覃培栩徐少林潘良秋
（柳州市妇幼保健院检验科广西柳州545001）
【摘要】抗酸杆菌包括非结核分枝杆菌、结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等，近年来,非结核分枝杆菌分离率和患病率逐年上升，渐渐受人们关注。而医院自来水系统中的非结核分枝杆菌不仅对医院住院病人造成院内感染，而且也对我们实验室的抗酸染色造成假阳性。本研究显示，本院的自来水系统中水龙头检出抗酸杆菌阳性率高达18.6%。
【关键词】抗酸杆菌；非结核分枝杆菌；调查研究
【中图分类号】R195【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）21-0390-01
抗酸杆菌是指在抗酸染色过程中能抵抗酸性酒精的脱色作用，可以被染成红色的细菌。如非结核分枝杆菌（non-tuberculousMycobacteri-um,NTM）、结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等。而NTM主要存在于自然环境的各个地方，如水源、土壤、日常用具、空气等，属于条件致病菌。近年来由非结核分枝杆菌感染的肺病发病率有逐年上升的趋势，艾滋病更是加剧了NTM病的流行，渐渐成为人们关注的问题。为了解医院自来水环境中抗酸杆菌的存在情况，我们对医院自来水系统进行了采样调查，现报告如下：
1.材料与方法
1.1标本来源标本来源取自柳州市妇幼保健院的自来水系统。
1.2标本选择我们采取直接涂片法进行抗酸染色、显微镜下找抗酸杆菌，标本采集于我院不同楼层和相同楼层的86个水龙头进行涂片，每个水龙头制1张片。
1.3制片方法选择带有滤网或套有胶管的水龙头，拧开水龙头滤网或拔掉胶管，用无菌棉签在滤网内侧或水龙头内壁或胶管内壁反复涂抹，然后涂在经严格消毒过的玻片上进行制片，制成片后进行干燥固定。
1.4萋-尼抗酸染色
1.4.1试剂珠海贝索生物技术有限公司生产的结核菌染色液。
1.4.2步骤(1)在通风处自然干燥；(2)加石炭酸复红溶液,慢慢加热至有蒸气出现，切不可沸腾,染5min水洗；(3)加3%的盐酸脱色至红色完全脱去，水洗；(4)加美蓝复染1min，水洗；(5)水干后油镜阅片，抗酸杆菌呈红色，背景为蓝色。
1.5结果判断萋尼氏抗酸染色镜检结果按《全国结核病防治工作手册》进行分级报告共分5级，即±：1~8条/300视野；1+：3~9条/100视野；2+：1~9条/10视野；3+：1~9条/视野；4+：≥10条/视野
2.结果
2.1阅片油镜下见堆积成团、成束，排列无序，也有呈链状、索状红色菌体达到1+或以上者视为找到抗酸阳性菌。
2.2在86个水龙头中，有16个水龙头找到抗酸杆菌，阳性率为18.6%（16/86）。
科室抽检水龙头数目阳性水龙头数目阳性率（%）
检验科16425.0
儿保科14214.3
新生儿一病区14321.4
新生儿二病区14214.3
重症医学科14425.0
儿科病房1417.1
合计861618.6
3.讨论
3.1目前，人们对NTM的研究尚不够深入，缺乏较详尽系统的NTM感染和发病的流行病学资料，对医院自来水系统中的NTM更是少有报道，对NTM菌种鉴定方法也未能推广。目前，对分枝杆菌菌种鉴定方法主要有三类[1]：一是基于生长特性和生化反应的传统方法，二是基因分析方法，三是分析研究特定菌体成分(如脂肪酸、分枝菌酸等)特性的色谱方法，这些方法操作繁琐、报告周期长、费用昂贵，很少应用于医院实验室。而医院实验室诊断分枝杆菌感染最常用方法是萋尼氏抗酸染色法，因其方法操作简单、方便、快速、成本低而受广泛应用。我们在医院自来水系统中发现的抗酸杆菌，根据其发现的环境和生长特性，我们确定其为NTM，排除结核分枝杆菌麻风分枝杆菌的可能性。
3.2NTM种类多，分布广泛，医疗机构因注射器具、手术器械及医疗用水等高压灭菌不合格或使用不规范造成NTM感染的暴发事件时有发生，如美国CDC曾报道多个州因纹身而发生NTM的皮肤感染等[2]。国内也有因NTM医院感染的暴发事件[3]。而HIV感染者和AIDS患者因免疫力低下更容易感染[4]。有研究显示，非结核分枝杆菌引起的感染相对于结核分枝杆菌来说致病性低一些[8]，但它们所引起的临床症状很相似，诊断容易混淆，容易造成误诊，影响治疗效果。本研究所调查的阳性率为18.6%较鲍容等报道应用培养的方法对ICU自来水非结核分枝杆菌污染状况调查阳性率89.3%有一定的差距，是因为直接涂片法具有一定的局限性，需标本中含104/ml条分枝杆菌方能检出，说明医院的自来水系统中普遍存在NTM。由于NTM对于含氯消毒剂具有很高的耐受性[5]，常规出厂的自来水所含的氯消毒剂根本无法消灭受污染的NTM。我们选择带有滤网和套有胶管水龙头进行制片，是因为滤网和胶管对水中的NTM和杂质有一定的收集能力，提高实验的检出率。由于NTM的疏水特性而形成的生物膜使其可持续生存于供水系统中，因此医院供水及饮水系统使用的镀锌管道可使NTM长期生存，这可能是NTM医院内感染的主要来源之一[2]。所以在医院平时用久的带滤网或套有胶管的水龙头应该定期拆下滤网或胶管用二氧化氯进行消毒[5]，避免医院的重症病人或有呼吸系统疾病的病人因机体抵抗力下而感染致肺内外病变和院内感染，同样也容易造成实验室污染而带来的抗酸染色假阳性，给临床诊断和治疗带来障碍，给我们的医务人员带来危害。
【参考文献】
[1]刘志辉,蔡杏姗,竺澎波等.应用气相色谱技术分析全细胞脂肪酸快速鉴定分枝杆菌.中华结核和呼吸杂志，2005年6月第28卷第6期403-406
[2]CentersforDiseaseControlandPrevention.Tattoo-AssociatedN0ntubercu1ousMycobacterialSkinInfections-MultipleStates，2011-2012[J]．MMWRMorbMortalWklyRep2012,61(33):653-656
[3]熊昌平,周先蓉,杨元国．一起非结核性分枝杆菌导致医院感染的调查分析[J]．中华医院感染学杂志，2010，20(2):255
[4]吴琪茵、黎友伦.非结核分枝杆菌病的流行趋势、诊断及治疗中国人兽共患病学报2010,26(5)：491-494
[5]王巍.非结核分枝杆菌病流行病学诊断治疗近况[J].结核病健康教育，2008（2）：20-26.
[6]郑琦，陈超，张晓健等.给水管网中耐氯分枝杆菌的灭活特性及机制研究.环境科学,2013,34(2):576-582.