新型异种骨基质处理方法研究及性能评价

论文摘要

骨缺损是临床中常见疾患,传统治疗手段主要是通过自体骨、同种异体骨或异种骨移植达到骨缺损的修复,而异种骨则有样来源广泛的优点。 近年来,随着细胞生物学、生物材料科学、化学及工程学突飞猛进的发展和各学科间的交叉渗透组织工程学（tissue engineering）作为一门新兴边缘学科应运而生,并得到了迅猛发展。基因工程和组织工程技术的不断发展,为临床骨缺损修复提供了更多的治疗选择。利用组织工程骨修复骨缺损成为目前研究的热点。 骨组织工程（bone tissue engineering）是目前组织工程研究的热点问题之一,内容主要包括:细胞种植基质材料的研究开发、种子细胞性质的研究、与促进骨再生有关的生长因子方面的研究。其中细胞种植基质材料的研究是骨组织工程研究的重点内容,也是能否应用于临床的重要因素之一。本研究采用超临界CO2萃取对异种松质骨脱脂,然后利用酶、双氧水及超声清洗进行脱蛋白,制成的新型骨基质支架材料,通过热重分柝、扫描电镜分析、X射线粉末衍射等测试以及和用兔胚胎骨培养的成骨细胞进行体外、体内的植入培养实验对所制备的材料进行表征。研究结果表明:采用超临界CO2萃取、酶、双氧水及超声清洗处理异种松质骨,制成的骨基质支架材料,保存有天然骨的三维微多孔结构和合适的孔隙率,而具有良好的生物兼容性,与成骨细胞复合后还有良好诱导成骨能力。这些实验结果充分说明本实验所制备的骨基质支架材料,具有非常广阔的前景和巨大的潜力,有望成为优良的骨组织工程支架材料。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 骨组织工程
• 1.1.1 组织工程学的概况
• 1.1.2 骨组织工程的研究内容及目的
• 1.1.3 骨组织工程的发展
• 1.2 骨组织工程支架材料
• 1.2.1 骨组织工程支架材料的研究概况
• 1.2.2 骨基质材料的研究进展
• 1.3 超临界流体萃取技术
• 1.3.1 超临界流体定义
• 1.3.2 超临界流体萃取的基本原理
• 1.3.3 超临界流体萃取发展现状及前景
• 1.4 研究方案
• 第二章 异种骨的前处理和脱脂
• 2.1 试剂与仪器
• 2.2 前处理
• 2.2.1 处理方法
• 2.2.2 前处理的方法讨论
• 2.3 脱脂
• 2.3.1 实验方法
• 2.4 脱脂效果的评价方法
• 2.4.1 热重分析
• 2.4.2 红外光谱测定
• 2.4.3 力学性能测定
• 2.5 实验结果与讨论
• 2.5.1 热重分析
• 2.5.2 红外光谱测定
• 2.5.3 力学性能测定
• 2.6 结论
• 第三章 异种骨的脱蛋白处理
• 3.1 试剂与仪器
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 脱脂处理
• 3.2.2 脱蛋白处理
• 3.3 脱脂效果的评价方法
• 3.3.1 蛋白含量检测
• 3.3.2 红外光谱测定
• 3.3.3 力学性能测定
• 3.4 实验结果与讨论
• 3.4.1 总蛋白质的含量测定
• 3.4.2 红外光谱测定
• 3.4.3 力学性能测定
• 3.5 结论
• 第四章 新型骨基质支架材料的理化指标检测
• 4.1 试剂与仪器
• 4.2 检测方法
• 4.2.1 光镜观察
• 4.2.2 扫描电镜分析
• 4.2.3 孔隙率检测
• 4.2.4 pH值检测
• 4.2.5 微生物含量检测
• 4.2.6 X射线粉末衍射分析
• 4.3 检测结果与讨论
• 4.3.1 形态观察
• 4.3.2 扫描电镜分析
• 4.3.3 孔隙率检测
• 4.2.4 pH值测试
• 4.3.5 微生物含量检测
• 4.3.6 X射线粉末衍射分析
• 4.4 结论
• 第五章 骨基质支架材料的体外培养
• 5.1 试剂与仪器
• 5.2 成骨细胞培养和鉴定
• 5.2.1 成骨细胞培养
• 5.2.2 成骨细胞的鉴定
• 5.3 材料体外细胞培养试验
• 5.4 成骨细胞复合骨基质材料的体内植入植实验
• 5.4.1 材料
• 5.4.2 实验方法
• 5.4.3 观察方法
• 5.5 结果与讨论
• 5.5.1 成骨细胞的鉴定
• 5.5.2 材料体外细胞培养试验
• 5.5.3 成骨细胞复合骨基质材料的体内植入植实验
• 5.5 结论
• 全文结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