黑胡椒中呕吐毒素的高效液相检测研究

论文摘要

本文针对黑胡椒中呕吐毒素的检测方法建立进行了系统研究,优化了提取、净化和仪器检测条件,分别对有机溶剂提取-免疫亲和柱净化-HPLC检测,水提取-免疫亲和柱净化-HPLC检测,提取-MycoSep227多功能净化柱净化-HPLC检测黑胡椒中DON的方法进行了试验,取得了以下主要结果:1、建立了有机溶剂提取-免疫亲和柱净化-HPLC检测方法,DON的检出限和定量限分别为10μg/kg和33μg/kg,在添加范围为0.5～2μg/g,回收率为72.68%～91.47%,RSD<3,回收率满足要求,精密度和重现性良好。2、建立了黑胡椒中呕吐毒素的最适合检测方法是水提取-免疫亲和柱净化-HPLC检测,DON的检出限和定量限为14μg/kg和55μg/kg,平均回收率103.88%,RSD1.73～2.45。与有机溶剂提取法相比,水提法减少了转移操作,并采用二步提取,有效扩大了料液的接触面积,回收率和重现性方面都优于有机溶剂提取法。3、建立了提取-MycoSep227多功能净化柱净化-HPLC检测方法,黑胡椒中DON的检出限为50μg/kg,定量限为200μg/kg,加标量在0.2～4μg/g之间时,加标回收率稳定在89.66～98.78%之间,6次测定的RSD在1.81～3.25之间。与免疫亲和柱相比,MycoSep227净化柱净化效果和重现性较差,尤其是DON含量较低时,黑胡椒中过多的杂质严重干扰了HPLC的检测结果。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 胡椒产销量分析
• 1.1.1 我国在世界胡椒产量中的比重
• 1.1.2 世界胡椒出口情况
• 1.2 呕吐毒素结构及物理化学性质
• 1.3 呕吐毒素的产生极其毒性
• 1.4 呕吐毒素检测技术研究进展
• 1.4.1 国内研究进展
• 1.4.2 国外检测技术研究进展
• 1.4.3 国内外研究情况对比
• 1.5 研究目的和意义
• 1.6 技术路线与研究内容
• 1.6.1 技术路线
• 1.6.2 研究内容
• 第二章 固相萃取柱-HPLC 检测黑胡椒中呕吐毒素的净化条件对比初探
• 2.1 试验材料与设备
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 仪器设备
• 2.2 试验内容与方法
• 2.2.1 OASISTMHLB 小柱
• 2.2.2 LC-Florisil SPE 小柱
• 2.2.3 C18 固相萃取柱
• 2.2.4 SAX 离子交换柱
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 标准曲线的建立
• 2.3.2 HLB 小柱净化
• 2.3.3 佛罗里硅柱净化
• 2.3.4 C18 柱净化
• 2.3.5 SAX 阴离子交换柱净化
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 第三章 有机溶剂提取-免疫亲和柱净化-HPLC 检测方法
• 3.1 试验材料与设备
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 仪器设备
• 3.2 试验内容与方法
• 3.2.1 试验原理
• 3.2.2 毒素提取工艺条件
• 3.2.3 免疫亲和柱（IAC）净化DON
• 3.2.4 高效液相色谱-光电二极管矩阵检测器（HPLC-PDA）检测条件的建立
• 3.3 数据处理
• 3.4 结果与分析
• 3.4.1 提取条件结果分析
• 3.4.2 净化条件结果分析
• 3.4.3 检测条件的建立
• 3.4.4 标准曲线和检测限
• 3.4.5 回收率和精密度试验
• 3.5 讨论
• 3.5.1 提取
• 3.5.2 净化
• 3.5.3 检测
• 3.6 小结
• 第四章 水提取-免疫亲和柱-HPLC 检测方法
• 4.1 试验材料与仪器
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 仪器设备
• 4.2 试验内容与方法
• 4.2.1 试验原理
• 4.2.2 毒素提取工艺条件
• 4.2.3 免疫亲和柱（IAC）净化DON
• 4.2.4 高效液相色谱-光电二极管矩阵检测器（HPLC-PDA）检测条件
• 4.3 试验结果与分析
• 4.3.1 PEG 的添加及过滤
• 4.3.2 二步提取
• 4.3.3 标准曲线与检出限、定量限
• 4.3.4 方法的回收率和精密度试验
• 4.4 讨论
• 4.4.1 提取
• 4.4.2 净化
• 4.4.3 水提取与有机溶剂提取比较
• 4.5 小结
• 第五章 多功能净化柱-HPLC 检测检测方法
• 5.1 试验材料与仪器
• 5.1.1 试验材料
• 5.1.2 仪器设备
• 5.2 实验内容与方法
• 5.2.1 试验原理
• 5.2.2 提取
• 5.2.3 净化
• 5.2.4 检测条件
• 5.2.5 样品加标回收率和精密度试验
• 5.2.6 检测限和定量限
• 5.3 结果与分析
• 5.3.1 提取条件的确定
• 5.3.2 净化操作的优化
• 5.3.3 标准曲线的建立
• 5.3.4 加标回收和精密度试验
• 5.3.5 检测限和定量限
• 5.4 讨论
• 5.4.1 提取
• 5.4.2 净化
• 5.5 小结
• 第六章 结论与创新点
• 6.1 结论
• 6.2 创新点
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介