铝胁迫下八仙花组培苗的生理特性研究

论文摘要

八仙花品种H. macrophylla’Coerulea’是重要的园林观赏植物,本文对铝胁迫下其组培苗的生理生化特性做出了研究,发现其耐铝性较强。具体为：1.培养基MS+6-BA1. Omg/L+NAAO.2mg/L适合进行丛生芽的诱导。铝胁迫培养基的凝固实验结果显示,当营养成分、灭菌温度、灭菌时间一致时,在pH值和琼脂量相同的条件下,A1浓度越高,琼脂的凝固性越差。在A1浓度和琼脂量相同的条件下,pH值较高时凝固性更好。在Al浓度和pH值相同的条件下,琼脂量越大,琼脂凝固性更好。2.随着铝胁迫浓度的增大和时间的增长,组培苗的大小出现了明显的对比,其中,浓度0.25-lmmol/L之间的组培苗长得都比对照更高大,更茂盛。从3mmol/L开始,组培苗的大小与胁迫前几乎没有变化,也很少有根长出,叶片白化、出现紫红色,甚至枯萎死亡。本文一共测了超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、可溶性蛋白质（Protein）含量、丙二醛（MDA）含量、叶绿素（Chl）含量、可溶性糖含量（SS）、细胞膜透性（IL）和游离脯氨酸（Pro）含量等八个生理指标,并作出分析。结果显示,SOD活性、可溶性蛋白质含量、叶绿素含量与铝浓度呈负相关,其余呈正相关,其中可溶性糖含量、细胞膜透性、脯氨酸含量这三个指标与浓度呈极显著正相关。综合各指标看来,八仙花H. macrophylla’Coerulea’的组培苗对铝的耐受度可以达到2mmol/L,低浓度的铝能够促进八仙花组培苗的生长。3.本文采用PBS溶液和电极缓冲液两种提取溶液来提取蛋白质,利用SDS-PAGE技术分析了不同铝胁迫浓度下八仙花组培苗中蛋白质的差异情况,实验表明,两种提取液都能有效提取出蛋白质,但电极缓冲液提取出来的蛋白质更多,条带更清晰。而各胁迫浓度之间蛋白质条带并未出现明显差异。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1 八仙花愈伤组织诱导及植株再生研究进展
• 1.1 八仙花愈伤组织诱导研究现状
• 1.2 八仙花细胞脱分化与再分化的影响因素
• 1.2.1 基因型
• 1.2.2 外植体类型
• 1.2.3 培养基
• 1.2.4 植物生长调节剂
• 1.2.4.1 6-BA和NAA组合
• 1.2.4.2 6-BA和IAA、IBA组合
• 1.2.4.3 其他
• 1.2.5 其他添加剂
• 1.3 前景展望
• 2 利用植物组培苗进行逆境生理研究的研究进展
• 2.1 温度
• 2.1.1 高温
• 2.1.2 低温
• 2.2 光照
• 2.3 水分
• 2.3.1 干旱
• 2.3.2 涝害
• 2.4 盐
• 2.5 金属离子
• 2.6 其他
• 3 本研究的目的意义
• 第二章 材料与方法
• 1 实验材料
• 2 主要仪器和试剂
• 2.1 仪器
• 2.2 药品与试剂
• 2.2.1 铝胁迫实验
• 2.2.2 蛋白质电泳
• 2.3 胁迫培养基凝固实验
• 2.3.1 材料和主要仪器
• 2.3.2 方法
• 3 实验方法
• 3.1 铝胁迫实验
• 3.1.1 实验处理
• 3.1.2 测定指标
• 3.1.2.1 超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定
• 3.1.2.2 过氧化物酶（POD）活性的测定
• 3.1.2.3 可溶性蛋白质含量的测定
• 3.1.2.4 丙二醛含量测定
• 3.1.2.5 叶绿素含量测定
• 3.1.2.6 可溶性糖含量测定
• 3.1.2.7 细胞膜透性的测定
• 3.1.2.8 脯氨酸含量测定
• 3.2 蛋白质电泳
• 3.2.1 蛋白质的提取
• 3.2.2 SDS-PAGE
• 3.2.2.1 制胶
• 3.2.2.2 样品处理
• 3.2.2.3 电泳分析
• 3.2.2.4 染色、脱色
• 4 数据分析
• 第三章 结果与分析
• 1 胁迫培养基的选择
• 1.1 实验结果
• 1.2 讨论
• 1.3 结论
• 2 铝胁迫下八仙花组培苗形态的变化
• 3 不同浓度铝胁迫下八仙花组培苗的生理特性
• 3.1 铝胁迫下八仙花组培苗SOD活性的变化
• 3.2 铝胁迫下八仙花组培苗POD活性的变化
• 3.3 铝胁迫下八仙花组培苗可溶性蛋白质含量的变化
• 3.4 铝胁迫下八仙花组培苗丙二醛含量的变化
• 3.5 铝胁迫下八仙花组培苗叶绿素含量的变化
• 3.6 铝胁迫下八仙花组培苗可溶性糖含量的变化
• 3.7 铝胁迫下八仙花组培苗细胞膜透性的变化
• 3.8 铝胁迫下八仙花组培苗脯氨酸含量的变化
• 3.9 综合评价
• 3.9.1 相关性分析
• 3.9.2 隶属函数分析
• 3.10 讨论
• 3.10.1 八仙花H.macrophylla‘Coerulea’组培苗的耐铝性
• 3.10.1.1 铝胁迫对八仙花组培苗膜透性与抗氧化系统的影响
• 3.10.1.2 铝胁迫对八仙花组培苗蛋白质代谢和脯氨酸的影响
• 3.10.1.3 铝胁迫对八仙花组培苗叶绿素含量的影响
• 3.10.1.4 铝胁迫对八仙花组培苗可溶性糖含量的影响
• 3.10.2 铝胁迫下八仙花生理特性综合评价
• 4 铝胁迫下八仙花组培苗的蛋白质电泳分析
• 4.1 不同方法提取八仙花组培苗蛋白质的效果
• 4.2 不同铝浓度胁迫下八仙花组培苗蛋白质的比较
• 4.3 讨论
• 第四章 全文总结
• 参考文献
• 附图
• 致谢
• 作者简历