木耳优良杂交菌株的初步筛选

木耳优良杂交菌株的初步筛选

论文摘要

木耳(Auricularia auricula-judae)是一种食药用价值较高的胶质担子菌,是我国传统的出口商品之一。传统的段木栽培方式逐渐被代料栽培方式替代,目前木耳菌种退化严重,单产和品质有所降低,但木耳的研究多集中于木耳多糖提取和栽培管理技术,有关木耳优良杂交菌株选育方面的研究极少。本试验以木耳菌株Au916和单片5号为亲本材料,收集孢子,分离鉴定单核体,采用单孢杂交,双-单杂交及多孢杂交等方式,通过拮抗试验及荧光染色镜检锁状联合,鉴定杂交菌株。通过菌丝生长速度测定、胞外漆酶活性测定及绿色木霉抗性测定进行杂交菌株的筛选,采用灰色关联度分析法综合评价杂交菌株的农艺性状。在获得的224杂交菌株中,56个杂交菌株在CYM培养基中菌丝体生长速度显著高于两个亲本,68个杂交菌株在培养料中菌丝体生长速度显著高于两个亲本;58个杂交菌株的漆酶活性显著高于两个亲本。木耳菌株对绿色木霉抗性测定结果表明,12个杂交菌株与绿色木霉(Trichoderma viride)对峙培养时,交接处形成明显的拮抗线;绿色木霉发酵液对其中8个木耳杂交菌株菌丝生长的抑制率显著低于两个亲本;7个木耳杂交菌株发酵液对绿色木霉菌丝生长抑制率显著高于两个亲本。根据上述试验结果,确定15个单孢杂交菌株、10个双单杂交菌株以及26个多孢杂交菌株进入秋季代料栽培试验,考察耳片厚度、耳片长度、单袋耳片干重、耳片干湿比、单耳片鲜重、栽培袋菌丝长速、耳芽形成率、栽培袋污染率8个农艺性状指标,采用灰色关联度分析法对杂交菌株进行综合评价。结果表明,6个单孢杂交菌株(D18、D2、D5、D19、D27、D7),4个双单杂交菌株(S23、S22、S1、S9)以及9个多孢杂交菌株(Du10、Du9、Du2、Du51、Du53、Du16、Du49、Du1、Du3)的关联度排名优于2个亲本,农艺性状和子实体性状较好。其中杂交菌株D19、S22、S23、Du 2、Du 9、Du 10综合性状优于其他菌株,产量比亲本高10%以上,可以进行下一步复筛栽培。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 1.1 概述
  • 1.1.1 木耳形态及其分布
  • 1.1.2 木耳食用与药用价值
  • 1.1.3 木耳栽培现状
  • 1.2 食用菌育种技术
  • 1.2.1 人工选择育种
  • 1.2.2 诱变育种
  • 1.2.3 原生质体融合育种
  • 1.2.4 杂交育种
  • 1.2.5 基因工程育种
  • 1.3 杂交后代的筛选方法
  • 1.3.1 漆酶活性测定
  • 1.3.2 抗杂能力测定
  • 1.3.3 灰色关联度法在农艺性状综合评价中的应用
  • 1.4 研究目的和意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 试验材料及试剂
  • 2.1.1 供试菌株
  • 2.1.2 培养基
  • 2.1.3 试剂
  • 2.2 试验方法
  • 2.2.1 杂交配对
  • 2.2.2 杂交菌株的鉴定
  • 2.2.3 菌丝生长速度测定
  • 2.2.4 漆酶活性测定
  • 2.2.5 抗霉能力测定
  • 2.2.6 栽培试验
  • 3 结果与分析
  • 3.1 杂交菌株的鉴定结果
  • 3.1.1 单孢分离结果
  • 3.1.2 杂交配对结果
  • 3.2 杂交菌株的菌丝生长速度
  • 3.2.1 CYM培养皿中菌丝生长速度比较
  • 3.2.2 培养料试管中菌丝生长速度比较
  • 3.3 杂交菌株漆酶活性比较
  • 3.3.1 杂交菌株氧化带测定结果
  • 3.3.2 以ABTS为底物的漆酶活性比较
  • 3.4 杂交菌株的抗霉能力测定结果
  • 3.4.1 供试杂菌的分离与鉴定
  • 3.4.2. 对峙培养结果
  • 3.4.3 绿色木霉发酵液对木耳菌落生长的影响
  • 3.4.4 木耳发酵液对绿色木霉菌落生长的影响
  • 3.4.5 不同杂交菌株栽培袋田间污染率调查结果
  • 3.5 栽培试验结果
  • 3.5.1 农艺性状比较
  • 3.5.2 杂交菌株农艺性状的用灰色关联度分析
  • 4 讨论
  • 4.1 关于木耳对绿色木霉菌的抗性讨论
  • 4.2 单孢杂交、双单杂交与多孢杂交三种方法的比较
  • 4.3 灰色关联度分析法在木耳综合性状评价中的运用
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录
  • 相关论文文献

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