中药半枝莲对5-氟尿嘧啶抗肝癌增强作用的实验研究

论文摘要

目的:本实验以4～6周龄雄性BALB/Cnu裸鼠为研究对象,制备肝癌裸鼠移植瘤模型,研究半枝莲体内抗肿瘤活性,观察半枝莲（Barbated Skullcup Herb）促进氟脲嘧啶（5-FU）对人肝癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用,并探讨两者协同抗肿瘤的作用机制,为肝癌治疗提供新思路。方法:将人肝癌HepG2细胞培养至对数生长期,用含0.02%EDTA的0.0125%胰酶消化,PBS洗涤细胞两次,1000rpm离心3min,生理盐水调整细胞悬液浓度为1×108/ml,每只裸鼠肩部皮下注射0.2ml.接种细胞第二天后,将60只裸鼠随机分为6组,每组10只,分别为阳性对照组（5-氟尿嘧啶25mg/kg）阴性对照组（生理盐水组）,受试药A组（半枝莲50mg/kg+5-氟尿嘧啶25mg/kg）,受试药B组（半枝莲30mg/kg+5-氟尿嘧啶25mg/kg）,受试药C组（组方:半枝莲10mg/kg+5-氟尿嘧啶20mg/kg）,半枝莲治疗组（100 mg/kg）。阳性对照组（5-FU组）,腹腔注射5-FU25mg/kg.d,每周给药两次,半枝莲A、B、C组每天分别用半枝莲50mg/kg、30mg/kg、10mg/kg灌胃,并且每组腹腔注射5-FU 25mg/kg.d,每周给药两次。半枝莲治疗组每天用半枝莲100mg/kg灌胃,阴性对照组每天口服同体积生理盐水。观察裸鼠成瘤情况和精神、饮食、活动、大小便等一般情况,每周用游标卡尺测量瘤体最大长度（a）、宽度（b）和高度（c）,根据公式V=ab2/2,计算肿瘤体积,并画出肿瘤体积时间生长曲线。给药5周后经裸鼠眼眶静脉丛取血后处死裸鼠（分离血清—20□冻存备用）,剥离瘤组织,肝脏,脾脏,并称重,计算每组平均瘤重和肿瘤生长抑制率。放免法检测各组裸鼠血清中外周血甲胎蛋白（AFP）含量,酶免法检测各组裸鼠血清中β-内啡肽和肿瘤组织中过氧化物酶体增殖物活化受体-γ的表达,并检测肿瘤组织中细胞色素C和线粒体钙含量。结果:人肝癌裸鼠移植瘤模型制备成功,肿瘤生长曲线显示阴性对照组肿瘤呈递增性生长,而半枝莲治疗组和阳性对照组（5-氟尿嘧啶组）生长曲线则较为低平,肿瘤生长明显受到抑制,半枝莲治疗组抑瘤率为26.4%,阳性对照组为24.4%,均与阴性对照组差异有显著性（p＜0.05）,受试药A、B、C组的抑瘤率分别为30%、39.4%、33.1%,均与阳性对照组差异有显著性（p＜0.05）,受试药B组与受试药A、C组差异有显著性。（p＜0.01）。半枝莲治疗组和受试药A、B、C组组裸鼠脾脏和肝脏的重量均显著增加（与阳性对照组比较,p＜0.05或p＜0.01）,提示半枝莲具有增强裸鼠免疫力,减少5-FU导致肝脏损伤的作用。阳性对照组或半枝莲治疗组肿瘤组织CytC有所升高而线粒体钙的含量有所降低,受试药B组降低显著,同时受试药B组肿瘤组织PPAPγ和血清中β-内啡肽的含量显著增加。结论:半枝莲有体内抗肿瘤活性,对人肝癌裸鼠移植瘤的生长有抑制作用。尤其受试药B组（半枝莲30mg/kg）显著促进阳性对照组（5-氟尿嘧啶25mg/kg）对裸鼠肝癌移植瘤的抑瘤作用,可并减少5-FU的毒副作用。细胞色素C、钙离子参与肿瘤组织细胞凋亡。受试药B和5-FU联合用药能增加肿瘤组织PPAR7和血清中β-内啡肽的表达,从而减轻炎症损伤和减少癌性疼痛,说明半枝莲能增强5-氟尿嘧啶的抗肝癌作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献综述
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
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