本文主要研究内容
作者马卫红（2019）在《贵州鸡源H9N2亚型禽流感病毒对鸡、鸭和小鼠致病性研究》一文中研究指出：低致病性禽流感在禽类之间普遍存在,其病毒已在多种哺乳动物上分离到。为研究低致病性禽流感在不同畜种间跨畜种传播感染情况,了解低致病性禽流感的致病机制,为禽流感的防治以及公共卫生安全提供参考和理论依据,故本实验用鸡、鸭和小鼠三种动物来研究低致病性禽流感跨畜种感染动物的情况,了解不同动物的致病特点及致病机理。方法:实验选用52d黑羽乌骨鸡24只,52d樱桃谷鸭24只,6-8周昆明系小白鼠24只,随机分成四组,按0d、3d、6d、9d作分组标记,每组鸡、鸭和小鼠6只,感染前0d组为阴性对照,感染后3d、6d、9d为阳性对照。0d阴性对照注射0.2mLPBS,3d、6d和9d阳性对照注射107.0EID50/0.2mL H9N2 AIV（鸡鸭翅下静脉,小鼠尾静脉）。按0d、3d、6d、9d采集脏器组织和血液样品作为后续实验的材料。具体实验如下:（1）用血凝实验来测三种动物的血凝效价,观察临床和解剖病理症状,测肺系数,用三类细胞分析仪检测三种动物的血液生理指标及用免疫球蛋白G（IgG）ELISA试剂盒检测其IgG抗体水平;（2）将肺脏、气管等组织制作成切片,通过苏木素-伊红（HE）染色,并观察其病理变化情况;（3）用实时荧光定量PCR检测三种动物肺组织中的病毒含量;（4）将肺脏、气管等组织制作成切片,通过甲苯胺蓝（TB）染色,观察三种动物感染以后的肥大细胞（MC）的情况;（5）用ELISA试剂盒检测三种动物血液中的肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素2（IL-2）、组胺的含量（HIS）;（6）用实时荧光定量PCR方法检测肺组织中钙调蛋白（CaM）mRNA的转录情况,并用ELISA试剂盒检测三种动物肺组织中CaM的含量。结果:（1）感染后血凝效价均≥24,对照组均<24;感染动物荧光RT-PCR检测均有扩增曲线,空白对照没有扩增曲线;（2）鸡的白细胞在9d时显著下降（P<0.05）,鸭的在3d时极显著升高（P<0.01）,小鼠的白细胞在6d和9d时极显著升高（P<0.01）;鸡的红细胞在9d时显著降低（P<0.05）,鸭在3d和6d时极显著升高（P<0.01）,9d时显著升高（P<0.05）,小鼠在3d时显著升高（P<0.05）,6d和9d时极显著升高（P<0.01）;鸡血小板在6d时显著升高（P<0.05）,鸭在3d和6d时极显著升高（P<0.01）;感染后,鸡、鸭和小鼠IgG水平显著升高;（3）感染病毒后,鸡出现精神浓郁,食欲减退,胸腺和肺脏肿大,胸腔有积液,肺泡腔有明显的红细胞,肺组织大量的中性粒细胞,气管腔内可见有红细胞及渗出物;鸭有胸腔积液,肺肿大,肺组织有出血和大量的中性粒细胞;小鼠出现精神沉郁,食欲减退,肺肿和脾肿大,肺组织有红细胞。从病理评分上看,鸡、鸭和小鼠感染后3d和6d时病理评分值极显著升高（P<0.01）,6d时病理评分值最高,9d时与6d比,鸭和小鼠的病理评分值显著下降(（P<0.05）,鸡在6d时病理评分值极显著高于鸭（P<0.01）,而显著高于小鼠（P<0.05）;（4）感染后,鸡鸭在肺、气管、肠、法氏囊和胸腺组织中的MC数量极显著升高（P<0.01）,在脾组织中的MC数量显著升高（P<0.05）;（5）感染后三种动物肺组织的含毒在3d时含毒量最高,含毒量鸡>鸭>小鼠;（6）感染后,鸡、鸭和小鼠外周血中的IL-2、TNF-α、HIS均显著升高（（P<0.05））;（7）感染后,三种动物肺组织中的CaM转录水平显著升高（P<0.05）,但CaM蛋白的表达量极显著降低（P<0.01）。结论:1.证实低致病性禽流感可跨种畜传播,鸡易感,鸭次之,小鼠最不易感;2.低致病性禽流感可造成动物肺组织为主的病理损伤,鸡的病理损伤最严重,小鼠的最轻;3.低致病性禽流感感染后可引起炎性反应,并可诱导炎性因子释放,导致病理损伤;4.低致病性禽流感可上调CaM mRNA在肺组织中的转录水平,但抑制CaM蛋白在肺组织中的表达。
Abstract
di zhi bing xing qin liu gan zai qin lei zhi jian pu bian cun zai ,ji bing du yi zai duo chong bu ru dong wu shang fen li dao 。wei yan jiu di zhi bing xing qin liu gan zai bu tong chu chong jian kua chu chong chuan bo gan ran qing kuang ,le jie di zhi bing xing qin liu gan de zhi bing ji zhi ,wei qin liu gan de fang zhi yi ji gong gong wei sheng an quan di gong can kao he li lun yi ju ,gu ben shi yan yong ji 、ya he xiao shu san chong dong wu lai yan jiu di zhi bing xing qin liu gan kua chu chong gan ran dong wu de qing kuang ,le jie bu tong dong wu de zhi bing te dian ji zhi bing ji li 。