论文摘要
第一部分不同浓度氧化低密度脂蛋白对THP-1源巨噬细胞凋亡的影响目的:探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）对培养的人单核巨噬细胞THP-1细胞凋亡的影响。方法:体外培养的人THP-1单核细胞经氟波酯（PMA）诱导48小时,使形成巨噬细胞,将分化良好的巨噬细胞分别用不同浓度ox-LDL（0100μg/ml）培养48 h和用75μg/ml ox-LDL培养THP-1细胞不同时间（072h）,应用Annexin-V和碘化丙锭双染色后,用流式细胞仪检测细胞凋亡,观察不同浓度ox-LDL对细胞凋亡率的影响。实验分为以下3组:空白对照组、nLDL组、ox-LDL组（分不同浓度,不同时间）。实验终止后,通过流式细胞仪来检测巨噬细胞的凋亡率。结果:与空白组及内对照组相比,ox-LDL处理后的细胞调亡率增加,并且呈时间和剂量依赖性,随着作用时间的延长和浓度的增加,凋亡呈递增变化。结论:ox-LDL可以诱导THP-1源巨噬细胞凋亡,并且呈时间和剂量依赖性。第二部分氧化低密度脂蛋白诱导THP-1源巨噬细胞凋亡的内质网应激机制的相关研究目的:探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导人单核巨噬细胞THP-1细胞凋亡的内质网应激机制,同时选择P38MAPK信号转导途径,使用P38MAPK的特异性抑制剂SB203580观察ox-LDL的作用变化,进一步分析ox-LDL是否通P38MAPK信号转导途径激活内质网应激的机制。方法:将分化良好巨噬细胞用100μg/ml的ox-LDL培养48 h后进行实验。实验分为3组:空白对照组、ox-LDL组、ox-LDL + SB203580组（p38 MAPK抑制剂）（ 5μmol/L）。实验终止后,用RT-PCR和Western-blot法测定内质网应激指标GRP78、Caspase-12、CHOP及p38MAPK的表达。结果:空白对照组中无GRP78、Caspase-12、CHOP及p38MAPK蛋白和mRNA的表达,单纯ox-LDL组和ox-LDL + SB203580组中GRP78、Caspase-12、CHOP及p38MAPK蛋白和mRNA的表达均增加,具有显著性差异（p<0.05）,而ox-LDL + SB203580组和单纯ox-LDL组相比,以上mRNA和蛋白的表达有所减少（p<0.05）。结论:1. ox-LDL可以诱导THP-1源巨噬细胞的内质网应激反应2.P38MAPK通道抑制剂SB203580可以部分阻断内质网应激,即P38MAPK信号通道为ox-LDL诱导巨噬细胞凋亡作用途径之一。
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标签：氧化低密度脂蛋白论文; 巨噬细胞论文; 内质网应激论文;