一、维生素C对不同浓度氧环境培养细胞化学发光的影响（论文文献综述）
管羽[1]（2021）在《基于Stenhouse盐构筑的H2O2响应型级联肿瘤药物递送系统》文中指出Stenhouse盐作为一种新型的光致变色分子,光照之后,结构由疏水性变为亲水性的迥然差异使得其成功应用于肿瘤药物递送领域。然而,始终需要外部光源激发来破坏胶束结构,是Stenhouse盐在药物递送领域绕不开的缺陷。为了解决这一实际问题,我们基于肿瘤微环境过量表达的H2O2,设计了响应H2O2进行自发光,自发驱动破坏胶束结构的药物递送系统。通过改变Stenhouse盐的供电子基团,成功设计出了吸收波长在500nm附近的Stenhouse衍生物。基于此,合成了发光波长在550nm附近的荧光团BLSA,实现了较好的能量匹配。通过在胶束中包裹抗肿瘤药物DOX,实现了肿瘤部位响应H2O2之后的级联药物释放。基于这一设计,我们进行了以下三部分的工作:1.合成工作。进行胶束分子DASA-PEG,荧光团BLSA的合成,制备了完整的药物递送体系CLDRS。2.进行基础表征工作。通过光谱的表征,一方面证明了药物的成功负载,另一方面成功实现了响应H2O2之后产生的化学发光,再次被胶束所吸收。通过DLS的测试,实验组在加入H2O2之后粒径结构由13nm降至3nm左右,实现了级联反应的成功。3.进行生物安全性以及细胞应用的实验。胶束分子对于He La以及L929细胞均表现出良好的生物安全性。而完整的药物递送系统CLDRS,对于He La细胞明显表现出更高的生物毒性。
徐飞飞[2]（2021）在《石菖蒲挥发油成分α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究》文中指出目的本研究分别通过体外实验评价α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤的小胶质细胞的保护作用及其机制;通过体内动物实验评价α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤小鼠的影响,并对其作用靶点与途径进行网络药理学预测。方法体外实验主要采用α-细辛醚预处理BV2细胞,建立OGD/R模型模拟脑缺血再灌注损伤。1.以CCK-8方法筛选α-细辛醚给药剂量及OGD/R模型的建立方法;2.以CCK-8方法测定α-细辛醚对OGD/R模型损伤细胞的活力影响;3.通过观察细胞形态变化分析正常组、OGD/R模型组细胞及α-细辛醚对OGD/R模型损伤细胞的一般形态影响;4.酶联免疫吸附法检测BV2细胞分泌的促炎因子IL-1β、IL-18及抑炎因子IL-10、IL-4的水平;5.Western blot检测BV2细胞促炎介质TNF-α和抑炎介质TGF-β的蛋白表达量;6.检测BV2细胞炎性相关蛋白NLRP3、caspase 1、NF-κB的表达量;7.酶联免疫吸附法检测BV2细胞ROS的活性。体内实验主要通过α-细辛醚预给药C57BL/6J小鼠,建立MCAO模型模拟脑缺血再灌注损伤。1.以Longa五分法评价α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤小鼠的神经功能缺损的影响;2.以激光散斑系统分析小鼠脑缺血面积及将脑血流灌注量数据化,分析α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤小鼠缺血侧脑血流恢复的作用;3.采用网络药理学数据挖掘方法预测α-细辛醚作用于脑卒中的靶点与分子信号通路。结果体外实验结果:1.经过α-细辛醚给药剂量及OGD/R模型方法筛选后,确定α-细辛醚给药剂量分为低、中、高剂量组（1μM、4μM、16μM）;确定以10μM剂量的Na2S2O4建立OGD/R模型,氧糖剥夺时间为1.5 h,再灌注时间为12 h;2.α-细辛醚对OGD/R模型损伤细胞的活力有显着提高作用,α-细辛醚低、中、高剂量组细胞随着给药剂量的增加,“阿米巴样”细胞减少,胞体逐渐立体饱满,从细胞形态结果能够直观看出α-细辛醚对正常细胞具有一定的促增殖作用;3.α-细辛醚预处理能够显着降低OGD/R损伤BV2细胞促炎因子IL-1β和IL-18的释放,以及降低促炎介质TNF-α的蛋白表达;还能够显着升高抑炎因子IL-10和IL-4的释放,以及促进抑炎介质TGF-β蛋白表达,并呈量效关系,以α-细辛醚高剂量（16μM）效果最佳。4.α-细辛醚预处理能够显着降低OGD/R模型损伤细胞炎性相关蛋白NLRP3、caspase 1、NF-κB的表达量及ROS的活性。体内实验结果:1.α-细辛醚能够显着降低脑缺血再灌注损伤小鼠的神经功能缺损,改善其行为表现;2.α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤小鼠缺血脑侧血流有促进恢复的作用,能够降低脑缺血面积;3.网络药理学预测α-细辛醚作用脑卒中的靶点共95个,其机制主要涉及神经活性配体-受体相互作用、细胞周期、p53信号通路、钙信号通路、氮代谢、类固醇激素的合成、血清素能突触等20条分子信号途径。结论体内外研究结果证实α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤有显着的保护作用,作用机制主要是通过调控ROS活性,抑制NF-κB的磷酸化,以降低NLRP3炎症小体的过度活化,进而降低促炎因子IL-1β与IL-18的分泌,促进抑炎因子IL-10与IL-4的分泌,通过抗炎起到保护脑缺血再灌注损伤的作用。
李泳欣[3]（2021）在《Nrf2-ARE信号通路抵御小鼠乳腺氧化应激的分子机制及槲皮素对其调控研究》文中研究指明泌乳功能对哺乳动物的生存繁衍至关重要。乳汁不仅可以保证哺乳动物的新生儿存活,同时也为人类生长发育提供了营养物质。动物哺乳期间,多种疾病和亚健康状态均会影响乳腺健康。氧化应激是损害乳腺健康的常见因素,通常会抑制乳腺功能,造成泌乳量和乳品质下降。自然界中的天然活性物质具有抗氧化、抗炎等特性,得到了广泛关注。Nrf2-ARE是目前已知最重要的抗氧化相关信号通路之一,生物活性物质是否可通过Nrf2-ARE途径缓解乳腺氧化应激,值得深入研究。因此,本研究利用Nrf2敲除小鼠,解析了Nrf2-ARE途径在乳腺氧化应激中的作用机制,随后以乳腺上皮细胞为模型探究可通过Nrf2-ARE通路抵御氧化应激的生物活性物质,并阐明其作用机制。本研究旨在为Nrf2-ARE信号通路抵御乳腺氧化应激的分子机制提供理论依据,为定向调控和防治乳腺氧化应激的饲料添加剂开发奠定科学基础。1 Nrf2基因敲除对小鼠生长繁殖和乳腺健康的影响本研究首先对小鼠进行基因型鉴定,确定Nrf2基因型不影响母鼠生长繁殖性能和10-12周龄母鼠哺乳期6-11天平均泌乳量,明确Nrf2基因敲除小鼠可用于乳腺健康研究。继而选用10-12周龄泌乳早期（第3天）WT、Nrf2（+/-）和Nrf2（-/-）小鼠各6只,每只小鼠第四对乳腺的一侧注射50μL LPS（0.2 mg/ml）作为处理组,另一侧乳腺注射50μL PBS作为对照组,注射后24 h采集第四对乳腺组织。另取10-12周龄泌乳中期（第12天）WT、Nrf2（+/-）和Nrf2（-/-）小鼠各5只,分别注射LPS和PBS后3 h取乳样。分析乳腺组织外观、乳中蛋白含量、乳腺炎性因子和氧化还原平衡相关基因表达,综合判断乳腺健康情况。结果表明,应激条件下Nrf2（-/-）小鼠的乳腺组织中β酪蛋白基因表达显着升高,κ酪蛋白基因表达显着降低,而WT小鼠乳蛋白基因无明显变化。转录组学结果显示,LPS处理后,Nrf2（-/-）小鼠乳腺血红素加氧酶1（HO-1）、谷氨酸/胱氨酸反向转运体轻链（x CT）和谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基（GCLM）的m RNA水平显着低于WT小鼠,同时总抗氧化能力明显降低。应激条件下Nrf2（-/-）小鼠乳腺出现更多炎性因子表达上调。以上结果提示,相比WT小鼠,Nrf2（-/-）小鼠乳腺的氧化还原平衡被打乱,乳腺健康更易受到外界刺激的不利影响。2 Nrf2-ARE信号通路抵御小鼠乳腺氧化损伤的作用机制本试验使用上述泌乳早期（第3天）小鼠注射LPS 24 h后采集得到的第四对乳腺组织样本,检测乳腺抗氧化酶类表达、谷胱甘肽（GSH）含量、GSH与还原性谷胱甘肽（GSSG）比例、GSH合成与代谢相关基因表达、细胞凋亡与内质网应激情况。结果表明,LPS刺激不改变WT小鼠的过氧化氢酶和过氧化物还原酶1表达,但在Nrf2（-/-）小鼠乳腺降低了以上抗氧化酶表达。LPS刺激上调了WT小鼠乳腺Nrf2和HO-1的基因表达,但Nrf2（-/-）小鼠中未见明显上调。此外,两种Nrf2敲除小鼠未能如WT小鼠一样,受到LPS诱导后显着上调GSH含量和GSH/GSSG比例。Nrf2（-/-）小鼠中谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）、GCLM和x CT的m RNA表达丰度在LPS应激条件下也低于WT小鼠。另外,LPS处理增加了Nrf2（-/-）小鼠中促凋亡因子（BAX）的表达、BAX/Bcl-xl比例和内质网应激标记物（GPR78）表达,而WT鼠未见明显差异。以上结果提示,Nrf2-ARE信号通路同时调节酶类和非酶类抗氧化防御系统,可通过Nrf2/GCL/GSH/GPx1途径准确调控GSH的合成与消耗,并且对细胞凋亡和内质网应激也具有影响作用。3 Nrf2-ARE通路介导槲皮素抵御乳腺上皮细胞氧化损伤的作用机制3.1槲皮素抵御乳腺上皮细胞氧化损伤的作用效果本试验旨在探究可缓解乳腺氧化应激的生物活性物质。首先采用不同浓度H2O2（50,100,250,500,750,1000μΜ）刺激乳腺上皮（HC11）细胞24 h建立氧化损伤模型。使用不同浓度槲皮素（0、5、10、15、20、25μΜ）刺激HC11细胞24 h,确定HC11细胞耐受浓度,检测槲皮素预处理2 h对H2O2引起的HC11细胞增殖受阻和乳酸脱氢酶（LDH）释放的改善效果。随后,将HC11细胞分为四组处理,槲皮素和槲皮素预处理组使用20μΜ槲皮素培养细胞;2小时后,H2O2和槲皮素预处理组加入100μΜH2O2培养细胞24小时,对照组使用无血清培养基培养。对四组细胞提取蛋白,检测CAT与SOD活性、抗氧化蛋白（x CT,GCLM,TXNRD1）表达和细胞凋亡相关蛋白（BAX,BCL-2）表达。结果发现100μΜH2O2可降低HC11细胞活力至对照组60%以下,LDH释放达到24%以上,适合作为应激研究模型。20μΜ槲皮素对HC11细胞的保护效果最好,可显着恢复H2O2造成的T-AOC降低,且槲皮素预处理显着改善了细胞的抗氧化酶活性和抗氧化蛋白表达,但对细胞凋亡未见明显影响。以上结果提示槲皮素具有改善HC11细胞增殖受阻、细胞毒性和氧化损伤的重要作用。3.2 Nrf2-ARE通路介导槲皮素抵御乳腺上皮细胞氧化损伤的分子机制本试验旨在阐明Nrf2-ARE信号通路介导槲皮素改善HC11细胞氧化损伤的分子机制。首先将HC11细胞分为四组处理,处理方式如上文所述,探究槲皮素对应激状态下Nrf2-ARE和MAPKs信号通路激活情况的影响。随后,使用信号通路抑制剂,探究Nrf2-ARE信号通路对MAPKs通路调控槲皮素作用的调控机制,研究两者在槲皮素抵御氧化应激中的关系。最后,将细胞分为7组,其中对照组、H2O2组和槲皮素预处理组处理方法如上文所述。抑制剂组分别使用Nrf2抑制剂ML385（5μM）、p38 MAPK抑制剂SB203580（25μM）、ERK抑制剂PD98059（100μM）和JNK抑制剂SP600125（10μM）预处理HC11细胞1小时,之后添加槲皮素处理2小时,最后使用H2O2刺激细胞24小时,检测细胞增殖、细胞毒性、抗氧化防御系统的变化,以阐明抗氧化相关信号通路在槲皮素抵御氧化应激中的重要作用。结果表明,H2O2造成HC11细胞Nrf2-ARE信号通路被激活,MAPKs信号通路也被激活。槲皮素预处理显着改善了Nrf2-ARE和MAPKs信号通路激活情况。ERK抑制剂显着提高p-NRF2/NRF2比例,p38 MAPK抑制剂显着降低p-NRF2的蛋白表达,提示p38 MAPK和ERK信号通路可能通过调节Nrf2-ARE信号途径的激活状态,从而影响槲皮素的抗氧化能力。四种抑制剂均显着降低了槲皮素对细胞增殖的改善作用,不影响槲皮素的抗细胞毒性。对抗氧化防御系统来说,槲皮素对T-AOC的改善作用主要依赖于Nrf2-ARE、p38 MAPK和ERK通路,x CT表达主要依赖于Nrf2-ARE信号途径,槲皮素对CAT酶活和GCLM表达的恢复作用同时受到Nrf2-ARE和MAPKs信号通路的调节。综上所述,Nrf2-ARE信号通路调节下游抗氧化酶表达,介导Nrf2/GCL/GSH/GPx1途径调控GSH的合成与消耗,对细胞凋亡和内质网应激具有调节作用,以此维持乳腺氧化还原平衡。Nrf2-ARE信号通路介导槲皮素改善HC11细胞增殖和抗氧化防御能力,恢复氧化还原平衡。此外,MAPKs信号通路也参与调节槲皮素的细胞保护功能。
