论文摘要
背景：扩张性心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）病因尚不清楚，但普遍认为环境因素和遗传因素均参与了该病的发生。本研究主要对象是特发性（原发性）扩张心肌病（Idiopathic dilated cardiomyopathy，IDCM），也即严格根据1995年修订的DCM诊断标准确诊的DCM。随着对家族性扩张型心肌病（familial dilated cardiomyopathy，FDCM）的大量研究，遗传因素在DCM的发生发展中的作用日趋突出。肿瘤坏死因子-α（tumornecrosis factor-alpha，TNF-α）和肿瘤坏死因子-β（tumor necrosisfactor-alpha，TNF-β）基因位于MHCⅢ类基因区内并与之紧密连锁，其表达受转录水平以及转录后肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）的水平调控。TNF-α和TNF-β基因区单核苷酸多态性（single nucleotidepolymorphism，SNP）可能与TNF的表达相关，并可能与DCM疾病的发生、发展相关。基于TNF基因的生物学效应和其基因的特殊位置，我们对TNF-α和TNF-β的基因多态性与DCM疾病遗传易感性之间的关系进行了研究。目的：对汉族DCM群体和正常汉族人群TNF基因的几个多态性较高的SNP位点进行关联分析和研究，从基因水平上探讨DCM的病因及干扰因素，为DCM的早期遗传学诊断、高危人群检测和基因治疗等提供理论与实验基础。方法：（1）随机选取四川大学华西医院DCM汉族患者110例以及汉族体检健康者110名作对照。（2）抽取外周静脉血，提取DNA，设计并合成特异性引物，确定酶切位点。（3）对所提取的基因组DNA进行聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restrictionfragments length polymorphism，PCR-RFLP）的方法检测。（4）基因型和等位基因频率采用基因直接计数法计算，各组间基因型及等位基因频率比较采用SPSS13.0软件的卡方检验（x2）进行分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。结果：在汉族DCM患者中TNF-α（-308）位点A等位基因频率（20.5％）高于健康人群，经x2检验P＜0.05，差异有统计学意义。在DCM患者中TNF-β（+252）位点AA纯合子基因型频率（31％）和A等位基因频率（48.6％）高于健康人群，经x2检验P值分别为0.038和0.003，差异有统计学意义；TNF-α（-857）、TNF-α（-863）、TNF-α（-1031）位点基因型频率以及等位基因频率在DCM人群和健康人群中的分布经分析，P＞0.05，无统计学差异。结论：（1）TNF-α（-308）位点A等位基因和TNF-β（+252）位点的A等位基因可能与DCM易感性正相关，会加大DCM的遗传易感性，可能通过上调TNF因子的表达而导致病情加重。（2）TNF-β（+252）位点AA基因型可能参与了TNF分子的表达与调控，与DCM疾病的发生和病程相关联。（3）TNF基因中A等位基因为DCM的遗传易感基因。可作为中国汉族人群DCM易感性的一个判断指标。（4）在所研究人群中未发现TNF-α（-857）、TNF-α（-863）、TNF-α（-1031）位点基因型和等位基因与DCM遗传易感性相关。