磷酸川芎嗪鼻黏膜给药系统的研究

论文摘要

本文以磷酸川芎嗪为模型药,对鼻黏膜给药系统进行了研究。研究内容包括:处方前研究,吸收促进剂在体筛选,壳聚糖微球的制备和表征,微球制剂和溶液剂体内药动学研究,Tween80对TMPP鼻黏膜给药后脑靶性影响,TMPP溶液剂稳定性考察。本文首先建立了TMPP体外分析方法,研究了TMPP的平衡溶解度及其溶液的稳定性等理化性质,通过处方中加入助溶剂增加TMPP溶解度。采用大鼠在体鼻循环法探讨了TMPP鼻黏膜吸收机理,研究了不同吸收促进剂的吸收促进作用。0.5%羟丙-β-环糊精和2%Tween80组明显增加了TMPP鼻黏膜的吸收速度。所考察的促进剂均能显著提高TMPP的鼻黏膜吸收。本部分研究完成了对吸收促进剂种类及其浓度的初步筛选。以壳聚糖作为微球的载体,在单因素考察基础上,按优化处方和工艺制备的TMPP壳聚糖微球平均粒径为（50.2±0.7）μm。载药量和包封率分别为（39.94±0.21）%、（73.9±0.24）%。微球释药机理研究表明,微球的释放符合骨架溶蚀与药物扩散协同作用。随着壳聚糖的分子量增大,溶胀度增大,释药速度明显减慢。随着微球的粒径的减小,溶胀度增大,释药速度明显加快。考察了以优化的处方工艺制备的三批微球,结果表明该制备工艺稳定,重现性良好。建立了TMPP体内分析方法,大鼠体内药动学研究结果表明,所加吸收促进剂均显著的提高了TMPP生物利用度,并验证了在体法与体内法间存在良好的相关性。TMPP的溶液剂和壳聚糖微球的药-时曲线均符合二室模型。TMPP壳聚糖微球（100kDa,50μm）绝对生物利用度（86.8%）较2%Tween80的TMPP溶液剂（78.4%）明显提高（P＜0.05）。选择静脉注射为参比途径,研究发现鼻腔给药后脑靶向效率为静脉注射途径的4.9倍,证实了由鼻腔入脑直接转运途径的存在。本文还对通过处方中加入Tween80来增加TMPP中枢神经系统转运的可行性进行了初步探讨,研究发现Tween80对TMPP的鼻黏膜吸收具有吸收促进作用,但对TMPP鼻黏膜给药后脑靶性不存在显著性影响。对制各的TMPP溶液剂进行了初步稳定性考察,结果表明该制剂在40℃和室温下放置三个月,外观、pH和含量均无明显变化,表现出良好稳定性。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1 鼻黏膜给药系统的研究现状
• 2 模型药的研究简介及选择
• 3 研究内容
• 第一章 磷酸川芎嗪的处方前研究
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 2.1 TMPP体外分析方法的建立
• 2.1.1 色谱条件
• 2.1.2 标准曲线绘制
• 2.1.3 精密度试验
• 2.1.4 方法回收率试验
• 2.1.5 加样回收率试验
• 2.1.6 稳定性试验
• 2.1.7 检测限和定量限的测定
• 2.2 pH对TMPP溶解度的影响
• 2.3 pH对TMPP稳定性的影响
• 2.4 广义酸碱催化对TMPP稳定性的影响
• 2.5 离子强度对TMPP稳定性的影响
• 2.6 增加TMPP溶解度方法
• 2.6.1 制备包合物法
• 2.6.2 混合溶剂对TMPP溶解度的影响
• 2.6.2.1 PEG600-水和丙二醇-水对TMPP平衡溶解度的影响
• 2.6.2.2 PBS-PG-PEG600和PBS-PG-乙醇对TMPP平衡溶解度的影响
• 2.6.3 增溶法
• 2.6.4 助溶法
• 3 结果与讨论
• 3.1 TMPP含量测定分析方法的建立
• 3.1.1 标准曲线绘制
• 3.1.2 精密度试验
• 3.1.3 方法回收率试验
• 3.1.4 加样回收率试验
• 3.1.5 稳定性试验
• 3.1.6 检测限和定量限的测定
