褪黑素对肝热缺血再灌注损伤的保护作用实验研究

论文摘要

目的:研究大鼠肝热缺血再灌注损伤（hepatic warm ischemia-reperfusion injury）时的细胞凋亡现象和线粒体功能的损伤,及抗氧化剂褪黑素（melatonin）减轻线粒体损伤和抗凋亡作用。 方法:选用成年Sprague-Dawley大鼠,随机分为假手术组（sham operation）、肝缺血再灌注损伤模型组（HIRI组）和褪黑素干预组（MT组）。其中MT组又按给药时间分为缺血前给药组和再灌注前给药组。建立大鼠HIRI模型后,于不同的时间点处死大鼠后取材。肝组织分别行HE染色观察组织病理变化,电镜观察肝细胞凋亡和线粒体结构的改变,TUNEL技术测定肝细胞凋亡程度,DiOC6（3）标记,流式细胞仪测定线粒体膜电位的改变。提取线粒体测定其MDA、GSH变化,下腔静脉取血测定丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）变化,并比较各组之间的差别。 结果:1、缺血再灌注组肝细胞凋亡指数明显高于假手术组:同时线粒体内MDA水平增高,GSH减少,伴随膜电位的降低;MT处理组凋亡率则明显低于HIRI组,线粒体膜电位高于HIRI组,伴随GSH的升高和MDA减少。各组间的差别有统计意义（P<0.05）2、HIRI组血清ALT和AST明显高于假手术组,而MT处理组血清ALT和AST明显低于HIRI组。各组间的差别有统计意义（P<0.05）。3、HIRI组病理损伤明显较假手术组严重,MT处理组病理损伤则明显轻于HIRI组。 结论:1、肝脏在缺血再灌注时出现严重的细胞凋亡,细胞的凋亡是组织缺血再灌注损伤的结果或表现形式。同时伴随线粒体膜电位的降低和脂质过氧化损伤。线粒体功能的损伤可能是细胞损伤的始动因素之一。2、褪黑素由于具有抗脂质过氧化功能而有效减轻线粒体的损伤,减少细胞的凋亡,从而起到抗缺血再灌注损伤的作用。

论文目录

• 苏州大学硕士学位论文详细摘要
• 一、引言
• 二、材料与方法
• 三、实验结果
• 四、讨论
• 五、结论
• 六、参考文献
• 七、附图
• 八、综述
• 九、缩略词表
• 十、研究生期间发表和待发表文章
• 十一、致谢