论文摘要
背景纤维化可导致器官结构破坏和功能减退、乃至衰竭。肺间质纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是由多种因素引起的一组肺间质弥漫性疾病,是异质性疾病,也是多种肺疾病的共同结局,其发病机制复杂,研究证实肺间质纤维化的发生、发展与转化生长因子-β1(TGF-β1)的高表达密切相关。转化生长因子-β1(TGF-β1)是公认的肺间质纤维化形成和发展中的“开关性”细胞因子,作为一种多功能及强效的致纤维化因子,参与调控细胞的分化、增殖及细胞外基质(extracellular membrane)分泌,增加ECM的聚积并抑制其降解,在肺纤维化形成过程中主要作用于胶原的转录和翻译过程,诱导前胶原mRNA的产生,促进胶原蛋白的形成和沉积,是纤维化发生过程中最直接的一种细胞因子。抑制TGF-β1基因表达显然有助于延缓肺纤维化进程,而应用常规抗纤维化药物抑制其表达的效果并不理想。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是新近出现的一种分子生物学技术,它通过导入由对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(double strand RNA, dsRNA),诱导受体细胞中与其有同源序列的特异性靶mRNA降解,阻止蛋白质的翻译过程,其作用类似于基因敲除,但基因表达并未永远消除,因而又被称为“基因沉默”。目的本研究针对大鼠TGF-β1的mRNA序列设计、合成并构建具有特异性阻断大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)基因的TGF-β1 siRNA Shuttle载体,然后重组入腺病毒载体,包装成转化生长因子受体β1 (TGF-β1) siRNA的腺病毒,将腺病毒载体局部转染肺间质纤维化大鼠,观察并分析其对TGF-β1mRNA表达的抑制作用,为肺纤维化的防治提供实验依据。材料和方法60只SD雄性大鼠,生理盐水对照组、重组复制缺陷型TGF-β1腺病毒治疗组、空载体对照组,第0d经气管滴入0.3ml的博来霉素(BLM3mg/kg)建立肺间质纤维化模型,空白对照组大鼠滴注等体积生理盐水,治疗组于滴入博来霉素24h后经鼻滴入重组复制缺陷型TGF-β1腺病毒(AdCMV TGF-β1)10×109空斑形成单位(pfu)(100μl/鼠),生理盐水组于造模后24h经鼻滴入同体积的生理盐水,同时设立无外源活性基因的复制缺陷型腺病毒(AdCMVNull)空载体对照组,空白对照组于24h给予气管内滴入同体积生理盐水。各组动物于7、14、28d随机处死5只,取肺组织肺行苏木精伊红(HE)染色;免疫组化法检测肺组织TGF-β1的蛋白表达水平;荧光定量PCR检测肺组织中TGF-βmRNA的表达水平;ELISA法检测血清中TGF-β的蛋白的表达水平,评价其对全身的影响。结果HE染色示治疗组各时期肺泡炎和肺纤维化程度均较生理盐水对照组及空载体对照组轻;免疫组化结果显示治疗组与生理盐水及空载体对照组相比肺组织TGF-β1蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);实时荧光定量PCR结果显示治疗组TGF-β1mRNA表达水平与生理盐水及空载体对照组比较降低,差异有统计学意义(P<0.05);而血清中TGF-β1各组各时期蛋白表达量无统计学差异(P>0.05)。结论腺病毒介导的RNAi可以抑制肺纤维化鼠肺组织TGF-β1的表达,减轻肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,对血清中的TGF-β1表达影响较小,有望成为防治肺间质纤维化的一种手段。
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- [1].探讨TGFβ1、PDGF、VEGF对特发性肺纤维化诊断及病情评估的临床意义[J]. 中华肺部疾病杂志(电子版) 2020(01)
