黄荆子亲脂性成分及其抗肿瘤活性研究

论文摘要

目的黄荆子（Fructus Viticis Negundo）为马鞭草科（Verbenaceae）植物黄荆（Vitex negundo L.）干燥成熟的果实,广泛分布于我国南方各省。其性温,味辛、苦；归肺、胃、肝经,具有祛风解表,止咳平喘,理气消食止痛的功效,且在民间多用于治疗哮喘、疟疾、胃溃疡、慢性气管炎、女性经前综合症等疾病。但是,目前对黄荆子的化学成分、药理活性等基础研究严重不足,导致活性部位和活性成分不明确。因此,对黄荆子准确、高效地进行活性部位和活性成分的跟踪筛选,阐明其活性物质,再以活性物质为基础深入评价其药理活性,可以为充分利用中药黄荆子和创新药物的开发寻找先导化合物奠定基础。本课题组前期采用生物活性导向技术,应用MTT法对黄荆子40%醇提物的7个部位进行了抗肿瘤活性筛选,实验结果表明,水饱和乙酸乙酯部位（Evn-50）和EDTA-2Na沉淀物部位（Ⅰ）对人乳腺癌（MCF-7、MDA-MB-435S、T47D）、卵巢癌（COC1）、人肺癌（A-549）、人白血病（HL-60）、人结肠癌（HT-29）、人肝癌（SMMC-7721、HepG2）、人宫颈癌（HeLa）、人胃癌（SGC-7901、MGC-803）等细胞株有显著的抑制增殖作用,具有广谱抗肿瘤活性。由于前期工作已对Evn-50部位进行较为系统的抗肿瘤活性研究以及对沉淀物部位Ⅰ（甲醇溶解部分）进行了初步的抗肿瘤活性进行了研究,因此本课题继续将沉淀物部位Ⅰ（二氯甲烷溶解部分）作为抗肿瘤活性的研究对象。方法本课题通过反复正、反相硅胶柱色谱、重结晶、Sephadex LH-20柱色谱等多种手段相结合的分离纯化方法对沉淀物部位Ⅰ（二氯甲烷溶解部分）进行了系统的化学成分研究,并利用波谱学手段、理化性质及相关文献报道数据对照鉴定了它们的结构；分别采用MTT和SRB显色法测定了分离得到的萜类和木脂素类化合物对体外培养的人慢性髓原白血病细胞株（K-562）和人肺癌细胞株（A-549）增殖抑制活性。结果从沉淀物部位Ⅰ（二氯甲烷溶解部分）分离得到14个化合物,包括3个三萜：（17RS）-17-hydroxy-3a,1 Oa-epoxy-9-eip-cucurbita-25-ene （1&2）, obtusalin （8）; 4个二萜：abietatrien-3β-ol （3）, vitexifolin C （4）, phytol （5）, （+）-polyalthic acid （6）;1个倍半萜：caryophyllenolⅡ（7）;3个木脂素：（-）-aptosimon（9）,paulownin（10）,2-O-methyarboreol （11）;3个其他类型成分：邻苯二甲酸二丁酯（12）,对羟基苯甲酸甲酯（13）,β-谷甾醇（14）。其中化合物1&2为新化合物；化合物7,9,10,11为首次从牡荆属中分离得到,化合物3,4,5,6首次从黄荆子中分离得到。体外抗肿瘤活性实验结果表明,化合物1&2,3,4对K-562细胞具有一定抑制其增殖生长作用；化合物1&2,4,6,9,10对A-549细胞具有一定抑制其增殖生长作用。结论经系统分离黄荆子亲脂性化学成分,从中分离、结构鉴定得到3α,10α-epoxy-9-eip-cucurbita型三萜,松香完型二萜,半日花烷型二萜和双四氢呋喃型木脂素,都具有一定抑制肿瘤细胞增殖生长作用,可能为黄荆子的抗肿瘤活性成分。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 研究概况
• 1.2 立论依据
• 1.2.1 黄荆子抗肿瘤活性部位的分离及筛选
• 1.2.2 Evn-50部位系统的以及沉淀物部位（Ⅰ）初步阿抗肿瘤活性研究
• 第二章 黄荆子亲脂性成分的结构鉴定
• 2.1 化学成分结构鉴定
• 2.1.1 化合物1&2的结构鉴定
• 2.1.2 化合物3的结构鉴定
• 2.1.3 化合物4的结构鉴定
• 2.1.4 化合物5的结构鉴定
• 2.1.5 化合物6的结构鉴定
• 2.1.6 化合物7的结构鉴定
• 2.1.7 化合物8的结构鉴定
• 2.1.8 化合物9的结构鉴定
• 2.1.9 化合物10的结构鉴定
• 2.1.10 化合物11的结构鉴定
• 2.1.11 化合物12的结构鉴定
• 2.1.12 化合物13的结构鉴定
• 2.1.13 化合物14的结构鉴定
• 2.2 小结
• 第三章 黄荆子亲脂性成分的分离与纯化
• 3.1 仪器与试剂
• 3.2 化学成分的分离
• 第四章 萜类和木脂素抗肿瘤活性初步研究
• 4.1 仪器、试剂、细胞
• 4.2 体外抗肿瘤活性测定
• 4.2.1 方法
• 4.2.2 实验操作步骤
• 4.2.3 实验结果
• 4.3 小结与讨论
• 第五章 结果与讨论
• 第六章 参考文献
• 第七章 牡荆属植物二萜类化合物研究进展
• 7.1 结构特征
• 7.2 生物活性
• 7.3 结语
• 附录 黄荆子亲脂性成分波谱图
• 致谢
• 攻读硕士学位期间的研究成果