论文摘要
肠粘膜屏障损害对机体的影响主要通过二方面因素实现，一是肠粘膜组织和细胞结构的破坏；二是肠道内微生物及其代谢产物逸出肠外。所以，保持完整的肠粘膜结构和维护正常的肠道微生物平衡是防治肠粘膜屏障损伤的主要措施。 正常肠道菌群能适度刺激机体免疫反应，防止潜在的致病微生物过度滋生，减少肠内过多炎症介质产生，抑制粘膜免疫反应的病理性激活，因此经肠道补充益生菌有利于维持肠道微生态平衡。乳酸链球菌（简称乳链菌）被证实是安全和有效的益生菌（probiotics），已长期应用于临床实践。我们设想，如果能通过乳酸链球菌表达某些对肠粘膜细胞有保护作用的活性蛋白质或抗炎因子，即有利于维持肠道微生态平衡，也能达到保护肠粘膜屏障的目的，有可能为防治肠粘膜损伤提供更有效的治疗选择，近年三叶因子家族（简称三叶肽）的研究成果为此目标提供了可能性。 三叶因子家族（Trefoil Factor Family，TFF）是哺乳动物上皮细胞表达的一种小分子蛋白质，目前已发现了三种同源染色体结构，即TFF1、TFF2和TFF3。当前的研究已证明，TFF是正常的胃肠粘膜结构保护和损伤修复不可缺少的物质。因此，我们采用基因工程改建乳酸链球菌，使其表达人TFF2（human TFF2，hTFF2），为肠道粘膜屏障的保护寻求一种新的治疗途径。 在本研究中，我们通过基因拼接技术在体外拼装了带c-myc分子标签的hTFF2融合基因（c-myc-htff2），并将其插入pNBC1000（包含有P59启动子和USP45信号肽以及终止子，已由本实验室成功构建）信号肽下游的多克隆位点（multiple cloning site，MCS），完成了c-myc-htff2表达载体系统的构建，再将表达载体系统连接于穿梭质粒，通过电穿孔转入乳酸链球菌1403株（LL—1403），成
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