fang fa :shi yan shua yong 52dhei yu wu gu ji 24zhi ,52dying tao gu ya 24zhi ,6-8zhou kun ming ji xiao bai shu 24zhi ,sui ji fen cheng si zu ,an 0d、3d、6d、9dzuo fen zu biao ji ,mei zu ji 、ya he xiao shu 6zhi ,gan ran qian 0dzu wei yin xing dui zhao ,gan ran hou 3d、6d、9dwei yang xing dui zhao 。0dyin xing dui zhao zhu she 0.2mLPBS,3d、6dhe 9dyang xing dui zhao zhu she 107.0EID50/0.2mL H9N2 AIV（ji ya chi xia jing mai ,xiao shu wei jing mai ）。an 0d、3d、6d、9dcai ji zang qi zu zhi he xie ye yang pin zuo wei hou xu shi yan de cai liao 。ju ti shi yan ru xia :（1）yong xie ning shi yan lai ce san chong dong wu de xie ning xiao jia ,guan cha lin chuang he jie pou bing li zheng zhuang ,ce fei ji shu ,yong san lei xi bao fen xi yi jian ce san chong dong wu de xie ye sheng li zhi biao ji yong mian yi qiu dan bai G（IgG）ELISAshi ji he jian ce ji IgGkang ti shui ping ;（2）jiang fei zang 、qi guan deng zu zhi zhi zuo cheng qie pian ,tong guo su mu su -yi gong （HE）ran se ,bing guan cha ji bing li bian hua qing kuang ;（3）yong shi shi ying guang ding liang PCRjian ce san chong dong wu fei zu zhi zhong de bing du han liang ;（4）jiang fei zang 、qi guan deng zu zhi zhi zuo cheng qie pian ,tong guo jia ben an lan （TB）ran se ,guan cha san chong dong wu gan ran yi hou de fei da xi bao （MC）de qing kuang ;（5）yong ELISAshi ji he jian ce san chong dong wu xie ye zhong de zhong liu huai si yin zi （TNF-α）、bai xi bao jie su 2（IL-2）、zu an de han liang （HIS）;（6）yong shi shi ying guang ding liang PCRfang fa jian ce fei zu zhi zhong gai diao dan bai （CaM）mRNAde zhuai lu qing kuang ,bing yong ELISAshi ji he jian ce san chong dong wu fei zu zhi zhong CaMde han liang 。jie guo :（1）gan ran hou xie ning xiao jia jun ≥24,dui zhao zu jun <24;gan ran dong wu ying guang RT-PCRjian ce jun you kuo zeng qu xian ,kong bai dui zhao mei you kuo zeng qu xian ;（2）ji de bai xi bao zai 9dshi xian zhe xia jiang （P<0.05）,ya de zai 3dshi ji xian zhe sheng gao （P<0.01）,xiao shu de bai xi bao zai 6dhe 9dshi ji xian zhe sheng gao （P<0.01）;ji de gong xi bao zai 9dshi xian zhe jiang di （P<0.05）,ya zai 3dhe 6dshi ji xian zhe sheng gao （P<0.01）,9dshi xian zhe sheng gao （P<0.05）,xiao shu zai 3dshi xian zhe sheng gao （P<0.05）,6dhe 9dshi ji xian zhe sheng gao （P<0.01）;ji xie xiao ban zai 6dshi xian zhe sheng gao （P<0.05）,ya zai 3dhe 6dshi ji xian zhe sheng gao （P<0.01）;gan