姚益顺[4]（2021）在《射频烫漂灭酶对莴笋理化特性的影响及其细胞作用机理研究》文中认为鲜莴笋水分含量高且含有多种氧化酶,易发生腐烂、褐变,严重阻碍了莴笋深加工产品的生产。烫漂是果蔬加工过程中的重要环节,可有效钝化果蔬中过氧化物酶（POD）等氧化酶,延长产品货架期。传统热水和蒸汽烫漂存在加热均匀性差、产品品质低、营养物质损失严重、水资源浪费等缺陷。射频干式烫漂可避免物料和高温热水/蒸汽的接触,在果蔬烫漂领域具有潜在的应用价值。目前,加热均匀性、灭酶效率、品质特性是果蔬射频烫漂研究中的关键问题,相关规律和机理还需要进一步探究。本研究以莴笋为研究对象,研究了样品高度和极板间距对莴笋块升温速率和加热均匀性的影响;以辣根过氧化物酶（HRP）为目标酶,探究射频加热对酶活性和构象的影响,以及射频加热温度对莴笋POD酶活性、理化特性和微观结构的影响;评价了射频加热速率对莴笋理化特性和细胞形态的影响;设计了一种蒸汽辅助射频加热装置,研究射频预加热温度和蒸汽烫漂时间对莴笋块加热均匀性、POD酶失活效率以及品质特性的影响。研究结果如下:（1）极板间距和样品高度对莴笋块升温速率和加热均匀性均有显着影响（P<0.05）,极板间距为100 mm、样品高度为55 mm时,莴笋块升温速率最快,加热均匀性最好。射频加热莴笋块呈中心加热模式,样品边缘温度低。（2）射频升温过程中,HRP二级结构和三级结构发生变化,导致HRP活性随温度先升高后降低;射频加热温度对POD活性、重量损失、质构、颜色和维生素C保留率和相对电解质渗漏率有显着影响（P<0.05）;相同POD活性水平下,相对于传统热水烫漂,射频加热后样品的质构软化、色差、营养损失率和微观结构破坏程度更小;射频加热破坏了细胞膜结构,导致细胞膨压降低,细胞壁中的果胶成分受热降解、纤维素网络变疏松导致细胞壁结构被破坏以及相邻细胞分离,导致样品理化性质劣变。（3）随着极板间距减小,射频加热速率和POD失活速率增大;射频加热速率对莴笋质构、颜色和相对电解质渗漏率有显着影响（P<0.05）;相同酶活性水平下,快速-短时间（极板间距100 mm下射频加热5 min）的射频加热对细胞结构的破坏程度更小,维持了更佳的质构和颜色,减少了营养成分损失,适合速冻和脱水产品的生产;而慢速-长时间（极板间距120 mm下处理11 min）的射频加热对细胞结构的破坏程度大,细胞内营养成分在后续加工中更容易溶出和释放,适合果蔬汁和果蔬酱的生产。（4）相对于射频单独烫漂,蒸汽辅助射频烫漂显着提高了莴笋POD的失活效率和加热均匀性（P<0.05）;射频加热至80℃联合蒸汽烫漂1 min对莴笋细胞膜的破坏程度最小,维持了最佳的质构、颜色、维生素C保留率等品质特性。
孙雅望[5]（2021）在《脂多糖引起奶牛乳腺和机体氧化应激损伤及蒲公英提取物对其阻断效果的研究》文中认为在实际生产中,饲喂高精料饲粮常常引起奶牛发生亚急性瘤胃酸中毒（Subacute ruminal acidosis,SARA）;此外,奶牛也常患有乳腺炎和子宫炎。在上述情况下,奶牛体内产生大量的内毒素（亦称脂多糖,Lipopolysaccharide,LPS）,其会诱导奶牛机体以及乳腺上皮细胞发生氧化应激,这会影响奶牛健康和生产性能。为了寻求有效的解决方法,并结合国内禁抗养殖的要求,本研究选取具有抗氧化特性的蒲公英提取物作为潜在的抗生素替代物,首先通过体外细胞培养试验来探索蒲公英提取物对LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化应激的抑制效果及作用机制,然后通过奶牛饲养试验来验证高精料饲粮模式下蒲公英提取物对机体包括乳腺氧化应激的改善作用。本研究分为以下三个试验:1.不同浓度LPS对奶牛乳腺上皮细胞氧化应激状态的影响本试验旨在探究不同浓度LPS对奶牛乳腺上皮细胞（MAC-T）氧化应激和DNA损伤的影响。培养的细胞随机分为6组,添加的LPS浓度分别为（0,0.1,0.5,2.5,12.5,100 ng/mL）,LPS的处理时间为48小时。结果显示:（1）在LPS处理后,细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）的生成与LPS浓度存在剂量效应。（2）LPS对细胞活性的影响差异不显着,但通过回归分析发现,细胞活性与LPS浓度呈负相关（P<0.05）。（3）在100ng/mL浓度下,LPS处理组显着增加了细胞内的蛋白质和DNA氧化损伤产物（P<0.05）的含量,且通过回归分发现LPS浓度与氧化损伤标志物含量之间呈显着正相关（P<0.05）。（4）当LPS处理浓度大于等于0.5ng/mL时,细胞内总抗氧化能力（Total antioxidant capability,T-AOC）显着高于（P<0.05）对照组和浓度为0.1ng/mL的LPS组。2.蒲公英提取物通过Nrf2通路缓解脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化应激本试验旨在探究蒲公英提取物（Dandelion aqueous extracts,DAE）在LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化应激状态下的抗氧化作用及其通过核转录因子E2相关因子2（Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）的调控缓解氧化应激的作用机制。培养的细胞随机分为6组,分别为对照组（不含LPS和DAE）、LPS组（100ng/mL）、DAE10组（LPS组+10μg/mL DAE）、DAE50组（LPS组+50μg/mL DAE）、DAE100组（LPS组+100μg/mL DAE）、DAE200组（LPS组+200μg/mL DAE）,各组细胞的处理时间均为48小时。结果显示:（1）奶牛乳腺上皮细胞的活性受到LPS的显着抑制（P<0.05）,但这种抑制作用在添加DAE后得到缓解。（2）经过LPS处理后,细胞内ROS含量显着增加（P<0.05）,同时细胞内蛋白质、脂肪和DNA氧化损伤产物的含量也显着升高（P<0.05）,表明LPS引发了细胞内的氧化应激及氧化损伤。与对照组和LPS组相比,DAE50组、DAE100组和DAE200组显着抑制了（P<0.05）细胞内ROS的产生。（3）与LPS组相比,添加不同浓度DAE后能显着降低（P<0.05）细胞内丙二醛（Malondialdehyde,MDA）、8羟基脱氧鸟苷（8-hydroxy-2’-deoxyguanosine,8-OHd G）以及蛋白质羰基（Protein carbonyl,PC）的含量,其中DAE50组的降低幅度更为显着。（4）与对照组和LPS组相比,添加不同浓度DAE还显着提高了（P<0.05）抗氧化酶活性以及总抗氧化能力。（5）经过LPS处理后,细胞内Kelch样结合蛋白1（Kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1）蛋白的表达量显着下调（P<0.05）。与LPS组相比,DAE50组细胞内Nrf2蛋白的表达量显着上调（P<0.05）,同时Keap1蛋白的表达量显着下调（P<0.05）。（6）与LPS组相比,添加不同浓度DAE在一定程度上调了Nrf2调控的抗氧化基因表达,其中DAE50组中不同抗氧化基因的表达与LPS组相比差异均显着（P<0.05）。3.高精料饲粮中添加蒲公英提取物对改善奶牛生产性能及降低机体氧化应激的作用本试验旨在探究高精料饲粮中添加过瘤胃保护的蒲公英提取物对泌乳期奶牛产奶性能、免疫指标和乳腺氧化应激的作用效果。试验采用随机区组设计,选取体况良好、泌乳天数接近（70±15天）的60头荷斯坦牛。以初始产奶量、体细胞数和胎次为区组因素分为3组（分组后上述3个指标组间无显着差异）,每组20头。三个试验组分别为LCD组（低精料饲粮,饲粮精粗比为4:6）、HCD组（高精料饲粮,饲粮精粗比为6:4）和DAE组（在HCD组的基础上添加0.5%的蒲公英提取物）。试验期为35d,试验期内分别在早中晚进行三次饲喂,自由饮水。结果显示:（1）从第4周起,HCD组和DAE组奶牛产奶量显着高于（P<0.05）LCD组。三组饲粮在不同时期对乳品质产生不同影响。（2）相比于LCD组和DAE组,HCD组奶牛瘤胃p H值极显着降低（P<0.01）。HCD组奶牛瘤胃内和血浆中LPS含量均极显着高于（P<0.01）LCD组,DAE组奶牛瘤胃LPS含量介于HCD组和LCD之间且与两组的差异均极显着（P<0.01）。（3）在试验期第2周和第4周,HCD组牛奶中体细胞数显着高于（P<0.05）DAE组。HCD组奶牛血液中白细胞数、淋巴细胞数和淋巴细胞百分比均显着高于（P<0.05）LCD组。LCD组奶牛血液中中心粒细胞百分比显着高于（P<0.05）HCD组。（4）HCD组奶牛血清中8-OHd G及PC含量显着高于LCD组。LCD组和DAE组奶牛血清中过氧化物酶（Catalase,CAT）活性极显着高于（P<0.01）HCD组。（5）通过相关分析可知,血浆中LPS浓度与血清中8-OHd G和PC含量呈极显着地正相关性（P<0.01）,与血清中丙二醛含量呈显着正相关（P<0.05）,与血清中CAT活性呈显着负相关（P<0.01）,与超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）活性呈显着负相关（P<0.05）。（6）LCD组奶牛乳腺上皮细胞中α、β和κ酪蛋白m RNA表达量均极显着高于（P<0.01）HCD和DAE组,脂肪酸合成酶和硬脂酰辅酶A去饱和酶m RNA表达量显着高于HCD组,乙酰辅酶A羧化酶αm RNA表达量显着高于HCD组和DAE组。（7）DAE组奶牛乳腺上皮细胞中Nrf2转录调控因子m RNA表达量极显着高于（P<0.01）LCD组和HCD组,胱氨酸/谷氨酸转运体和NAD（P）H醌氧化还原酶1的m RNA表达量显着高于（P<0.05）HCD组。综上所述,LPS的浓度与LPS引起的奶牛乳腺上皮细胞氧化应激总体上呈正相关。DAE可以作为有效的抗氧化剂来抑制LPS诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化应激,并且能够通过上调Nrf2调控的抗氧化基因来发挥作用。高精料饲粮模式虽然对产奶量有一定提高,但对乳品质、瘤胃内环境稳态、机体抗氧化能力均有不同程度的负效应。高精料饲粮中添加蒲公英提取物能够通过Nrf2调控因子增强机体包括乳腺的抗氧化性能,并改善瘤胃内环境和生产性能。
