论文摘要
本研究采用鱼粉（粗蛋白67.5%）为动物蛋白源;以豆粕（粗蛋白46.2%）分别替代0%、30%、45%和60%的鱼粉蛋白,并在每个替代水平上分别添加0%、0.125%和0.25%的益康XP,配制成12种等氮等能（粗蛋白,48.6%;总能20.3 kJ/g）的实验饲料,对大菱鲆进行摄食生长实验。其中每种替代水平的饲料中分别添加了不同剂量的包被晶体氨基酸以弥补因豆粕替代引发的氨基酸缺乏。研究饲料中不同豆粕水平时添加酵母培养物(益康XP?),对大菱鲆摄食、生长、鱼体生化组成、组织学结构以及肠道菌群的影响。探讨大菱鲆不能有效利用豆粕蛋白的原因,同时检测添加益康XP?能否提高大菱鲆对豆粕蛋白的利用率。主要研究内容和结果如下:⑴摄食生长实验结果表明,随着豆粕替代水平的提高,大菱鲆特定生长率SGR（r=-0.910,P<0.01）、饲料效率FER（r=-0.856,P<0.01）、摄食量DFC（r=-0.860,P<0.01）、蛋白质效率PER（r=-0.861,P<0.01）、净蛋白利用率PPV（r=-0.910,P<0.01）、鱼体粗蛋白（r=-0.630,P<0.01）和总能（r=-0.574,P<0.01）呈极显著下降的趋势,第一周内摄食量（FWDFC）（r=-0.259,P<0.05）、大菱鲆鱼体粗脂肪（r=-0.431,P<0.05）含量、鱼体缬氨酸（r=-0.479,P<0.05）、苯丙氨酸（r=-0.501,P<0.05）和精氨酸（r=-0.447,P<0.05）含量呈显著下降趋势,而大菱鲆摄食率FI（r=+0.786,P<0.01）、鱼体粗灰分（r=+0.539,P<0.01）和水分（r=+0.587,P<0.01）含量呈极显著升高的趋势。当添加益康XP后,随添加剂量升高,PPV、鱼体粗蛋白、脯氨酸含量呈显著升高的趋势（P<0.05）,SGR、PER、FER和鱼体粗脂肪含量有所提高,但是变化不显著（P>0.05）,而DFC呈先上升后下降的趋势,FI、鱼体灰分、水分、半胱氨酸和苯丙氨酸含量呈显著降低的趋势（P<0.05）。鱼体其它氨基酸含量不受益康XP?添加量的影响（P>0.05）。在两个因子的共同作用下,S45X0.00(S代表豆粕,X代表益康XP?,下标数字分别代表豆粕蛋白替代鱼粉蛋白的量和益康XP?添加量,即豆粕蛋白替代45%的鱼粉蛋白,益康XP添加量为0%)处理组SGR显著低于对照组,而S45X0.125处理组SGR与对照组无显著差异。⑵实验饲料对大菱鲆消化生理的影响结果表明,随着豆粕替代水平的提高,饲料中干物质（r=-0.976,P<0.01）、粗蛋白（r=-0.927,P<0.01）、总能（r=-0.878,P<0.01）、丙氨酸（r=-0.878,P<0.01）、苯丙氨酸（r=-0.927,P<0.01）和脯氨酸（r=-0.976,P<0.01）的表观消化率、大菱鲆肠道胰蛋白酶活力（r=-0.678,P<0.01）和胃蛋白酶活力（r=-0.538,P<0.01）呈极显著下降的趋势,苏氨酸（r=-0.830,P<0.05）、丝氨酸（r=-0.830,P<0.05）、缬氨酸（r=-0.830,P<0.05）、蛋氨酸（r=-0.830,P<0.05）、异亮氨酸（r=-0.830,P<0.05）、亮氨酸（r=-0.830,P<0.05）、酪氨酸（r=-0.830,P<0.05）、赖氨酸（r=-0.830,P<0.05）、精氨酸（r=-0.830,P<0.05）和总氨基酸（r=-0.830,P<0.05）的表观消化率和肝脏脂肪酶活力（r=-0.463,P<0.05）呈显著下降的趋势,粗脂肪（r=-0.683,P>0.05）、天冬氨酸（r=-0.439,P>0.05）、谷氨酸（r=-0.537,P>0.05）、甘氨酸（r=-0.634,P>0.05）、半胱氨酸（r=-0.634,P>0.05）、组氨酸（r=-0.634,P>0.05）的表观消化率、肝脏蛋白酶（r=-0.307,P>0.05）和肠蛋白酶（r=-0.081,P>0.05）活力也呈下降趋势,但是差异不显著。肠脂肪酶（r=+0.221,P>0.05）、肠淀粉酶（r=+0.054,P>0.05）和胃淀粉酶（r=+0.269,P>0.05）活力呈上升趋势。添加益康XP?后,饲料中能量的表观消化率显著提高（P<0.05）,干物质、粗蛋白和粗脂肪的表观消化率稍有提高,但差异不显著（P>0.05）,各氨基酸的表观消化率和各消化酶活力未受显著影响（P>0.05）。但是添加益康XP?后45%豆粕替代组的胃蛋白酶活力从显著低于对照组变为与对照组无显著差异。⑶实验饲料对大菱鲆组织学结构和肠道菌群的影响结果表明:①随着豆粕替代水平的升高,大菱鲆肠道内壁的完整性逐渐受到破坏。30%豆粕替代组和对照组未观察到明显差异,肠道绒毛结构完整、清晰;45%豆粕替代组开始观察到明显的肠道内壁组织结构受损,60%豆粕替代组肠道结构病变程度进一步恶化。②类似的,随着饲料中豆粕替代水平的升高,大菱鲆肝脏细胞空泡化现象呈梯状加剧,肝血窦腔隙也逐步变大。其中45%豆粕替代组肝脏细胞内因脂肪滴的积累,肝细胞核被挤离中央位置成为极化细胞核;30%和45%豆粕替代组肝血窦腔隙明显大于对照组;60%豆粕替代组肝脏受损现象更为严重,肝脏实质组织有溶解的趋势,细胞界限已经不清晰,只观察到残留的细胞核和血窦空腔。③饲料中豆粕替代水平较低时（30%和45%）,添加益康XP?减轻了肝脏和肠道组织结构病变程度,肠道和肝脏组织结构基本完整;而豆粕替代水平较高时（60%）,添加益康XP?未能改变肝脏和肠道组织结构严重受损的现象。④与对照组的肠道菌群结构进行比较,豆粕替代组和益康XP?添加组肠道菌群结构均相对单一。检测显示:对照组优势菌群为假单胞菌属,益康XP?添加组优势菌群为弧菌属和芽孢杆菌属,豆粕替代组菌群结构单一,致病菌弧菌属占绝对优势。综上所述,随着饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白水平的升高,大菱鲆摄食量降低,消化道中消化酶活性和消化道组织结构均受到负面影响,饲料中营养物质的表观消化率显著降低,生长性能显著下降。添加适量益康XP?可提高大菱鲆的摄食量和生长速度,改善肠道和肝脏组织结构,提高蛋白质的利用率,添加适量益康XP?可使饲料中豆粕蛋白替代鱼粉蛋白水平由原来的30%提高到45%。
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