ran hou ,ji 、ya he xiao shu IgGshui ping xian zhe sheng gao ;（3）gan ran bing du hou ,ji chu xian jing shen nong yu ,shi yu jian tui ,xiong xian he fei zang zhong da ,xiong qiang you ji ye ,fei pao qiang you ming xian de gong xi bao ,fei zu zhi da liang de zhong xing li xi bao ,qi guan qiang nei ke jian you gong xi bao ji shen chu wu ;ya you xiong qiang ji ye ,fei zhong da ,fei zu zhi you chu xie he da liang de zhong xing li xi bao ;xiao shu chu xian jing shen chen yu ,shi yu jian tui ,fei zhong he pi zhong da ,fei zu zhi you gong xi bao 。cong bing li ping fen shang kan ,ji 、ya he xiao shu gan ran hou 3dhe 6dshi bing li ping fen zhi ji xian zhe sheng gao （P<0.01）,6dshi bing li ping fen zhi zui gao ,9dshi yu 6dbi ,ya he xiao shu de bing li ping fen zhi xian zhe xia jiang (（P<0.05）,ji zai 6dshi bing li ping fen zhi ji xian zhe gao yu ya （P<0.01）,er xian zhe gao yu xiao shu （P<0.05）;（4）gan ran hou ,ji ya zai fei 、qi guan 、chang 、fa shi nang he xiong xian zu zhi zhong de MCshu liang ji xian zhe sheng gao （P<0.01）,zai pi zu zhi zhong de MCshu liang xian zhe sheng gao （P<0.05）;（5）gan ran hou san chong dong wu fei zu zhi de han du zai 3dshi han du liang zui gao ,han du liang ji >ya >xiao shu ;（6）gan ran hou ,ji 、ya he xiao shu wai zhou xie zhong de IL-2、TNF-α、HISjun xian zhe sheng gao （（P<0.05））;（7）gan ran hou ,san chong dong wu fei zu zhi zhong de CaMzhuai lu shui ping xian zhe sheng gao （P<0.05）,dan CaMdan bai de biao da liang ji xian zhe jiang di （P<0.01）。jie lun :1.zheng shi di zhi bing xing qin liu gan ke kua chong chu chuan bo ,ji yi gan ,ya ci zhi ,xiao shu zui bu yi gan ;2.di zhi bing xing qin liu gan ke zao cheng dong wu fei zu zhi wei zhu de bing li sun shang ,ji de bing li sun shang zui yan chong ,xiao shu de zui qing ;3.di zhi bing xing qin liu gan gan ran hou ke yin qi yan xing fan ying ,bing ke you dao yan xing yin zi shi fang ,dao zhi bing li sun shang ;4.di zhi bing xing qin liu gan ke shang diao CaM mRNAzai fei zu zhi zhong de zhuai lu shui ping ,dan yi zhi CaMdan bai zai fei zu zhi zhong de biao da 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自贵州大学的马卫红，发表于刊物贵州大学2019-07-16论文，是一篇关于小鼠论文,致病性论文,贵州大学2019-07-16论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自贵州大学2019-07-16论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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