• 3.2 pH对TMPP溶解度的影响
• 3.3 pH对TMPP稳定性影响
• 3.4 广义酸碱催化对TMPP稳定性的影响
• 3.5 离子强度对TMPP稳定性的影响
• 3.6 增加TMPP溶解度方法
• 3.6.1 HP-β-CD对TMPP溶解度的影响
• 3.6.2 潜溶剂对TMPP溶解度的影响
• 3.6.2.1 PEG600-水和丙二醇-水对TMPP溶解度的影响
• 3.6.2.2 PBS-PG-PEG600和PBS-PG-Al对TMPP溶解度的影响
• 3.6.3 Tween80对TMPP溶解度的影响
• 3.6.4 烟酰胺对TMPP溶解度的影响
• 4 小结
• 第二章 不同吸收促进剂对磷酸川芎嗪鼻黏膜吸收的影响
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 2.1 大鼠在体鼻循环实验
• 2.2 TMPP含量测定方法
• 2.3 TMPP溶液稳定性考察
• 2.4 TMPP在大鼠鼻腔洗出液中的稳定性
• 2.5 TMPP溶液鼻黏膜吸收影响因素的考察
• 2.5.1 循环液pH的影响
• 2.5.2 循环液浓度的影响
• 2.6 吸收促进剂对TMPP鼻黏膜吸收影响
• 2.6.1 环糊精类的影响
• 2.6.1.1 羟丙基-β-环糊精浓度的影响
• 2.6.1.2 环糊精种类的影响
• 2.6.2 Tween80的影响
• 2.6.3 壳聚糖及其衍生物的影响
• 2.6.3.1 壳聚糖浓度的影响
• 2.6.3.2 壳聚糖巯基化的影响
• 2.6.3.3 壳聚糖甲基化的影响
• 2.6.3.4 壳聚糖结构的影响
• 2.6.3.5 壳聚糖分子量的影响
• 3 讨论
• 4 小结
• 第三章 磷酸川芎嗪壳聚糖微球的制备和表征
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 2.1 TMPP-CMS的处方和制备工艺
• 2.1.1 空白微球的制备
• 2.1.2 含药微球的制备
• 2.2 TMPP-CMS性质评价
• 2.2.1 TMPP-CMS的形态、粒径及其分布
• 2.2.2 TMPP-CMS载药量及包封率的测定
• 2.3 TMPP-CMS制备处方和工艺单因素考察
• 2.3.1 油相的选择
• 2.3.2 乳化时间
• 2.3.3 油/水相比例
• 2.3.4 Span80的浓度
• 2.3.5 壳聚糖（100kDa）的浓度
• 2.4 TMPP-CMS制备处方和工艺优化
• 2.4.1 正交试验设计
• 2.4.2 优化工艺的重现性
• 2.5 微球溶胀率和体外释放的考察
• 2.5.1 微球溶胀率测定
• 2.5.2 体外释放测定方法
• 3 结果与讨论
• 3.1 TMPP-CMS制备处方和工艺单因素考察
• 3.1.1 油相的选择
• 3.1.2 乳化时间
• 3.1.3 油/水相比例
• 3.1.4 Span80的浓度
• 3.1.5 壳聚糖（100kDa）的浓度
• 3.2 TMPP-CMS制备处方和工艺优化
• 3.2.1 正交试验设计
• 3.2.2 优化工艺的重现性
• 3.3 不同分子量不同粒径的TMPP-CMS工艺确定
• 3.3.1 TMPP-CMS（400kDa,50μm）的制备
• 3.3.2 TMPP-CMS（100kDa,10μm）的制备
• 3.4 TMPP-CMS形态
• 3.5 TMPP-CMS粒径分布直方图
• 3.6 微球溶胀率和体外释放的考察
• 3.6.1 pH值对微球溶胀与释放的影响
• 3.6.2 壳聚糖的分子量和粒径对微球溶胀与释放的影响
• 4 小结
• 第四章 鼻腔给药的生物利用度研究
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 2.1 TMPP体内分析方法的建立