陈巧凤[6]（2020）在《莱菔硫烷对缺氧环境下成骨细胞活性和矿化的影响》文中认为一、研究背景骨质疏松是一个重要的公共卫生问题,特别是原发性骨质疏松,已成为严重影响中老年人健康的慢性病之一,但是目前的诊疗现状并不理想。骨折是骨质疏松症的严重后果,显着增加患者的致残率和病死率,并带来极大的家庭和社会经济负担,有效的抗骨质疏松治疗可降低骨折的发生,对于已发生骨折的患者也能有效避免再次骨折,识别并积极治疗骨质疏松具有非常重要的临床和社会意义。目前市面上的抗骨质疏松药物主要通过调节钙的吸收,抑制破骨细胞的生物活性,减少破骨细胞数量,减少骨量丢失,促进成骨细胞的生成等发生作用,但也存在如增加骨折发生率、肿瘤形成、血栓形成等危险,因此我们考虑是否有合适的中草药或植物应用于抗骨质疏松治疗。关于骨质疏松症发生机制研究有很多,氧化应激是研究较为深入的机制之一。莱菔硫烷（SFN）来源于各种十字花科植物,具有抗氧化、保护线粒体、抗癌等作用,抗氧化应激是它最突出的功能。目前少有SFN作用于成骨细胞的文献,我们拟通过实验了解SFN对氧化应激下成骨细胞增殖矿化的影响。十字花科蔬菜是我们日常生活膳食中容易获得和补充的,希望它的抗氧化功能可以使之成为预防骨质疏松的日常保健甚至治疗药物之一。二、材料与方法首先将hFOB1.19分为常氧组（20%O2）与缺氧组（1%O2）进行培养24h,48h,72h,96h,120h,观察缺氧条件下成骨细胞增殖、凋亡和活性氧水平;其次,我们在常氧条件下分别将Oumol/L、5umol/L、10umol/L、20umol/LSFN作用于细胞24h和48h,观察常氧下SFN对于成骨细胞的增殖影响;最后我们将实验分为4组,即常氧组、缺氧48h复氧组、SFN预处理24h后缺氧复氧组、SFN预处理48h后缺氧复氧组并培养至21d,分别在7d,14d和21d观察细胞的生长情况,抗氧化指标及矿化指标。三、结果第一组实验发现细胞缺氧大于48h后增殖明显减少、凋亡明显增加,第二组实验结果发现10umol/L的SFN刺激可以抗氧化、促进细胞的生长及减少细胞凋亡,大于10umol/L可能对成骨细胞的增殖起负作用。因此,我们将缺氧48h作为实验时间,10umol/L作为SFN预处理浓度。当成骨细胞处于缺氧后复氧的环境,细胞内ROS升高,细胞凋亡比例升高,caspase-3的活性增加,氧化指标HIF-1a、VEGF、MMP-9 升高,成骨指标 OPN、RUNX2、OSTERIX、ALP、COL1下降,影响成骨细胞的成骨。10umol/LSFN的预处理可以减少成骨细胞的凋亡,降低细胞的氧化指标,提高细胞成骨指标,促进成骨矿化,而且48h的预处理效果要优于24h预处理的效果。四、结论成骨细胞在缺氧及缺氧后复氧环境可出现氧化应激状态,影响成骨细胞的增殖及矿化成骨,适量SFN的预处理可以改善氧化应激下成骨细胞的应激状态和成骨功能。
郑孝华[7]（2019）在《卟啉基纳米多孔材料的制备及生物医学应用》文中研究表明卟啉类光敏剂具有生物相容性良好、易于后修饰的优点,一直是研究最为广泛的光疗材料。但卟啉分子大π键共轭结构,在水溶液等生理环境下极易聚集、沉淀,难以有效蓄积到肿瘤病灶部位,大大降低其疗效。设计合成生物相容性好、可降解的纳米载体材料是解决上述难点的有效途径之一。金属-有机框架（Metal-organic frameworks,MOFs）和多孔有机高分子（Porous organic polymers,POPs）,因其特有的结构周期有序性、丰富的孔穴结构以及良好的生物相容性,成为一类极具发展潜力的新型药物载体材料,近年来被用于肿瘤治疗和生物成像领域。为解决卟啉聚集和自淬灭导致的难溶解和光化学性能欠佳的突出问题,本论文采取多种合成路线制备了一系列新型卟啉基纳米多孔复合材料和纳米组装体,显着改善了卟啉的分散性和光理化性能,明确了卟啉分子在多孔框架结构中的空间分布与光活性之间的关联,以及不同类型的多孔材料形成的界面对卟啉基纳米多孔复合材料光活性的影响,最终应用于肿瘤的光疗和相关的光热、光声和CT成像。具体内容如下:（1）通过自模板策略设计和制备了光活性的MOF@POP纳米复合材料（UNM）。这种核-壳纳米粒子的粒径、形貌和结构组成可以通过调控UiO-AM模板MOF纳米晶的相关性质以及控制POP组成单元的进料比来实现。最终制备的UNM多孔复合纳米粒子保持与UiO-AM模板类似的结晶性和孔道特性以及良好的分散性。较单纯的POP相比,更容易被细胞摄取。在光激活下,能够有效地产生ROS,实现光动力诱导癌细胞凋亡。（2）通过多组分策略将具有光活性的二氢卟吩配体引入到Hf-UiO-66原型结构中,而不改变拓扑结构,制备具有较高光稳定性和良好的生物相容性的TCPC-UiO纳米晶。引入的TCPC分子在多孔结构中是空间无序分布,光物理化学性能测试表明所制备的TCPC-UiO纳米晶具有光热效应占主导的光疗活性,能够有效克服乏氧的肿瘤微环境对光动力的抑制。此外,Hf元素通过重原子效应增强了材料的光子利用效率,从而增强了光疗的性能,并且还赋予材料CT成像功能。较高的光热转换效率赋予了 TCPC-UiO光热/光声成像的功能。体内实验证明:TCPC-UiO对H22荷瘤小鼠的肿瘤抑制率高达90%。（3）以Hf-UiO-AM MOF纳米晶为模板,成功整合了 MOF和二氢卟吩构建的POP,经PEG修饰后,制备了一种多功能的HUC-PEG纳米复合材料。与卟啉相比,在最低能量Q带处,二氢卟吩的摩尔消光系数显着增加,极大地提高了材料的光捕获能力,从而保证了在激光照射下,更多ROS和热的产生。HUC-PEG纳米复合材料具有“0+1>1”的效果,无光活性Hf-UiO-AM中的Hf元素的重原子效应与POPs中的TAPC之间的界面效应同时显着增强了其光动力和光热性能,超过40%的光热转化率赋予材料良好的光热成像能力。PEG改性后,HUC-PEG的生理稳定性和生物相容性大大提升,呈现出网格蛋白介导的细胞内吞方式。体内实验表明,HUC-PEG具有优异的抗肿瘤效果以及良好的生物安全性。（4）利用共价偶联的方法首先合成了二硫键连接的卟吩二聚体,经自组装后制备其相应的纳米粒。所合成的二氢卟吩二聚体纳米粒在水中非常稳定,与对应的卟啉二聚体材料相比,具有更强的吸光度,从而产生更多的ROS和热能,进一步用于光动力治疗（PDT）和光热治疗（PTT）。体内研究表明,通过联合PDT和PTT,能够有效抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长。此外,二氢卟吩二聚体纳米粒还具有光热/光声成像（PA）的能力,可用于指导和监测肿瘤治疗过程。
安会杰[8]（2019）在《过氧化氢响应性自发光纳米粒的构建及其在肿瘤成像和光动力治疗中的应用研究》文中研究指明肿瘤是全球范围内威胁人类生命健康的重大公共卫生问题。大量研究发现,肿瘤细胞中活性氧（ROS）产量增加并发生蓄积。此外,肿瘤细胞由于氧化还原体系失衡,相比正常细胞更接近ROS的毒性阈值,导致其更容易受到高浓度ROS损伤而死亡。因此基于肿瘤高水平ROS可实现肿瘤特异性诊断,以及通过大幅提升ROS浓度达到抗肿瘤效果。其中过氧化氢（H2O2）作为ROS的主要组成成分,可作为肿瘤特异性诊断和治疗的主要靶标。当前针对ROS的光学成像技术以及光动力疗法（PDT）由于其非侵袭性以及方便快捷等优点受到广泛关注,但二者都面临光源穿透深度限制以及所用材料生物安全性差等问题,限制了两者的应用和转化。在课题组前期研究基础上,本课题提出利用化学发光小分子鲁米诺、二代光敏剂二氢卟吩e6（Ce6）以及具有良好生物相容性的聚乙二醇（PEG）,共同构建过氧化氢响应性纳米粒CLP NP。借助肿瘤异常升高的H2O2和化学发光共振能量转移效应（CRET）,实现针对肿瘤的近红外自发光成像和无需外界光源激发的光动力治疗,从而为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路和实验依据。方法1.两亲性材料CLP的合成与表征用EDC/NHS活化Ce6后,先后加入鲁米诺和mPEG-NH2进行缩合反应。反应结束后透析、过滤、冻干即得两亲性材料CLP。分析其红外图谱、氢谱、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱以及二维和三维光学图谱。2.过氧化氢响应性自发光纳米粒CLP NP的制备及表征取两亲性材料CLP充分溶解在水溶液中,即得自组装纳米粒CLP NP。对其粒径、Zeta电位、形貌特征、荧光强度变化、不同溶剂中氢谱进行检测。并观察不同稀释程度、溶剂及孵育时间对粒径的影响。3.理论计算及实验验证CLP NP的自发光性能BPCL-2-KGC微弱发光检测仪对比CLP NP、Ce6-PEG、鲁米诺钠在H2O2氧化下化学发光强度。通过Gaussian 09程序得到简化分子Ce6-Luminol的优化几何构型,并计算Ce6共轭单元与鲁米诺苯环结构距离最近的两原子间的直线距离。对比Ce6吸收光谱和鲁米诺钠自发光光谱的重叠情况。CLP NP或鲁米诺钠与H2O2混合后,活体成像系统（IVIS）检测加不同光栅前后的自发光强度变化。4.不同因素对CLP NP自发光的影响首先,使用BPCL-2-KGC微弱发光检测仪检测纳米粒浓度及H2O2浓度对CLP NP自发光强度的影响。其次,使用IVIS检测CLP NP在病理水平H2O2浓度（0-100μM）下的自发光成像优势。而后,检测抗氧化剂NAC或GSH以及表面活性剂SDS对CLP NP自发光的影响。5.各细胞株胞内H2O2水平测定收集各细胞株,探头超声破碎后高速离心取上清。检测上清液中H2O2及蛋白含量。6.CLP NP在体外细胞水平的自发光成像能力检测首先,检测纳米粒剂量及孵育时间对4T1摄取CLP NP行为的影响。然后,对比CLP NP与4T1、HCT116和A549细胞孵育后的自发光强度。而后,检测细胞数量、纳米粒浓度以及各种抑制剂对CLP NP自发光影响。7.不同皮下瘤模型中肿瘤组织的H2O2检测构建4T1、HCT116和A549皮下瘤模型。取一部分瘤块做冰冻切片,按冰冻切片过氧化氢检测试剂盒要求染色;剩余瘤块制备匀浆上清液并检测H2O2含量。8.CLP NP在4T1皮下瘤模型中的自发光成像能力观测首先,在正常鼠皮下注射CLP NP、4T1皮下瘤模型鼠瘤内注射CLP NP或鲁米诺钠,检测自发光和荧光强度随时间的变化。其次,取4T1皮下瘤模型鼠的主要脏器、肌肉和肿瘤组织制备匀浆上清液,并与CLP NP或鲁米诺钠混匀后对比自发光强度。最后,取4T1皮下瘤模型鼠,在瘤内注射CLP NP前2 h先在瘤内注射NAC,观察对CLP NP的自发光和荧光的影响。9.理论计算及实验验证CLP NP中单线态氧的产生通过Gaussian 09计算简化分子Ce6-Luminol激发态的单重态S1和三重态T1之间的能量差。利用SOSG探针检测纳米粒浓度以及H2O2浓度对CLP NP产生单线态氧（1O2）的影响。10.CLP NP对肿瘤细胞的毒性检测将4T1、HCT116以及A549细胞分别与CLP NP孵育4 h后,用DCFH-DA探针检测胞内ROS变化。MTT法检测4T1、HCT116以及A549细胞与不同浓度CLP NP孵育24 h后的存活率并计算半数致死量IC50。11.通过尾静脉给药观察CLP NP对A549皮下瘤的治疗效果取A549皮下瘤模型鼠,尾静脉给予生理盐水、1 mg/kg顺铂、6 mg/kg顺铂或CLP NP溶液（Ce6单元浓度为25 mg/kg）,每三天给药一次并记录体重和肿瘤体积。第14天处死小鼠,取瘤块拍照称重,取血检测血常规及肝肾功,取主要脏器计算脏器指数。12.通过瘤内药观察CLP NP对A549皮下瘤的治疗效果取A549皮下瘤模型鼠,瘤内注射生理盐水或CLP NP溶液（Ce6单元浓度为3.25mg/kg）。