Ⅱ型子宫内膜癌前期病变的研究

论文摘要

子宫内膜癌分为Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅱ型子宫内膜癌以子宫内膜浆液性癌（Endometrial Serous Carcinoma,ESC or Uterine papillary Serous Carcinoma,UPSC）和透明细胞癌（Clear cell carcinoma,CCC）为代表。它的发生不同于Ⅰ型,与静止内膜包括萎缩内膜和轻微增殖内膜有关。人们最初将子宫内膜上皮内癌（Endometrial Intraepithelial Carcinoma,EIC）看作是子宫浆液性乳头状癌（UPSC/ESC）的前期病变。这种所谓的前期病变在形态学上虽无肌层浸润,但其行为不同于上皮内癌或原位癌,常伴有宫外浆液性癌。浆液性EIC与子宫外浆液性癌的关系尚不清楚。通常认为浆液性癌发生在萎缩或静止的子宫内膜（Resting Endometrium,RE）,在完全良性和恶性腺体之间似乎有些东西尚未被发现。我们课题组描述了一种称之为子宫内膜腺体异型增生（Endometrial Glandular Dysplasia,EmGD）的病变作为RE与EIC之间的过渡类型、ESC可能的癌前病变,我们提出它可能是浆液性癌发生过程中形态学上可识别的最早的上皮内病变。本课题将进一步寻找EmGD作为ESC前期病变的遗传学证据;探讨浆液性EIC和子宫外浆液性癌的关系及可能的播散机制。第一部分浆液性癌病例中EmGD、EOC和EsC病变的p53基因序列分析及免疫组化检测目的通过比较同一浆液性癌病例中EmGD、EIC和ESC三种类型病变p53基因突变情况来探讨ESC的发生过程、EmGD发生的遗传学机制。方法石蜡组织切片上选取浸润性ESC、浆液性EIC、EmGD病变和RE组织,激光显微微切割获取目的组织、提取DNA后进行p53基因5-8外显子序列分析。免疫组织化学（IHC）染色检测实验组每个病例至少一张包含ESC、浆液性EIC或EmGD病变的切片及对照组RE组织中p53蛋白的表达。结果1)p53基因总体突变情况:实验组80.0%（12/15）的病例每类病变都有一种或以上p53基因突变,所有病例RE组织中都没有突变。2)EmGD病变p53基因突变率达43.2%（16/37）。3)p53突变率由EmGD到浆液性EIC及ESC病变逐渐增高,EmGD与浆液性EIC/ESC突变率间的差异有显著性（p=0.0375,p=0.0001）。4)55%（6/11）的实验组病例同一子宫中三种类型的病变有相同的p53基因突变提示至少一些ESC/浆液性EIC起源于同一细胞克隆。5)93.3%（14/15）的实验组病例中p53蛋白过表达。27个病例中IHC检测和序列分析阳性结果一致率是85.2%（23/27）,两种方法对p53改变检出率的一致性具有统计学意义（p=0.0002）。结论EmGD中p53基因突变率达43.2%,p53突变率由EmGD到浆液性EIC/ESC逐渐增高,且差异有显著性,实验组55%的病例中三种类型的病变有相同的p53基因突变,有力支持EmGD为ESC/浆液性EIC的前期病变。p53基因突变可能是子宫浆液性癌形成过程中早期重要事件之一。准确识别EmGD提供了早期诊断及预防发展成ESC的机会。第二部分p53基因序列分析、X染色体克隆性分析探讨浆液性EIC伴发的宫外浆液性病变的发生机制目的探讨浆液性EIC常伴发的宫外浆液性病变是由宫内病变转移而来还是发生“田野效应”所致。方法石蜡组织切片上选取浆液性EIC、RE组织、宫外各个部位浆液性癌病变,激光显微微切割获取目的组织、提取DNA后进行X染色体克隆性分析检测宫内浆液性EIC、宫外浆液性病变X染色体失活类型、p53基因5-8外显子序列分析以及IHC检测宫内、外浆液性病变p53改变情况。结果57%（12/21）的病例中的大部分样本可以用于克隆性分析,所有病例的大部分样本都可以用于p53基因序列分析。42.9%（9/21）的病例宫内至少一处病变与宫外浆液性病变有完全相同的分子学改变;33.3%（7/21）的病例宫内没有一处病变与宫外病变有完全相同的分子学改变;23.8%（5/21）的病例宫内至少一处病变与部分宫外病变有完全相同的分子学改变,但宫外病变的分子学改变不完全相同。结论浆液性EIC相关的宫外浆液性癌可能有多种来源:1)至少一些病例宫外病变由宫内EIC细胞转移而来。2)一些是“田野效应”所致共发形成的。3)一些病例宫外病变的发生兼有以上两种机制。结论1.EmGD中常发生p53突变,有力地支持EmGD是ESC的前期病变。本实验结果进一步支持ESC的发生模式是由RE发展成EmGD,经由浆液性EIC阶段进一步发展成ESC。2.浆液性EIC经常伴发的宫外浆液癌可能有多种来源:本实验结果说明宫外病变的发生基本有三种机制,即,宫内病变转移而来、同时发生的“田野效应”所致以及可能同时兼有以上两种机制。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一部分 浆液性癌病例中EmGD、EIC和ESC病变的p53基因序列分析及免疫组化检测
• 一.材料与方法
• 二.结果
• 三.讨论
• 四.小结
• 第二部分 p53基因序列分析结合X染色体克隆性分析探讨浆液性EIC伴发的宫外浆液性病变的发生机制
• 一.材料与方法
• 二.结果
• 三.讨论
• 四.小结
• 全文总结
• 参考文献
• 综述
• 附录
• 致谢