影响
• 2.4 pH值对衍生化反应的影响
• 2.5 时间对衍生化反应的影响
• 2.6 衍生产物（NAT）的定性
• 2.7 标准曲线的制备
• 2.8 回收率的测定
• 2.9 最低检出限的确定
• 3 结论
• 第二节 亚销酸盐在鲫鱼体内的消除及离子对其吸收的影响
• 1 材料与方法
• 1.1 实验鱼
• 1.2 化学药品与试剂
• 1.3 主要实验仪器
• 1.4 亚硝酸钠标准溶液的制备
• 1.5 标准曲线的制备
• 1.6 给药途径和取样
• 2 样品处理
• 3 血液及组织样品的测定
• 4 亚硝酸纳回收率的测定
• 5 结果与讨论
• 5.1 组织残留
• 5.2 回收率的测定
• 5.3 讨论
• 第三节 亚硝酸盐在水产养殖中的危害及防治
• 1 治理亚硝酸盐的探索
• 1.1 活性炭的使用
• 1.2 沸石粉的使用
• 1.3 碳酸钙和麦饭石的使用
• 1.4 次氯酸钠的使用
• 1.5 二氧化氯的使用
• 2 二氧化氯在水产养殖中的实际应用
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验条件
• 2.3 实验液的配制
• 2.4 预实验
• 2.5 正式实验
• 2 对养殖水体pH 值，亚硝酸盐的影响测定'>2.6 ClO₂ 对养殖水体pH 值，亚硝酸盐的影响测定
• 2.7 结果
• 2.7.1 半至死浓度和安全浓度的测定
• 2对养殖水体pH值及亚硝酸盐的测定结果'>2.7.2 ClO₂对养殖水体pH值及亚硝酸盐的测定结果
• 2.7.3 不同养殖环境下各亚硝酸盐的浓度
• 第三章 水产品中甲醛检测及残留
• 第一节 高效液相色谱法检测水产品中的甲醛
• 1 材料与方法
• 1.1 主要仪器和试剂
• 1.2 分析方法
• 2 结果
• 2.1 样品水浴时间的确定
• 2.2 衍生化时间的确定
• 2.3 衍生试剂用量的确定
• 2.4 衍生温度的确定
• 3 方法评价
• 3.1 线性范围及检出限
• 3.2 方法的精密度
• 3.3 方法的回收率
• 3.4 方法的实际应用
• 4 讨论
• 第二节 甲醛在鲜活水产品中的残留
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 主要实验仪器
• 1.3 分析方法
• 2 结果与讨论
• 第四章 反相离子对色谱—柱后衍生法检测水产品中的亚硫酸盐
• 1 材料与方法
• 1.1 仪器
• 1.2 试剂
• 1.3 样品处理
• 1.4 亚硫酸根的固定
• 1.5 标准曲线的绘制
• 1.6 测定
• 1.7 结果计算和表述
• 2 结果与讨论
• 2.1 亚硫酸根的稳定
• 2.2 色谱条件的优化与选择
• 2.2.1 离子对试剂的选择
• 2.2.2 甲醇比例及流速的选择
• 2.3 方法验证
• 2.3.1 方法的检出限和检测限
• 2.3.2 方法的线性
• 2.3.3 回收率试验
• 2.3.4 精密度试验
• 3 讨论
• 参考文献
• 附件
• 致谢