每三天给药一次并记录小鼠体重和肿瘤体积。第30天处死小鼠,取血清测定肝肾功;取主要脏器计算脏器指数并进行H&E染色;取肿瘤进行拍照和称量,石蜡包埋用于后续实验。13.瘤内给予CLP NP对4T1皮下瘤中细胞ROS水平影响取4T1皮下瘤模型鼠,瘤内注射生理盐水或CLP NP溶液（Ce6单元浓度为3.25mg/kg）。7 h后处死小鼠,取出瘤块并制备单细胞悬液,DCFH-DA染色后送流式检测。14.瘤内给药观察CLP NP对4T1皮下瘤的治疗效果以及对肺转移抑制效果取4T1皮下瘤模型鼠随机分三组,瘤内注射生理盐水、含Ce6单元浓度为3.25mg/kg或6.5 mg/kg的CLP NP溶液。每三天给药一次并记录小鼠体重和肿瘤体积。第17天处死小鼠。取主要脏器计算脏器指数并进行H&E染色;取肿瘤组织拍照和称量后,石蜡包埋用于后续实验。肺组织经Bouin固定液浸泡或多聚甲醛固定H&E染色后观察转移病灶。15.CLP NP的抗肿瘤机制初步探索CLP NP与A549细胞共孵育后,检测细胞凋亡、线粒体靶向聚集、线粒体膜电位变化以及凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9、caspase-8的活化情况。16.CLP NP在小鼠体内药动学研究雄性BALB/c小鼠尾静脉注射CLP NP溶液（Ce6单元浓度为3.25 mg/kg）。不同时间点处死小鼠,收集血液及主要脏器,或用代谢笼收集尿液及粪便,处理后用HPLC测定CLP NP含量。17.CLP NP的中长期安全性评价实验分为两个阶段,第一阶段为给药干预期,BALB/c雄鼠尾静脉给予生理盐水或不同剂量CLP NP溶液（Ce6单元浓度分别为25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg）,每三天给药一次,记录小鼠体重和观察小鼠状态。第30天每组处死5只小鼠,检测其脏器指数、血常规、肝肾功、脏器与淋巴结的H&E切片。第二阶段为恢复期,正常喂养,不再给药,第58天处死剩余小鼠,检测指标同第一阶段。结果1.通过化学缩合反应构建两亲性材料CLP,并通过多种手段表征其成功合成。2.自组装构建过氧化氢响应性自发光纳米粒CLP NP,粒径为178±3 nm,Zeta电位为-7.7±0.3 mV。TEM观察呈圆形核壳样结构。荧光强度及氢谱检测结果展示出CLP NP溶液的胶束特性。一定范围内稀释及各种水性溶液对CLP NP粒径基本无影响。CLP NP在水可稳定保持4天。3.微弱发光检测仪可以检测到CLP NP以及鲁米诺钠在H2O2氧化下产生的自发光,而Ce6-PEG不能检测到。理论计算简化分子Ce6-Luminol中Ce6共轭单元与鲁米诺苯环结构距离最近的两原子间的直线距离为0.6 nm,Ce6吸收图谱和鲁米诺自发光图谱有相当程度重叠,二者距离以及光谱匹配均适合发生能量共振转移。IVIS检测显示CLP NP在620-800 nm间不同波段的发光强度呈现一个以680 nm为峰值的波峰,而鲁米诺钠加光栅后均未检测到自发光。4.CLP NP的自发光强度与纳米粒浓度呈现一个先正相关后负相关的倒V形的关系;与H2O2浓度呈正相关。相对于鲁米诺钠,IVIS验证了CLP NP在病理H2O2浓度（0-100μM）下的自发光强度及成像时间优势。CLP NP自发光强度与抗氧化剂NAC和GSH浓度呈反比。表面活性剂SDS可在一定范围内增加CLP NP自发光与荧光强度。5.4T1细胞对CLP NP的吞噬呈现剂量和时间依赖性。CLP NP在细胞株中的自发光强度与胞内H2O2浓度、细胞数目、纳米粒浓度成正比;与广谱抗氧化剂NAC和GSH浓度、过氧化氢酶CAT浓度成反比;超氧阴离子抑制剂Tempol和羟自由基抑制剂SF对自发光强度影响不大。6.4T1、HCT116和A549三种皮下瘤瘤块中,4T1皮下瘤匀浆上清液中H2O2含量最高。相比鲁米诺钠,CLP NP在4T1皮下瘤模型及其各组织匀浆液中自发光强度及灵敏度更高,且具有自发光-荧光双重成像能力。抗氧化剂NAC预处理可以显着抑制CLP NP在肿瘤模型中的自发光成像能力,但对荧光成像无影响。7.理论计算得简化分子Ce6-Luminol激发态的单重态S1和三重态T1之间的能量差为0.855 eV,能够发生体系间跨越。SOSG检测到CLP NP的1O2产生具有纳米粒浓度及H2O2浓度依赖性。CLP NP可在短时间内显着提升肿瘤组织ROS水平。MTT实验发现CLP NP对各细胞株均呈现剂量依赖性毒性,且其IC50值与其升高胞内ROS能力呈负相关。8.与阳性药物顺铂相比,CLP NP通过尾静脉给药不仅可以显着抑制A549皮下瘤生长的疗效,而且对小鼠的体重、血常规指标以及肝肾功指标均无显着影响,无不良毒副作用。通过瘤内注射给予剂量为尾静脉给药剂量13%的CLP NP,依然显示了对A549皮下瘤的显着抑制效果。9.通过瘤内注射CLP NP可显着提高肿瘤组织的ROS水平。瘤内注射CLP NP可抑制恶性转移瘤4T1乳腺癌皮下瘤模型的原发肿瘤生长,同时减少肺部转移瘤形成。肿瘤切片表现出增殖抑制、凋亡增加、血管减少的现象。10.与CLP NP共孵育后,A549细胞呈现剂量依赖性凋亡。CLP NP可靶向富集于A549线粒体,引起剂量依赖性的线粒体膜电位去极化、凋亡相关蛋白caspase-3以及caspase-9活化,对caspase-8的活化不明显。11.小鼠体内药动学研究发现,CLP NP在血浆中清除较快,分布于脏器中的纳米粒大部分被排出,一半左右的CLP NP以原型形式通过排泄物排出体外。中长期安全性实验表明各剂量CLP NP不会对小鼠各项指标造成不可逆的伤害。结论1.成功制备核壳结构纳米粒CLP NP。该纳米粒稳定性良好,在H2O2氧化下,基于鲁米诺单元的化学发光以及CRET效应,可激活Ce6单元,产生近红外自发光。2.基于肿瘤细胞及肿瘤组织高表达H2O2的病理特征,CLP NP可对肿瘤细胞株以及皮下瘤模型进行近红外自发光成像,特异性好、灵敏性及发光强度高。3.基于Ce6的光敏剂特性,激活的CLP NP可产生1O2发挥PDT直接杀伤作用。此外,CLP NP可通过抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、减少血管新生等方式抑制皮下瘤生长和转移。进一步研究发现CLP NP主要通过1O2引起线粒体毒性,导致肿瘤细胞线粒体膜电位去极化,以浓度依赖的方式激活线粒体介导的caspase内源性凋亡通路,从而导致肿瘤细胞的凋亡。4.尾静脉注射后,CLP NP可被机体有效清除,具有良好的生物安全性。综上所述,本课题构建了一个过氧化氢响应性自发光纳米粒CLP NP。从理论和实验两方面均验证了CLP NP中的CRET效应以及H2O2氧化下近红外自发光和单线态氧的产生。通过多种肿瘤细胞株和在体肿瘤模型,验证CLP NP在肿瘤病理性升高的H2O2氧化作用下的近红外自发光成像能力和PDT治疗能力,效果显着。该响应性纳米粒制备方式简便快捷,生物安全性良好,可望为肿瘤的成像和治疗提供新的手段和方法。
陈淑滢[9]（2021）在《晚期氧化蛋白产物下调滋养细胞Nrf-2/ARE信号通路在子痫前期中的作用及机制》文中研究说明研究背景子痫前期是一种妊娠期特有的全身性疾病,以高血压、蛋白尿及水肿为主要临床表现,严重危害孕产妇及围产儿的健康。然而,子痫前期的发病机制迄今仍未阐明,且防治手段相当局限。因此,寻求到对子痫前期有效的防治手段是改善母婴围产期结局的关键所在,这一直是产科医生面临的重大难题。目前研究认为子痫前期是一种胎盘源性疾病,胎盘的氧化应激是子痫前期发病的重要环节。妊娠早期,过度的氧化应激诱导滋养细胞发生过度凋亡,将导致滋养细胞侵袭能力下降、子宫螺旋动脉重铸障碍,这可能是子痫前期发生的起源。晚期氧化蛋白产物（AOPPs）是一种在氧化应激过程中,中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）催化活性氧生成的次氯酸或氯胺作用于血清白蛋白而生成的含双酪氨酸蛋白交联产物,它是敏感、稳定、特异性高的氧化应激标记物。同时也是一种有高度生物学活性的促氧化大分子物质,能通过与多种细胞的晚期糖基化蛋白产物受体（RAGE）结合,诱导ROS生成,激活MAPK、NF-κB等多条信号通路诱导细胞发生凋亡、功能异常,造成氧化损伤。在本课题组的前期研究中,我们发现AOPPs与子痫前期发病密切相关。核因子相关因子-2（Nrf-2）是机体和细胞内抵抗氧化应激的关键因子。研究发现,Nrf-2/ARE通路是胎盘抵抗内源性的氧化应激损伤的主要途径。学者们猜测胎盘的Nrf-2/ARE通路异常可能与子痫前期发病相关。血红素加氧酶-1（HO-1）是Nrf-2所调控的Ⅱ相解毒酶,可将血红素分解为胆绿素、二价铁和一氧化碳三种抗氧化物。Nrf-2基因可在转录水平、翻译水平、翻译后修饰及核转位等多个层面上接受调控,某些蛋白质（如p62、p21）及转录因子（如核因子-κB）也参与到了 Nrf-2的基因表达调控中,从而调节细胞内抵抗氧化应激的能力。有研究显示,与AOPPs在结构和生理学效应上都高度相似的晚期糖基化蛋白产物（AGEs）可以通过下调细胞内Nrf-2的表达引起细胞损伤。因此,我们猜测,AOPPs是否也可以通过调控滋养细胞的Nrf-2信号通路来调节细胞抗氧化能力?转录因子NF-κB是否参与了相关的调控过程?Nrf-2/ARE通路在抵抗AOPPs引起的细胞凋亡中起了何种作用?本研究前两章以HTR-8/SVneo细胞作为体外细胞模型,采用一系列基础实验手段对上述问题进行探讨。子痫前期的有效防治一直是妇产科医师临床工作中面临的一大难题。目前,循证医学证实子痫前期高危人群服用小剂量阿司匹林对预防子痫前期发病具有一定作用。随着研究的深入,有学者发现阿司匹林具有抗氧化作用。文献报道,阿司匹林可以通过激活人黑色素细胞内的Nrf-2/ARE通路起到抗氧化应激的效果。前面的研究中,我们已经证实了 AOPPs的蓄积会引起滋养细胞氧化损伤及功能障碍,那阿司匹林能否通过调控滋养细胞中的Nrf-2/ARE信号通路发挥抗氧化的作用以减轻AOPPs引起的氧化损伤呢?我们将在本研究的第三章对该问题进行探讨。第一章AOPPs对滋养细胞Nrf-2/ARE信号通路的调控[研究目的]观察AOPPs对HTR-8/SVneo细胞中Nrf-2/ARE/HO-1通路、NF-κB通路及凋亡相关蛋白的表达调控情况,并探讨AOPPs诱导滋养细胞损伤的潜在机制。[研究方法]按照Witko-Sarsat等报道的方法制备AOPPs。细胞分组及处理:①时间梯度组:使用200μg/mlAOPPs分别处理细胞达0、3、6、12、24及48h,按时间点收集细胞进行后续处理。②浓度梯度组:Control组、AOPP组（50、100、200μg/ml）、阴性对照组（200μg/ml HSA）及 ROS 抑制剂组（200μg/ml AOPP+NAC）,药物干预24h后收集细胞进行后续实验。CCK-8法检测AOPPs对滋养细胞活性的影响。qPCR检测AOPPs刺激后滋养细胞Nrf-2及HO-1 mRNA表达情况。Western-blot检测AOPPs刺激后滋养细胞Nrf-2、HO-1及凋亡相关蛋白表达情况。免疫荧光法检测AOPPs刺激后滋养细胞Nrf-2核转位情况。双荧光素酶报告基因实验检测AOPPs刺激后滋养细胞Nrf-2转录活性。总抗氧化能力试剂盒检测AOPPs对滋养细胞总抗氧化能力的影响。Western-blot检测AOPPs刺激后滋养细胞NF-κB通路表达情况,及NF-κB被靶向阻断后,细胞中Nrf-2、HO-1及凋亡相关蛋白表达情况。所以实验均重复至少3次。采用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计分析,数据均以均数±标准差（mean±SD）的形式表示。