• 2.1.1 标准溶液配制
• 2.1.2 血浆样品的准备
• 2.1.3 血浆样品预处理
• 2.1.4 色谱条件
• 2.1.5 分析方法的评价
• 2.1.5.1 方法专属性
• 2.1.5.2 标准曲线绘制
• 2.1.5.3 方法回收率
• 2.1.5.4 萃取回收率
• 2.1.5.5 精密度
• 2.1.5.6 检测限与最低检测浓度
• 2.2 大鼠体内药动学研究
• 2.2.1 TMPP溶液剂鼻腔给药
• 2.2.1.1 TMPP溶液剂的制备
• 2.2.1.2 动物实验
• 2.2.2 在体法与体内法的相关性
• 2.2.3 TMPP-CMS鼻腔给药
• 2.3 壳聚糖微球与溶液剂体内递药特性的比较
• 2.4 数据处理
• 3 结果与讨论
• 3.1 TMPP体内分析方法的建立
• 3.1.1 方法专属性
• 3.1.2 血样标准曲线
• 3.1.3 方法回收率
• 3.1.4 萃取回收率
• 3.1.5 精密度
• 3.1.6 检测限与最低检测浓度
• 3.2 大鼠体内药动学研究
• 3.2.1 TMPP溶液剂鼻腔给药
• 3.2.2 在体法与体内法的相关性
• 3.2.3 TMPP-CMS大鼠鼻腔给药药物动力学研究
• 3.3 壳聚糖微球与溶液剂体内药动学参数的比较
• 4 小结
• 第五章 Tween80对磷酸川芎嗪鼻黏膜给药后脑靶向的影响
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 2.1 TMPP脑内分析方法建立
• 2.1.1 标准溶液配制
• 2.1.2 脑组织匀浆样品的准备
• 2.1.3 脑组织匀浆样品预处理
• 2.1.4 色谱条件
• 2.1.5 分析方法的评价
• 2.1.5.1 方法专属性
• 2.1.5.2 脑组织标准曲线
• 2.1.5.3 方法回收率
• 2.1.5.4 萃取回收率
• 2.1.5.5 精密度
• 2.1.5.6 检测限与最低检测浓度
• 2.2 TMPP溶液剂的制备
• 2.3 动物实验
• 2.4 数据处理
• 3 结果与讨论
• 3.1 TMPP脑内分析方法建立
• 3.1.1 方法专属性
• 3.1.2 标准曲线
• 3.1.3 方法回收率
• 3.1.4 萃取回收率
• 3.1.5 精密度
• 3.1.6 检测限与最低检测浓度
• 3.2 鼻腔给药脑靶向性评价
• 3.2.1 大鼠鼻腔、静注给药后血浆和脑组织中血药浓度
• 3.2.2 TMPP鼻腔与静注途径后脑靶向效率比较
• 3.3 Tween80浓度对TMPP在脑中分布的影响
• 3.3.1 不同浓度Tween80的处方组大鼠鼻腔给药后的血药浓度
• 3.3.2 不同浓度Tween80的处方组大鼠鼻腔给药后脑组织的血药浓度
• 3.3.3 不同浓度Tween80对TMPP鼻腔给药后脑靶向效率影响
• 4 小结
• 第六章 磷酸川芎嗪溶液剂稳定性研究
• 1 仪器与试药
• 2 方法与结果
• 2.1 稳定性分析方法的建立
• 2.1.1 专属性试验
• 2.1.1.1 磷酸川芎嗪分解产物干扰试验
• 2.1.1.2 空白辅料的干扰试验
• 2.1.2 磷酸川芎嗪溶液剂含量测定方法
• 2.1.3 磷酸川芎嗪溶液剂有关物质检查
• 2.2 磷酸川芎嗪溶液剂稳定性试验
• 2.2.1 磷酸川芎嗪溶液剂稳定性样品的制备
• 2.2.2 影响因素试验
• 2.2.3 加速试验
• 2.2.4 室温长期留样
• 3 讨论
• 4 小结
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
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