论文摘要
目的:掌握人皮肤成纤维细胞的培养技术,了解该细胞的生长特性;研究重组人碱性成纤维细胞生长因子（rhbFGF）和重组人表皮生长因子（rhEGF）在不同浓度下对人皮肤成纤维细胞增殖的影响,以及这两种因子对成纤维细胞有无异常分化,从而为临床准确定量应用这两种因子修复创面、加速创面愈合提供理论依据。方法:体外培养人皮肤成纤维细胞,用不同浓度的rhbFGF和rhEGF干预细胞,四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞的活性,选择最适浓度生长因子干预的细胞,用流式细胞仪检测细胞的DNA倍体情况。结果:①成纤维细胞生长过程的观察:成纤维细胞传代24h后基本贴壁,少数未贴壁的细胞在换液过程中被清除,约4天左右长满瓶底的80%,继续传代。该细胞多呈长梭形生长,在瓶内分布均匀,量多时呈栅栏状排列。②不同浓度的rhbFGF对成纤维细胞增殖的影响:分别用不同浓度序列因子干预48小时后测定MTT值,结果显示浓度在50ug/L时MTT值最大。③不同浓度的rhEGF对成纤维细胞增殖的影响:分别用不同浓度序列因子干预48小时后测定MTT值,结果显示浓度在80ug/L时MTT值最大。④培养24h时分别用流式细胞仪对rhbFGF和rhEGF最适浓度下细胞倍体的含量进行测定。结论:rhbFGF浓度在20-100ug/L之间对人皮肤成纤维细胞有明显的促增殖作用,其中以50ug/L作用最明显,为最适浓度。rhEGF浓度在30-100ug/L之间对成纤维细胞均有较明显的促增殖作用,以80ug/L作用最显著。这两种生长因子的最适浓度对人皮肤成纤维细胞的促增殖作用有差异,表现为rhEGF的作用较大。临床使用中应注意有效浓度的重要性,可以更快的促进创面愈合,降低再手术植皮率,减少瘢痕的形成,提高患者生活质量,缩短住院时间,减少医疗费用。
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