组间比较采用单因素方差分析（One-way ANOVA）,两两比较时先计算其方差齐性;方差齐时,两两比较采用LSD法或Bonferroni法,若方差不齐时,两两比较采用Dunnetts T3法;多个样本非参数比较采取多个独立样本非参数检验（K Independent Samples Test）,p<0.05认为具有统计学差异。[研究结果]（1）AOPPs以时间依赖和剂量依赖的形式引起滋养细胞活力下降,ROS清除剂NAC可部分阻断此效应。（2）浓度大于100μg/mlAOPPs刺激滋养细胞24小时后,Nrf-2、HO-1 mRNA及蛋白表达水平较对照组下降,使用ROS清除剂NAC可以在一定程度上恢复其表达。（3）使用200μg/ml的AOPPs以时间梯度的形式刺激滋养细胞,Nrf-2 mRNA及蛋白表达水平在加药后6小时内逐渐上升,在6小时达到峰值后,随着作用时间的延长,表达水平逐渐下降。HO-1 mRNA及蛋白表达水平在加药后12小时内逐渐上升,在12小时达到峰值后,随着作用时间的延长表达水平逐渐下降。（4）长时间暴露于高浓度的AOPPs中使滋养细胞中Nrf-2核转位减少及转录活性下降。（5）AOPPs以时间依赖和剂量依赖的形式诱导滋养细胞凋亡,ROS清除剂NAC可部分阻断此效应。（6）AOPPs导致核内Nrf-2蛋白表达减少,阻断NF-κB的活性后,细胞核内Nrf-2蛋白表达有所增加。[研究结论]本章研究提示:（1）AOPPs可以调控滋养细胞中Nrf-2/ARE/HO-1通路的表达,长时间暴露于高浓度的AOPPs可导致细胞内Nrf-2及HO-1 mRNA及蛋白表达下降,Nrf-2入核减少及转录活性下降,细胞的抗氧化能力下降,在一定程度促进了滋养细胞的氧化损伤。（2）AOPPs以时间依赖和剂量依赖的形式促使滋养细胞中NF-κB活化,可能参与了 Nrf-2表达的调控;（3）AOPPs可以通过激活p53、Caspases级联反应导致滋养细胞发生凋亡。第二章 Nrf-2在抵抗AOPPs诱导的滋养细胞氧化损伤中的作用[研究目的]采用靶向敲减和过表达技术调控滋养细胞中Nrf-2基因的表达,探讨Nrf-2在AOPPs诱导的滋养细胞氧化损伤中的作用。[研究方法]按照Witko-Sarsat等报道的方法制备AOPPs。脂质体-siNrf-2复合物转染滋养细胞并验证干扰效率。脂质体-Nrf-2过表达质粒复合物转染滋养细胞并验证过表达效率。滋养细胞在进行脂质体-siNrf-2复合物或脂质体-Nrf-2过表达质粒复合物瞬时转染后使用AOPPs处理。CCK-8法检测调控Nrf-2对AOPPs诱导的氧化应激状态下的滋养细胞活力的影响。Annexin V-FITC/PI流式细胞术及Hoechst 33342荧光染色法检测调控Nrf-2对AOPPs介导的滋养细胞凋亡率的变化。Western-blot检测调控Nrf-2对AOPPs介导的滋养细胞凋亡相关蛋白的表达情况。Western-blot检测调控Nrf-2后滋养细胞HO-1蛋白表达情况及调控HO-1表达对AOPPs介导的滋养细胞凋亡的影响。统计学方法同第一章。[研究结果]（1）Nrf-2基因敲减及过表达细胞模型构建成功。（2）在AOPPs暴露下,下调Nrf-2基因的表达可导致细胞活性下降、凋亡相关蛋白表达水平升高及细胞凋亡率升高;而上调Nrf-2的表达则可提高细胞活性、显着降低细胞凋亡率及凋亡相关蛋白表达水平。（3）下调Nrf-2基因的表达可使滋养细胞中HO-1蛋白表达水平下降;而上调Nrf-2基因的表达则可使HO-1蛋白表达水平升高。（4）在AOPPs诱导的氧化应激状态下,抑制HO-1蛋白的表达可使滋养细胞中凋亡相关蛋白表达水平升高;而增加HO-1蛋白的表达则可使滋养细胞中凋亡相关蛋白表达水平下降。[研究结论]本章研究提示Nrf-2在AOPPs诱导的滋养细胞氧化损伤中发挥了一定的作用。Nrf-2的缺失使滋养细胞更易于出现AOPPs诱导的损伤并发生凋亡,而上调Nrf-2基因表达则可通过诱导HO-1表达对滋养细胞起到明显的保护作用。第三部分阿司匹林通过激活Nrf-2诱导HO-1表达以抵抗AOPPs引起的滋养细胞损伤[研究目的]探讨阿司匹林是否可以通过调控滋养细胞中Nrf-2/ARE通路以改善AOPPs引起的细胞损伤,为阿司匹林预防子痫前期的机制研究提供新思路。[研究方法]按照Witko-Sarsat等报道的方法制备AOPPs。滋养细胞按实验方案进行处理。CCK-8法检测不同实验剂量的阿司匹林对滋养细胞活力的影响。Western-blot检测阿司匹林与AOPPs联合使用对滋养细胞中Nrf-2、HO-1及凋亡相关蛋白表达的影响。CCK-8法及LDH法检测阿司匹林与联合使用对滋养细胞活力的影响。统计学方法同第一章。[研究结果]（1）实验浓度范围内的阿司匹林对滋养细胞活力没有影响。（2）阿司匹林可以在一定程度上减少AOPPs引起的滋养细胞凋亡及氧化损伤,这种效应可被siNrf-2和HO-1抑制剂部分阻断。[研究结论]本章研究提示:阿司匹林可以有效缓解AOPPs引起的滋养细胞氧化损伤及凋亡,而这种保护作用在阻断Nrf-2或HO-1的表达后在一定程度上被削弱了。胎盘滋养细胞中的Nrf-2/ARE通路是阿司匹林发挥抗氧化作用的靶点之一。胎盘Nrf-2/ARE通路的活化,可诱导Ⅱ相解毒酶HO-1的表达,发挥抗氧化作用,对保护滋养细胞免受AOPPs引起的氧化损伤具有一定作用,这可能是阿司匹林预防子痫前期的众多机制之一。
刘理涵[10]（2017）在《多功能药物体系用于肿瘤治疗与成像研究》文中提出肿瘤是威胁全人类健康的头号疾病。然而很多传统的抗肿瘤药物存在水溶性差、体内稳定性差、毒副作用大以及缺乏肿瘤组织特异性识别能力等缺点,已不能满足当前癌症治疗的发展需求。为此,科学家们发展出大量药物传递系统。这些药物传递系统能够特异性响应外源性或肿瘤微环境下内源性刺激,实现肿瘤靶向治疗。光本身不会损伤正常组织,且具有非常好的时间-空间选择性,故在过去几十年里,光敏感药物传递系统有着很多报道。由于紫外可见光的组织穿透能力有限,人们逐渐把眼光放到NIR光敏感的药物传递系统上。此外,设计诊断治疗相结合的药物传递体系,可以实现对药物在体内或胞内分布的实时监测,有助于深入了解药物治疗机理。光动力学治疗（PDT）是一种新兴的癌症治疗方案。然而,PDT本身依赖于光敏剂、光和氧气。人身体组织对光有很强吸收,导致大部分的光的组织穿透能力非常低。此外,肿瘤组织内部严重缺氧,严重限制了 PDT治疗效果。在这种条件下,将PS靶向到细胞内重要细胞器,或是发展新的肿瘤增氧策略对于增加PDT效率是非常有意义的。鉴于此,本论文的工作主要集中在:在第一章中,我们对刺激响应前药进行了一个简单的综述,并简要介绍了多肽材料在肿瘤细胞靶向方向的应用,最后探讨了当今光动力学治疗领域存在的一些问题以及解决办法。在第二章中,我们设计了一种红光响应型多功能前药（TPP-L-GEM）用于荧光介导的光动力学治疗以及级联化疗。这个前药由3部分构成,光敏剂四苯基卟啉（TPP）,单线态氧敏感可断裂键缩硫酮,还有吉西他滨药物（GEM）。在弱红光照射下,光敏剂四苯基卟琳产生单线态氧,在实现PDT治疗同时单线态氧打断缩硫酮键,释放出吉西他滨药物,实现级联的化学治疗增强治疗效果。该前药在红光介导下释放出的化疗药物,可以渗透到光照射不到肿瘤深部区域,实现对深部肿瘤的治疗。此外,四苯基卟啉的红色荧光（650 nm）还可以用于荧光成像,监测药物在小鼠体内富集情况,指导何时何地进行光照,杀灭肿瘤。在第三章中,我们设计了一种具有肿瘤部位酸敏感性的细胞膜靶向自传递嵌合肽 C16-K（PpIX）-RRK（DMA）K（DMA）-PEG（命名为 C16-PRP-DMA）用于增强肿瘤光动力学治疗效果。该自传递嵌合肽非常容易合成,且具有很高的光敏剂附载量,优异的活性氧（ROS）生成能力,可自组装形成纳米粒子。该负电性组装体在肿瘤部位酸性条件下（pH 6.8）,可脱落DMA,以露出多肽侧链带正电的氨基实现电荷翻转,整体电荷的变化使得组装体结构稳定性减弱,一部分纳米粒子解体,原先在纳米粒子内部的细胞膜亲和性组分烷基链C16和正电性RRKK四肽暴露出来,使得该嵌合肽能够长时间插入细胞膜（多肽在膜上滞留时间大于14小时）。在光照下光敏剂在细胞膜处原位产生单线态氧直接破坏细胞膜,导致细胞快速和大量死亡,极大增强光动力学治疗的效果。通过对肿瘤模型小鼠进行皮下注射与静脉注射,我们也证实了 C16-PRP-DMA在体内优异的抗肿瘤效果。在第四章中,我们基于过氧化钙材料,设计了自供氧的脂质体纳米粒子（LipoMB/CaO2）,在双重光照策略下针对缺氧肿瘤,进行光动力学治疗。在LipoMB/CaO2中,亲水性光敏剂亚甲基蓝（MB）和氧供应过氧化钙纳米颗粒分别被包载在聚乙二醇（PEG）壳层脂质体的水腔和疏水层中。在缺氧肿瘤微环境中,水或弱酸逐渐渗透入脂质体,与CaO2反应释放O2,在第一次短时间光照时可提高MB光照后1O2产量。此外,MB产生的1O2可以氧化磷脂双层以破坏脂质体,进一步增强CaO2与H2O的接触,导致02加速释放。这种较高的氧含量可改善肿瘤微环境,增强第二次较长时间光照时的PDT效应。在本章中,我们深入研究了 LipoMB/CaO2在双重光照下02产生情况,其调节肿瘤细胞缺氧的能力以及对缺氧肿瘤治疗效果。
二、维生素C对不同浓度氧环境培养细胞化学发光的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、维生素C对不同浓度氧环境培养细胞化学发光的影响（论文提纲范文）
（1）基于Stenhouse盐构筑的H2O2响应型级联肿瘤药物递送系统（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 H_2O_2响应肿瘤药物递送系统2 |
| 1.2.1 H_2O_2在肿瘤微环境过表达2 |
| 1.2.2 H_2O_2响应基团 |
| 1.3 化学发光 |
| 1.3.1 化学发光的机理 |
| 1.3.2 化学发光探针的类型及设计 |
| 1.4 Stenhouse盐 |
| 1.4.1 Stenhouse盐的光响应性 |
| 1.4.2 Stenhouse的结构设计 |
| 1.4.3 Stenhouse盐的应用 |
| 1.5 级联型肿瘤药物递送系统 |
| 1.5.1 肿瘤治疗中的级联反应 |
| 1.5.2 H_2O_2响应型级联反应 |
| 1.6 本章小结 |
| 第二章 级联药物递送系统CLDRS的制备 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 试剂合成 |
| 2.2.1 分子DASA-PEG合成路线1 |
| 2.2.2 分子DASA-PEG合成路线2 |
| 2.2.3 荧光团合成步骤 |
| 2.3 本章小结 |
| 第三章 级联药物递送系统CLDRS的表征 |
| 3.1 测试样品配置及测试方法 |
| 3.1.1 测试样品配置 |
| 3.1.2 细胞实验方法 |
| 3.2 药物递送系统CLDRS的光谱及粒径表征 |
| 3.2.1 胶束CLDRS包埋效果的表征 |
| 3.2.2 发射再吸收过程的表征 |
| 3.2.3 化学发光强度的表征 |
| 3.2.4 CLDRS的 DLS测试 |
| 3.3 细胞实验 |
| 3.3.1 细胞毒性研究 |
| 3.3.2 外部光照治疗效果的研究 |
| 3.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文目录 |
