论文摘要
本研究以生长育肥猪为对象,研究苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢、残留及消除规律,为国家相关机构监管这类违禁品提供有力的技术支撑。试验一苯乙醇胺A在生长育肥猪体内的代谢产物及代谢规律研究本试验旨在研究生长育肥猪一次性采食苯乙醇胺A后,测定在猪血液、尿液和粪便中含量及其在尿液中的代谢产物,确定其代谢规律。试验选择56kg左右体重的健康DLY生长育肥猪9头,按体重随机分为2个处理,处理一为对照组,3个重复,每个重复1头猪；处理二为试验组,6个重复,每个重复1头猪。试验期2天,试验第一天对照组饲喂基础饲粮,试验组自由采食含苯乙醇胺A饲粮（20mg/kg） 20min（平均每头猪摄入苯乙醇胺A量为24.08±1.71 mg）,然后换喂基础饲粮。饲喂苯乙醇胺A后：从开始饲喂含苯乙醇胺A饲料的饲喂时间计算起,分别在采食后0.5、1、2、4、6、12、24h对试验组6头和对照组3头猪从颈静脉采血20mL；以每4h为时间段分段收集粪便和尿液,连续收集48h。血液、尿液和粪便中苯乙醇胺A含量采用高效液相色谱串联质谱法测定,尿液中苯乙醇胺A代谢产物用飞行时间质谱法测定。试验结果表明,生长育肥猪一次采食苯乙醇胺A后0.5h后,血液中检出苯乙醇胺A,2h后达到高峰,最大含量达]2.28±1.36ng/mL;血液半衰期T1/2为2.07±1.38h=采食后4-8h,尿液中苯乙醇胺A含量达到高峰282.68±124.74ng/mL;16h内尿液苯乙醇胺A含量均在100ng/mL以上。在采食后0-48h内,粪中苯乙醇胺A含量呈逐渐上升的趋势,在32h后达到最高峰,为62.]8+8.11 ng/g。在本实验48h内,尿液排泄苯乙醇胺A速度比粪便排泄的速度快,48h时粪尿中苯乙醇胺A仍然有较高含量,表明摄入的苯乙醇胺A在48h内并未从猪体内排泄完全。经飞行时间质谱分析,飞行一级质谱分析出尿液中存在9种苯乙醇胺A代谢产物；经飞行二级质谱确证了尿液中的7种苯乙醇胺A代谢产物。试验二苯乙醇胺A在育肥猪组织、尿液及血液中的残留和消除规律研究本试验旨在研究饲粮中的苯乙醇胺A在育肥猪体组织和体液中的残留和消除规律。用单因子完全随机试验设计,将体重为67.33±2.80kg的健康DLY生长育肥猪34头随机分为2个处理,处理一为对照组,10个重复,每个重复1头猪；处理二为试验组,24个重复,每个重复1头猪,组间初始体重差异不显著（P>0.05）。对照组在整个试验过程中均饲喂不含苯乙醇胺A的基础饲粮。试验组前28天自由采食含苯乙醇胺A饲粮（20mg/kg）;第29天开始饲喂不含苯乙醇胺A的基础饲粮,进入消除期,消除期为14天,整个试验共持续42天。试验开始第1、3、5、7、9、11天的早上11点（采食3h后）,随机选择试验组6头和对照组3头猪采集从颈静脉血,用于测定血液中苯乙醇胺A的含量。试验的第15、29天随机选择试验组6头和对照组2头屠宰；在消除期尿液呈阴性时（莱克多巴胺试纸条检测,本试验中消除3天后尿液呈阴性）及试验第36和43天随机选择试验组4头和对照组2头屠宰；采集试验猪组织（肺、肝脏、肾脏及肌肉）和体液（血液和尿液）,测定苯乙醇胺A的残留量。所有样品中苯乙醇胺A的含量均采用高效液相色谱串联质谱法进行测定。试验结果表明,育肥猪连续采食含苯乙醇胺A的饲粮后,血液中苯乙醇胺A含量呈时间累积效应,在第7-11天达到动态平衡,苯乙醇胺A浓度达到20.77-24.31ng/mL。育肥猪采食含20mg/kg苯乙醇胺A饲粮14 d后,组织及体液中苯乙醇胺A的浓度分别为肺脏305.86±195.2 ng/g,肾脏12.19±7.21 ng/g,肝脏4.11±1.73ng/g,肌肉4.26±1.87 ng/g,血液0.85±0.46ng/mL,尿液50.26±22.32 ng/mL;育肥猪采食含20mg/kg苯乙醇胺A饲粮28 d后,组织及体液中苯乙醇胺A的浓度分别为肺脏95.53±33.78 ng/g,肾脏2.67±1.28 ng/g,肝脏0.97±0.25 ng/g,肌肉2.26±0.41 ng/g,血液0.91±0.25 ng/mL,尿液17.33±8.24ng/mL。在莱克多巴胺试纸条检测尿液呈阴性时,尿液样经HPLC-MS/MS的检测,苯乙醇胺A残留量仍然高达1.26±0.20ng/mL;停止饲喂含苯乙醇胺A饲粮7d后,育肥猪血液中苯乙醇胺A的含量下降到检测限以下；停喂含苯乙醇胺A饲粮14d后,育肥猪尿液、肾脏、肝脏及肌肉中苯乙醇胺A残留下降到检测限以下的水平,而肺脏中苯乙醇胺A的残留仍然能检出。