液基细胞学标本中p16INK4a、Ki67的表达及导流杂交HPV分型在子宫颈癌及癌前病变中的意义

论文摘要

目的:探讨LCT细胞学标本中p16INK4a、Ki67的免疫细胞化学染色及导流杂交HPV基因分型在筛查子宫颈鳞状细胞癌和子宫颈癌前病变的价值。方法:应用免疫细胞化学和免疫组织化学方法对194例细胞学标本和91例组织活检标本进行p16INK4a、Ki67检测;应用导流杂交的方法检测48例细胞学标本的HPV基因型并与组织学诊断结果做对比。对所得结果应用SPSS10.0分析软件进行卡方检验、Spearman等级相关检验、单因素方差分析和Kendall’s tau-b等级相关检验。结果:①p16INK4a在NILM、ASC-US、ASC-H、LSIL、HSIL、SCC各组中的阳性率分别为4.17%（1/24）、35.14%（26/74）、85.71%（6/7）、80%（36/45）、100%（41/41）、100%（3/3）。炎症、ASC（ASC-US+ASC-H）、LSIL、HSIL（HSIL+SCC）,各组间阳性表达率经两两比较差异有统计学意义,P值均小于0.0083。ASC-H阳性表达率明显高于ASC-US组,经卡方检验,差异有统计学意义（X2=87.58,P=0.0000）。经Spearman等级相关分析,p16INK4a的平均染色强度与病变级别正相关（r=0.722,p<0.01）。p16INK4a免疫细胞化学染色检出高级别病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为100%、65.63%、83.58%、100%。②Ki67在HSIL、SCC和ASC-H组的LI值较高,NILM、ASC（ASC-US+ASC-H）、LSIL、HSIL（HSIL+SCC）组经方差分析各组间差异均有统计学意义（p<0.05）。经Kendall’s tau-b等级相关分析,Ki67的表达与级别呈正相关（r=0.577,P<0.001）;Ki67和p16INK4a具有正相关性（r=0.716,P<0.01）。Ki67免疫细胞化学染色筛检子宫颈高度病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为92.86%、75.00%、86.67%、85.71%。③91例细胞学标本中LSIL及以上病变p16INK4a和Ki67与组织学诊断符合率分别为87.30%（55/63）和80.95%（51/63）。④48例液基细胞学剩余标本,HPV总感染率为70.83%（34/48）,高危型HPV感染率54.17%（26/48）;单一型感染率29.17%（14/48）;二重感染率:18.75%（9/48）;三重感染率:18.75%（9/48）;四重感染率:2.10%（1/48）;五重感染率:2.10%（1/48）。21种亚型感染率依次为:16（31.25%）、6（20.83%）、58（18.75%）、33（14.58%）、18（12.5%）、53（12.5%）、52（8.33%）、CP8304（6.25%）、68（4.17%）、31（2.08%）、66（2.08%）、11（2.08%）、39（2.08%）、43（2.08%）、59（2.08%）、45、56、44、51、42与35型在本组研究中未检测到阳性。不同病变高危型HPV感染率分别为:NILM:33.33%（6/18）;ASC:53.85%（7/13）;LSIL:60%（6/10）;HSIL:100%（7/7）,差异有统计学意义（X2=9.7803,P=0.0205）。单一型和混合型HPV感染子宫颈上皮病变的发生率分别为35.29%（6/17）、94.12%（16/17）,经确切概率法卡方检验P=0.0167。HR-HPV检测用于评价宫颈高度病变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:100%、52.63%、55%、100%。结论:①HPV的感染、p16INK4a的表达上调、Ki67标记指数的增高与子宫颈癌及其癌前病变密切相关。②高危性HPV感染是导致子宫颈癌及癌前病变中p16INK4a的表达上调的原因之一。③HPV的分型检测对于宫颈癌及癌前病变的诊断、治疗、随访及疗效观察有重要意义。④p16INK4a的高表达、Ki67标记指数与子宫颈病变级别呈正相关,作为客观的生物学标记物,可为临床医师评价病情,估计病变的进展,预测患者的愈后提供有价值的辅助指标。⑤p16INK4a/Ki67的检测和HPV的基因分型对于评价子宫颈高度病变,减少漏诊率,提高子宫颈癌的早期诊断有重要意义。⑥p16INK4a/Ki67的检测和HPV的基因分型可用于细胞学ASC-US病人的筛检分流。⑦利用液基细胞学剩余标本同时进行免疫细胞化学染色和HPV基因型的分型可减少病人重复取材的痛苦,减轻了病人的经济负担,并且及时的为临床医师处理病情提供可靠的辅助指标。⑧导流杂交是一种融导流杂交与基因芯片于一体的快速杂交平台,具有高敏高效性。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 研究对象
• 1.2 临床病理特点
• 1.3 研究材料
• 1.3.1 主要试剂、来源
• 1.3.2 主要仪器、来源
• 1.4 研究方法
• 1.4.1 实验前准备工作
• 1.4.2 实验方法
• 1.5 结果判定和统计方法
• 第二章 结果
• INK4a和Ki67的表达'>2.1 宫颈脱落细胞中p16^INK4a和Ki67的表达
• INK4a的表达'>2.1.1 宫颈脱落细胞中p16^INK4a的表达
• 2.1.2 宫颈脱落细胞中Ki67的表达
• INK4a的表达与病理学诊一致性比较'>2.1.3 细胞学标本Ki67和p16^INK4a的表达与病理学诊一致性比较
• 2.2 导流杂交HPV分型结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 第五章 问题及展望
• 附图
• 参考文献
• 文献综述
• 综述的参考文献
• 致谢