（2）石菖蒲挥发油成分α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 α-细辛醚通过调控炎症小体NLRP3及小胶质细胞极化保护氧糖剥夺/再灌注损伤的BV2细胞 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂与耗材 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 细胞给药剂量及模型建立方法筛选 |
| 2.2.1 药物干预剂量筛选 |
| 2.2.2 细胞脑缺血再灌注损伤模型建立 |
| 2.2.3 含药培养基配制 |
| 2.2.4 模型建立方法筛选 |
| 2.3 细胞分组及给药 |
| 2.4 一般形态学观察 |
| 2.5 酶联免疫试剂盒检测炎性因子水平 |
| 2.5.1 待测样本提取 |
| 2.5.2 ELISA试剂盒操作 |
| 2.6 免疫蛋白印迹法检测炎性相关蛋白表达量 |
| 2.6.1 细胞蛋白提取 |
| 2.6.2 BCA试剂盒蛋白定量 |
| 2.6.3 Western blot检测炎性相关蛋白表达 |
| 2.7 炎性因子水平检测 |
| 2.8 炎性相关蛋白NLRP3、caspase 1和NF-κB蛋白表达量测定 |
| 2.9 ELISA检测ROS活性 |
| 2.10 统计学方法 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 不同剂量α-细辛醚对正常BV2细胞的影响 |
| 3.2 OGD/R模型建立方法筛选结果 |
| 3.3 BV2细胞一般形态变化 |
| 3.4 BV2细胞促炎因子与抗炎因子水平 |
| 3.4.1 促炎因子IL-1β及IL-18水平 |
| 3.4.2 抑炎因子IL-10及IL-4水平 |
| 3.4.3 蛋白上样量 |
| 3.4.4 促炎介质TNF-α和抑炎因子TGF-β蛋白表达量 |
| 3.5 炎症小体NLRP3及caspase 1蛋白表达量 |
| 3.6 核转录因子NF-κB的蛋白表达量 |
| 3.7 ROS活性测定结果 |
| 4. 小结 |
| 第二部分 α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用评价及网络药理学作用靶点预测 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验试剂与耗材 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 小鼠分组及给药 |
| 2.2 小鼠脑缺血再灌注损伤模型建立 |
| 2.3 小鼠神经功能缺损行为学评价 |
| 2.4 小鼠脑缺血面积及血流灌注量评价 |
| 2.5 α-细辛醚与脑卒中靶点预测网络分析 |
| 2.6 α-细辛醚作用于脑卒中的GO及KEGG富集通路分析 |
| 2.7 统计学方法 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 神经功能缺损评分 |
| 3.2 脑缺血面积及左脑血流灌注降低率 |
| 3.3 网络药理学预测结果 |
| 3.3.1 网络药理学预测α-细辛醚作用于脑卒中的靶点映射结果 |
| 3.3.2 α-细辛醚作用于脑卒中的靶点GO分析及KEGG富集通路分析 |
| 4. 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 石菖蒲挥发油中主要成分α-和β-细辛醚的神经药理学作用及机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）Nrf2-ARE信号通路抵御小鼠乳腺氧化应激的分子机制及槲皮素对其调控研究（论文提纲范文）
| 主要缩略语与符号一览表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 第一节 乳腺氧化应激与炎症 |
| 1 氧化应激的定义 |
| 2 引起乳腺氧化应激的因素 |
| 3 乳腺氧化应激与乳腺炎 |
| 4 乳腺氧化应激研究模型 |
| 第二节 乳腺氧化应激的防治措施 |
| 1 动物与饲养管理 |
| 2 常规饲料添加剂 |
| 3 生物活性物质 |
| 第三节 机体抗氧化防御系统及其作用机制 |
| 1 抗氧化防御系统 |
| 2 抗氧化相关信号通路 |
| 第四节 本研究的目的、意义与内容 |
| 1 本研究的目的与意义 |
| 2 主要研究内容 |
| 第二章 Nrf2 基因敲除对小鼠生长繁殖和乳腺健康的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 Nrf2-ARE信号通路抵御小鼠乳腺氧化损伤的作用机制 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 Nrf2-ARE通路介导槲皮素抵御乳腺上皮细胞氧化损伤的作用机制 |
| 第一节 槲皮素抵御乳腺上皮细胞氧化损伤的作用效果 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二节 Nrf2-ARE通路介导槲皮素抵御乳腺上皮细胞氧化损伤的分子机制 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第五章 综合讨论 |
| 提示、创新点和研究展望 |
| 1 提示 |
| 2 创新点 |
| 3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）射频烫漂灭酶对莴笋理化特性的影响及其细胞作用机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 莴笋概述 |
| 1.2 酶促褐变 |
| 1.2.1 过氧化物酶酶促褐变机理 |
| 1.2.2 影响过氧化物酶活性的因素 |
| 1.3 果蔬烫漂技术研究进展 |
| 1.3.1 传统烫漂技术 |
| 1.3.2 新型烫漂技术 |
| 1.4 射频加热技术概述 |
| 1.4.1 射频加热技术原理 |
| 1.4.2 射频加热技术在食品加工中的应用 |
| 1.4.3 射频联合其他技术研究进展 |
| 1.5 研究目的及意义 |
| 1.6 研究内容 |
| 1.6.1 研究内容 |
| 1.7 研究技术路线 |
| 第二章 莴笋块射频加热均匀性及升温速率研究 |
| 引言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 仪器与设备 |
| 2.1.3 射频加热处理 |
| 2.1.4 加热均匀性评价 |
| 2.1.5 数据处理与分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 极板间距对莴笋块升温速率和加热均匀性的影响 |
| 2.2.2 样品高度对莴笋块升温速率和加热均匀性的影响 |
| 2.3 小结 |
| 第三章 射频加热温度对过氧化物酶活性和结构、莴笋理化特性和微观结构的影响 |
| 引言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 仪器与设备 |
| 3.1.3 射频处理辣根过氧化物酶溶液 |
| 3.1.4 辣根过氧化物酶溶液升温速率和残余活性测定 |
| 3.1.5 辣根过氧化物酶结构的测定 |
| 3.1.6 射频处理莴笋块 |
| 3.1.7 莴笋过氧化物酶的提取和活性测定 |
| 3.1.8 莴笋块理化性质的测定 |
| 3.1.9 莴笋微观结构的观察 |
| 3.1.10 数据处理与分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 辣根过氧化物酶溶液的升温速率及残余活性分析 |
| 3.2.2 射频加热对辣根过氧化物酶结构的影响 |
| 3.2.3 射频加热温度对莴笋过氧化物酶酶活性的影响 |
| 3.2.4 射频加热温度对莴笋理化特性的影响 |
| 3.2.5 射频加热温度对莴笋微观结构的影响 |
| 3.3 小结 |
| 第四章 射频加热速率对莴笋理化性质和微观结构的影响 |
| 引言 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 仪器与设备 |
| 4.1.3 不同射频加热速率下过氧化物酶活性-时间曲线测定 |
| 4.1.5 不同射频加热速率下莴笋理化性质的测定 |
| 4.1.6 不同射频加热速率下莴笋微观结构的观察 |
| 4.1.7 数据处理与分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 不同射频加热速率下过氧化物酶活性-时间曲线分析 |
| 4.2.2 射频加热速率对莴笋理化性质的影响 |
| 4.2.3 射频加热速率对莴笋微观结构的影响 |
| 4.3 小结 |
| 第五章 蒸汽辅助射频烫漂对莴笋块加热均匀性、过氧化物酶活性和理化性质的影响 |
| 引言 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 仪器与设备 |
| 5.1.3 蒸汽辅助射频烫漂处理 |
| 5.1.4 过氧化物酶活性测定 |
| 5.1.5 加热均匀性分析 |
| 5.1.6 莴笋块理化性质测定 |
| 5.1.7 数据处理与分析 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 蒸汽辅助射频烫漂对过氧化物酶活性的影响 |
| 5.2.2 不同条件下的蒸汽辅助射频烫漂加热均匀性分析 |
| 5.2.3 蒸汽辅助射频烫漂对莴笋块理化性质的影响 |
| 5.3 小结 |
| 第六章 结论、创新点及展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（5）脂多糖引起奶牛乳腺和机体氧化应激损伤及蒲公英提取物对其阻断效果的研究（论文提纲范文）
| 英文缩写一览表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 第二章 文献综述 |
| 2.1 奶牛乳腺脂多糖主要来源 |
| 2.1.1 脂多糖的结构及理化性质 |
| 2.1.2 高精料饲粮下瘤胃酸中毒与乳腺脂多糖含量的关系 |
| 2.2 脂多糖与氧化应激 |
| 2.2.1 脂多糖在动物体内的识别途径与机制 |
| 2.2.2 氧化应激的发生及其对奶牛乳腺的影响 |
| 2.3 蒲公英提取物的生物学功能及其作用机制 |
| 2.3.1 蒲公英的主要植物化学成分 |
| 2.3.2 蒲公英及其提取物的抗氧化特性与应用 |
| 2.3.3 潜在的抗氧化机制 |
| 第三章 研究的目的意义、主要内容与技术路线 |
| 3.1 研究的目的意义 |
| 3.2 研究的主要内容 |
| 3.3 研究的技术路线 |
| 第四章 不同浓度LPS对奶牛乳腺上皮细胞氧化应激状态的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验仪器 |
| 4.1.2 试验试剂 |
| 4.1.3 试验方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 LPS对乳腺上皮细胞活性和ROS含量的影响 |
| 4.2.2 LPS对细胞内氧化损伤标志物含量的影响 |
| 4.2.3 LPS对抗氧化酶活性的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 LPS对乳腺上皮细胞活性和ROS含量的影响 |
| 4.3.2 LPS对细胞内氧化损伤标志物含量的影响 |