- [2].TGF-β1、PDGF、VEGF评估吡非尼酮治疗特发性肺纤维化的临床疗效观察[J]. 临床肺科杂志 2020(02)
- [3].血液净化联合血必净治疗热射病的临床效果及对TGF-β水平的影响[J]. 临床医学研究与实践 2020(06)
- [4].TGF-β1表达与舌鳞癌发生发展的相关性研究[J]. 中国现代医生 2020(04)
- [5].伊马替尼早期对慢性粒细胞白血病患者血清COX-2、bFGF及TGF-β1表达的影响[J]. 医学理论与实践 2020(09)
- [6].黔北人群TGFα基因多态性与非综合征性唇腭裂的相关性研究[J]. 基因组学与应用生物学 2020(03)
- [7].斑石鲷TGF-β1基因克隆和表达分析[J]. 渔业科学进展 2020(03)
- [8].机体的肾脏纤维化情况与TGF-β1信号通路关联性研究综述[J]. 智慧健康 2020(11)
- [9].TGF-β_1+915G/C基因多态性与慢性肾炎临床表现的相关性分析[J]. 现代中西医结合杂志 2020(17)
- [10].布地奈德辅助治疗小儿支气管哮喘的临床效果及对患儿血清TGF-β1、VEGF表达的影响[J]. 中国现代医生 2020(11)
- [11].TGF-β_1在放射性颌骨骨髓炎发病过程中对骨髓间充质干细胞的影响及其分子机制的体外研究[J]. 实用口腔医学杂志 2020(03)
- [12].酮替芬联合氯雷他定治疗小儿咳嗽变异性哮喘的效果及对血清TGF-β1的影响[J]. 中国现代医生 2020(17)
- [13].噻托溴铵对老年慢性阻塞性肺病加重期患者肺功能及MMP-9、TGF-β、TIMP-1水平的影响[J]. 现代医学与健康研究电子杂志 2020(09)
- [14].TGF-β与冠心病及相应药物的研究进展[J]. 西南医科大学学报 2020(04)
- [15].TGF-β轴在骨巨细胞瘤中的表达[J]. 中国矫形外科杂志 2019(22)
- [16].TGF-β1在糖尿病性视网膜病变中的作用[J]. 中南医学科学杂志 2017(01)
- [17].外源性硫化氢对肝星状细胞TGF-β_1表达的影响[J]. 山东医药 2017(08)
- [18].新疆人群TGF-α基因多态性和非综合征性唇腭裂风险易感性相关性研究[J]. 新疆医科大学学报 2017(04)
- [19].TGF-β_1和VEGF在胃癌组织中的表达及临床意义分析[J]. 医药论坛杂志 2017(01)
- [20].TGF-β与转录因子在肝纤维化中的相互作用[J]. 微生物学免疫学进展 2016(06)
- [21].PTEN与TGF-β在前列腺癌中的表达及其临床意义[J]. 解放军医药杂志 2016(11)
- [22].慢性肺源性心脏病患者血清TGF-β1水平的临床意义[J]. 临床医学研究与实践 2017(06)
- [23].COX-2、bFGF及TGFβ1在急性白血病中的表达及其临床意义[J]. 临床医学研究与实践 2017(07)
- [24].血府逐瘀胶囊对肺癌患者放射性肺损伤血TGF-β_1影响的临床研究[J]. 现代中西医结合杂志 2017(12)
- [25].中医药基于TGF-β1治疗糖尿病肾病研究概况[J]. 中医药临床杂志 2017(02)
- [26].氯沙坦联合骨化三醇对糖尿病肾病患者血清TGF-β1的影响[J]. 锦州医科大学学报 2017(01)
- [27].TGF-β在炎症性肠病肠纤维化中的作用[J]. 实用临床医学 2017(05)
- [28].TGF-β1在原发性胆汁性肝硬化患者血清中的表达及与肝脏功能的关系[J]. 实用医学杂志 2017(08)
- [29].TGF-β1、PTEN在口腔鳞癌组织中的表达及意义[J]. 黑龙江医药科学 2017(03)
- [30].TGF-β1在涎腺腺样囊性癌发生发展中的研究进展[J]. 现代肿瘤医学 2017(18)