| 4.3.3 LPS对抗氧化酶活性的影响 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 蒲公英提取物通过Nrf2 通路缓解脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化应激 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试验仪器 |
| 5.1.2 试验试剂 |
| 5.1.3 试验方法 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 LPS和 DAE对乳腺上皮细胞活性和 ROS含量的影响 |
| 5.2.2 LPS和 DAE对乳腺上皮细胞氧化损伤标志物含量的影响 |
| 5.2.3 LPS和 DAE对乳腺上皮细胞抗氧化酶活性的影响 |
| 5.2.4 LPS和 DAE对乳腺上皮细胞Nrf2和Keap1 蛋白表达量的影响 |
| 5.2.5 LPS和 DAE对乳腺上皮细胞抗氧化基因m RNA表达量的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 LPS与DAE对细胞活性的影响 |
| 5.3.2 LPS与 DAE对细胞内ROS含量、氧化损伤标志物含量和抗氧化酶活性的影响 |
| 5.3.3 LPS与DAE对细胞内Nrf2和Keap1蛋白表达量的影响 |
| 5.3.4 LPS与DAE对细胞内抗氧化基因mRNA表达量的影响 |
| 5.4 结论 |
| 第六章 高精料饲粮中添加蒲公英提取物对改善奶牛生产性能及机体氧化应激状态的作用 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 试验仪器 |
| 6.1.2 试验试剂 |
| 6.1.3 试验方法 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 不同饲粮对奶牛产奶量、采食量及产奶效率的影响 |
| 6.2.2 不同饲粮对奶牛体细胞数及乳品质的影响 |
| 6.2.3 不同饲粮对奶牛瘤胃pH值,瘤胃液和血浆LPS含量的影响 |
| 6.2.4 不同饲粮对奶牛血液常规指标含量的影响 |
| 6.2.5 不同饲粮对奶牛血清中氧化损伤标志物含量和抗氧化酶活性的影响 |
| 6.2.6 血浆LPS浓度与氧化损伤标志物含量和抗氧化酶活性的相关性分析结果 |
| 6.2.7 不同饲粮对奶牛泌乳相关基因m RNA表达量的影响 |
| 6.2.8 不同饲粮对奶牛抗氧化相关基因m RNA表达量的影响 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 不同饲粮对奶牛产奶量、采食量及产奶效率的影响 |
| 6.3.2 不同饲粮对奶牛体细胞数及乳品质的影响 |
| 6.3.3 不同饲粮对奶牛瘤胃p H值,瘤胃液和血浆LPS含量的影响 |
| 6.3.4 不同饲粮对奶牛血液常规指标含量的影响 |
| 6.3.5 不同饲粮和血浆LPS浓度对奶牛血清中氧化损伤标志物含量和抗氧化酶活性的影响 |
| 6.3.6 不同饲粮对奶牛泌乳相关基因m RNA表达量的影响 |
| 6.3.7 不同饲粮对奶牛抗氧化相关基因m RNA表达量的影响 |
| 6.4 小结 |
| 第七章 全文结论、创新点及展望 |
| 7.1 全文结论 |
| 7.2 创新点 |
| 7.3 展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 发表论文一览表 |
（6）莱菔硫烷对缺氧环境下成骨细胞活性和矿化的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 前言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 课题研究意义 |
| 1.3 课题设计 |
| 1.4 参考文献 |
| 第2章 常氧及缺氧培养对成骨细胞hFOB1.19增殖影响 |
| 2.1 细胞、试剂和仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 统计方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 结论 |
| 2.7 参考文献 |
| 第3章 莱菔硫烷对常氧条件下成骨细胞活性影响 |
| 3.1 细胞、试剂和仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 统计方法 |
| 3.4 实验结果与分析 |
| 3.5 讨论 |
| 3.6 结论 |
| 3.7 参考文献 |
| 第4章 莱菔硫烷改善缺氧环境下成骨细胞活性和矿化 |
| 4.1 细胞、试剂和仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 统计方法 |
| 4.4 实验结果与分析 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 结论 |
| 4.7 参考文献 |
| 第5章 全文总结 |
| 附表 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（7）卟啉基纳米多孔材料的制备及生物医学应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 光动力治疗 |
| 1.1.1 光化学反应与光动力 |
| 1.1.2 活性氧物质的产生机理 |
| 1.1.3 光动力治疗破坏肿瘤的机制 |
| 1.2 光热治疗 |
| 1.2.1 热治疗概述 |
| 1.2.2 热治疗对肿瘤的相关影响 |
| 1.2.3 光热治疗的机制与材料种类 |
| 1.3 卟啉与卟啉基药物 |
| 1.3.1 卟啉分子的基本结构以及药物演化 |
| 1.3.2 卟啉类分子的生物应用前景与挑战 |
| 1.4 卟啉基纳米多孔材料的构建与生物应用 |
| 1.4.1 卟啉构建的金属-有机框架 |
| 1.4.2 卟啉构建的多孔有机高分子 |
| 1.5 本论文的选题依据和研究内容 |
| 第2章 金属有机框架与多孔有机高分子纳米复合物的制备及光动力治疗 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 药品及原料 |
| 2.2.2 测试仪器及方法 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 UNM纳米复合材料的制备 |
| 2.3.2 单线态氧的检测 |
| 2.3.3 细胞内吞测试 |
| 2.3.4 细胞毒性实验 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 UNM纳米复合物材料的合成及表征 |
| 2.4.2 单线态氧产生能力评估 |
| 2.4.3 细胞摄取评价 |
| 2.4.4 细胞毒性评价 |
| 2.5 本章小结 |
| 第3章 多组分金属-有机框架中光活性的调控及光疗研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验原料 |
| 3.2.2 测试仪器及方法 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 TCPC-UiO NMOF的合成 |
| 3.3.2 单线态氧产生能力检测 |
| 3.3.3 光热性能测试 |
| 3.3.4 内吞作用与细胞毒性评估 |
| 3.3.5 体内抑瘤实验 |
| 3.3.6 组织学分析 |
| 3.3.7 安全性评估 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 TCPC-UiO NMOF的制备与表征 |
| 3.4.2 单线态氧产生能力评价 |
| 3.4.3 光热能力与光稳定性评价 |
| 3.4.4 细胞摄取与细胞毒性评价 |
| 3.4.5 生物相容性评价 |
| 3.4.6 CT/光热/光声成像功能 |
| 3.4.7 血液清除与生物分布 |
| 3.4.8 抑瘤实验 |
| 3.5 本章小结 |
| 第4章 界面增强的金属有机骨架-多孔有机聚合物的纳米复合材料用于光疗 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验药品及原料 |
| 4.2.2 测试仪器及方法 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 HUC-PEG NPs的合成 |
| 4.3.2 单线态氧检测 |
| 4.3.3 光热评估 |
| 4.3.4 内吞作用评估 |
| 4.3.5 体外细胞毒性研究 |
| 4.3.6 体内抗肿瘤活性 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 HUC-PEG NPs的合成和表征 |
| 4.4.2 体外ROS生成能力评价 |
| 4.4.3 光热效应和光稳定性评价 |
| 4.4.4 光热成像与界面作用 |
| 4.4.5 内吞作用和细胞毒性评估 |
| 4.4.6 细胞毒性评估 |
| 4.4.7 生物相容性评估 |
| 4.4.8 CT/光热成像 |
| 4.4.9 体内抑瘤实验 |
| 4.5 本章小结 |
| 第5章 具有强吸光度的卟吩二聚体纳米粒子用于光声成像和光疗 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 实验药品及原料 |
| 5.2.2 测试仪器及方法 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 TPP-SS和TPC-SS NPs的制备 |
| 5.3.2 ROS产生能力评估 |
| 5.3.3 光热效果评估 |
| 5.3.4 小鼠光声成像 |
| 5.3.5 细胞摄取研究 |
| 5.3.6 细胞毒性实验 |
| 5.3.7 动物实验 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 TPC-SS二聚体的制备与表征 |
| 5.4.2 体外单线态氧检测 |
| 5.4.3 光热效应和光稳定性 |
| 5.4.4 光声成像 |
| 5.4.5 血液循环和生物分布 |
| 5.4.6 细胞摄取评价 |
| 5.4.7 细胞毒性评价 |
| 5.4.8 体内抗肿瘤活性和生物安全性 |
| 5.5 本章小结 |
| 第6章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 |
（8）过氧化氢响应性自发光纳米粒的构建及其在肿瘤成像和光动力治疗中的应用研究（论文提纲范文）
| 英文缩写词表 |
| 英文摘要 |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 过氧化氢响应性两亲性材料的合成与表征及其纳米粒的制备与自发光性能表征 |
| 2.1 过氧化氢响应性两亲性材料的合成与表征 |
| 2.1.1 材料与方法 |
| 2.1.2 结果 |
| 2.1.3 讨论 |
| 2.2 过氧化氢响应性自发光纳米粒的制备与表征 |
| 2.2.1 材料与方法 |
| 2.2.2 结果 |
| 2.2.3 讨论 |
| 2.3 过氧化氢响应性自发光纳米粒的自发光特性验证 |
| 2.3.1 材料与方法 |
| 2.3.2 结果 |
| 2.3.3 讨论 |
| 2.4 过氧化氢响应性自发光纳米粒的自发光影响因素研究 |
| 2.4.1 材料与方法 |
| 2.4.2 结果 |
| 2.4.3 讨论 |
| 2.5 全章小结 |
| 第三章 过氧化氢响应性自发光纳米粒在肿瘤成像中的应用研究 |
| 3.1 不同肿瘤细胞株胞内过氧化氢含量检测 |
| 3.1.1 材料与方法 |
| 3.1.2 结果 |
| 3.1.3 讨论 |
| 3.2 过氧化氢响应性自发光纳米粒在细胞水平的自发光成像研究 |
| 3.2.1 材料与方法 |
| 3.2.2 结果 |
| 3.2.3 讨论 |
| 3.3 不同皮下瘤模型中肿瘤组织的过氧化氢含量检测 |
| 3.3.1 材料与方法 |
| 3.3.2 结果 |
| 3.3.3 讨论 |
| 3.4 过氧化氢响应性自发光纳米粒在4T1 乳腺癌皮下瘤模型中的成像研究 |
| 3.4.1 材料与方法 |
| 3.4.2 结果 |
| 3.4.3 讨论 |
| 3.5 全章小结 |
| 第四章 过氧化氢响应性自发光纳米粒的抗肿瘤能力评价 |
| 4.1 过氧化氢响应性自发光纳米粒的体外抗肿瘤性能研究 |
| 4.1.1 材料与方法 |
| 4.1.2 结果 |
| 4.1.3 讨论 |
| 4.2 过氧化氢响应性自发光纳米粒在A549 肺癌皮下瘤模型中的疗效评价 |
| 4.2.1 材料与方法 |
| 4.2.2 结果 |
| 4.2.3 讨论 |
| 4.3 过氧化氢响应性自发光纳米粒在4T1 乳腺癌皮下瘤模型中的疗效评价 |
| 4.3.1 材料与方法 |
| 4.3.2 结果 |
| 4.3.3 讨论 |
| 4.4 过氧化氢响应性自发光纳米粒的抗肿瘤机制初步探索 |
| 4.4.1 材料与方法 |
| 4.4.2 结果 |
| 4.4.3 讨论 |
| 第五章 过氧化氢响应性自发光纳米粒的初步安全性评价 |
| 5.1 过氧化氢响应性自发光纳米在小鼠体内药动学研究 |
| 5.1.1 材料与方法 |
| 5.1.2 结果 |
| 5.1.3 讨论 |
| 5.2 过氧化氢响应性自发光纳米粒的中长期安全性评价 |
| 5.2.1 材料与方法 |
| 5.2.2 结果 |
| 5.2.3 讨论 |
| 5.3 全章小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 基于肿瘤微环境设计的纳米递送系统在光动力治疗肿瘤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间研究成果 |
| 致谢 |
（9）晚期氧化蛋白产物下调滋养细胞Nrf-2/ARE信号通路在子痫前期中的作用及机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 AOPPs对滋养细胞Nrf-2/ARE信号通路的调控 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 Nrf-2在抵抗AOPPs诱导的滋养细胞氧化损伤中的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第三章 阿司匹林通过激活Nrf2诱导HO-1表达以抵抗AOPPs引起的滋养细胞损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文小结 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词注释 |
| 在读期间发表论文 |
| 致谢 |
（10）多功能药物体系用于肿瘤治疗与成像研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 刺激响应前药在肿瘤治疗及成像方向的应用 |
| 1.2.1 内源性刺激响应前药 |
| 1.2.2 外源性刺激响应前药 |
| 1.3 多肽材料在肿瘤细胞靶向中的应用 |
| 1.3.1 多肽材料在细胞质靶向中的应用 |
| 1.3.2 多肽材料在细胞核靶向中的应用 |
| 1.3.3 多肽材料在线粒体靶向中的应用 |
| 1.3.4 多肽材料在细胞膜靶向中的应用 |
| 1.4 当前光动力学治疗面对的挑战及解决办法 |
| 1.4.1 增强光源组织穿透能力 |
| 1.4.2 氧不依赖型PDT体系 |
| 1.4.3 肿瘤增氧策略 |
| 1.5 选题思路 |
| 参考文献 |
| 第二章 红光响应型多功能前药用于荧光介导的光动力学治疗以及级联化疗 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂 |
| 2.2.2 TPP-L-GEM的合成与表征 |
| 2.2.3 ROS产生能力测试 |
| 2.2.4 吉西他滨在ROS存在条件下的稳定性测试 |
| 2.2.5 TPP-L-GEM存在下吉西他滨对胞苷脱氨酶的稳定性测试 |
| 2.2.6 光照TPP-L-GEM释放吉西他滨检测 |
| 2.2.7 TPP-L-GEM光照下吉西他滨释放速率检测 |
| 2.2.8 细胞培养 |
| 2.2.9 体外光暗细胞毒性研究 |
| 2.2.10 TPP和TPP-L-GEM的细胞内吞研究 |
| 2.2.11 级联化疗药物释放观测 |
| 2.2.12 细胞凋亡坏死检测 |
| 2.2.13 pH2AX和PARP残基检测 |
| 2.2.14 PEG_(2000)-PLA_(2000)包裹TPP-L-GEM和TPP-UCL-GEM的形貌观察和粒径 |
| 2.2.15 PEG_(2000)-PLA_(2000)包裹TPP-L-GEM光照下吉西他滨释放速率检测 |
| 2.2.16 尾静脉治疗注射溶液的配置 |
| 2.2.17 小鼠荧光成像 |
| 2.2.18 皮下注射抗肿瘤实验 |
| 2.2.19 尾静脉注射抗肿瘤实验 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 前药合成与结构表征 |
| 2.3.2 体外ROS产生的检测 |
| 2.3.3 吉西他滨在ROS中的稳定性检测 |
| 2.3.4 光照产生ROS介导吉西他滨级联释放 |
| 2.3.5 前药TPP-L-GEM增强吉西他滨对胞苷脱氨酶稳定性探索 |
| 2.3.6 体外细胞毒性探讨 |
| 2.3.7 光照导致细胞内级联药物释放 |
| 2.3.8 细胞凋亡坏死研究以及DNA断裂的检测 |
| 2.3.9 皮下注射抗肿瘤实验 |
| 2.3.10 荧光介导的抗肿瘤实验(尾静脉注射) |
| 2.4 结论 |
| 参考文献 |
| 第三章 电荷翻转细胞膜靶向自传递嵌合肽用于光动力学治疗研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂 |
| 3.2.2 细胞培养 |
| 3.2.3 多肽合成 |
| 3.2.4 粒径,Zeta电势变化测定 |
| 3.2.5 纳米粒子形貌观测 |
| 3.2.6 嵌合肽UV-VIS吸收测量 |
| 3.2.7 临界胶束浓度(CMC)的测定 |
| 3.2.8 酸碱滴定曲线 |
| 3.2.9 单线态氧产生性能测试 |
| 3.2.10 流式细胞仪检测4T1细胞对各种嵌合肽的摄入 |
| 3.2.11 共聚焦观测嵌合肽细胞膜靶向性 |
| 3.2.12 细胞毒性测试 |
| 3.2.13 细胞膜损伤表征 |
| 3.2.14 细胞凋亡坏死测定 |
| 3.2.15 C_(16)-PRP-DMA的血液循环时间测试 |
| 3.2.16 体内光学成像和组织分布研究 |
| 3.2.17 体内抗肿瘤实验 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 C_(16)-PRP-DMA的合成与表征 |
| 3.3.2 C_(16)-PRP-DMA电荷翻转性能测定 |
| 3.3.3 C_(16)-PRP-DMA电荷翻转引起胶束CMC变化 |
| 3.3.4 C_(16)-PRP-DMA溶液中产生ROS的测定 |
| 3.3.5 细胞内ROS生成的测定 |
| 3.3.6 细胞膜靶向研究 |
| 3.3.7 体外细胞毒性测定 |
| 3.3.8 细胞膜损伤鉴定 |
| 3.3.9 血液循环时间,肿瘤成像和组织分布 |
| 3.3.10 体内抗肿瘤实验 |
| 3.4 结论 |
| 参考文献 |
| 第四章 利用自产氧和双重光照策略增强光动力学治疗效果用于缺氧肿瘤治疗研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 试剂 |
| 4.2.2 合成CaO_2纳米粒子 |
| 4.2.3 CaO_2纳米粒子产氧和产H_2O_2研究 |
| 4.2.4 制备LipoMB/CaO_2和LipoMB |
| 4.2.5 LipoMB/CaO_2和LipoMB粒径表征 |
| 4.2.6 LipoMB/CaO_2和LipoMB产氧测试 |
| 4.2.7 RNO法检测单线态氧产生 |
| 4.2.8 LipoMB/CaO_2和LipoMB中荧光淬灭检测 |
| 4.2.9 细胞培养 |
| 4.2.10 LipoMB/CaO_2增强缺氧肿瘤细胞PDT时ROS产生 |
| 4.2.11 LipoMB/CaO_2缓解肿瘤细胞缺氧性能研究 |
| 4.2.12 细胞毒性研究 |
| 4.2.13 凋亡坏死检测 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 CaO_2的合成和表征 |
| 4.3.2 LipoMB/CaO_2的合成和表征 |
| 4.3.3 LipoMB/CaO_2产氧性能表征 |
| 4.3.4 LipoMB/CaO_2调节缺氧微环境,增加ROS产生 |
| 4.3.5 LipoMB/CaO_2细胞毒性表征 |
| 4.3.6 细胞凋亡坏死检测 |
| 4.4 结论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 附录 作者在攻读博士学位期间已发表的论文 |
| 致谢 |
四、维生素C对不同浓度氧环境培养细胞化学发光的影响（论文参考文献）
- [1]基于Stenhouse盐构筑的H2O2响应型级联肿瘤药物递送系统[D]. 管羽. 青岛科技大学, 2021(01)
- [2]石菖蒲挥发油成分α-细辛醚对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究[D]. 徐飞飞. 山西中医药大学, 2021(09)
- [3]Nrf2-ARE信号通路抵御小鼠乳腺氧化应激的分子机制及槲皮素对其调控研究[D]. 李泳欣. 浙江大学, 2021(02)
- [4]射频烫漂灭酶对莴笋理化特性的影响及其细胞作用机理研究[D]. 姚益顺. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [5]脂多糖引起奶牛乳腺和机体氧化应激损伤及蒲公英提取物对其阻断效果的研究[D]. 孙雅望. 西南大学, 2021
- [6]莱菔硫烷对缺氧环境下成骨细胞活性和矿化的影响[D]. 陈巧凤. 南方医科大学, 2020(01)
- [7]卟啉基纳米多孔材料的制备及生物医学应用[D]. 郑孝华. 中国科学技术大学, 2019
- [8]过氧化氢响应性自发光纳米粒的构建及其在肿瘤成像和光动力治疗中的应用研究[D]. 安会杰. 中国人民解放军陆军军医大学, 2019(03)
- [9]晚期氧化蛋白产物下调滋养细胞Nrf-2/ARE信号通路在子痫前期中的作用及机制[D]. 陈淑滢. 南方医科大学, 2021
- [10]多功能药物体系用于肿瘤治疗与成像研究[D]. 刘理涵. 武汉大学, 2017(06)