视网膜变性大鼠视网膜CSPGs表达及CSPGs降解对光感受器凋亡的影响

视网膜变性大鼠视网膜CSPGs表达及CSPGs降解对光感受器凋亡的影响

论文摘要

目的:1.建立碘酸钠诱导视网膜变性大鼠模型,探讨硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)在碘酸钠诱导视网膜变性大鼠视网膜中的表达特点。2.证实硫酸软骨素酶(chondroitinaseABC, ChABC)对视网膜变性大鼠中硫酸软骨素蛋白多糖的降解作用,及缓解视网膜光感受器细胞的凋亡,并初步探讨其缓解凋亡的可能机制。方法:1.经腹腔注射新鲜配制的3%NaIO3(100mg·kg-1)建立视网膜变性动物模型。实验大鼠随机分成:正常对照组、造模14d组、造模28d组。取眼球做病理检查,苏木素-伊红(HE)染色及细胞凋亡检测,验证视网膜变性大鼠的建立;免疫荧光法观察视网膜上CSPGs表达的时空规律;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CSPGs多功能蛋白聚糖(Versican) mRNA的表达情况。2.造模后7d,6只视网膜变性大鼠玻璃体腔注射2μl ChABC酶作为治疗组,另6只视网膜变性大鼠玻璃体腔注射等量磷酸盐缓冲液(Phosphat bufferliquid,PBS)作为PBS组,6只视网膜变性大鼠和6只正常SD大鼠不行玻璃体腔注射作为对照组。玻璃体腔注射后3w,采用免疫荧光法观察各组大鼠视网膜CSPGs表达;RT-PCR法检测CSPGs多功能蛋白聚糖(Versican) mRNA表达,并检测光感受器凋亡情况。结果:1.注射NaIO3后,大鼠视网膜出现变性改变,且光感受器发生渐进性凋亡,造模14d、28d凋亡率分别为(32.33±2.34)%、(41.67±2.58)%,各组间差异显著(F=409.81,P<0.01)。造模14d组,CS-56在视锥视杆层、外核层、内核层、节细胞层表达;造模28d组,CSPGs继续扩增到外丛状层。随造模时间延长,各层荧光表达逐渐增强。造模组Versican mRNA表达(1.02±0.06)显著高于正常对照组(0.23±0.02)(F=487.23,P<0.01)。2.(1)偶见SD对照组大鼠CSPGs于脉络膜、内核层、节细胞层弱阳性表达,注射碘酸钠4w后大鼠CSPGs扩增到外核层、外丛状层,各层荧光明显增强,而同期ChABC酶治疗组大鼠CSPGs在视网膜各层表达明显减弱;VersicanmRNA表达与此一致,正常SD对照组、视网膜变性对照组、PBS组、治疗组Versican mRNA的灰度比分别是(0.18±0.02)、(0.92±0.03)、(0.98±0.06)和(0.30±0.01),其中,视网膜变性对照组和PBS组灰度比无显著差异(P>0.05),治疗组灰度比明显低于视网膜变性对照组(F=562.01,P<0.01)。(2)正常SD对照组、视网膜变性对照组、PBS组、治疗组大鼠视网膜光感受器凋亡率分别为(7.33±1.03)%、(40.0±2.37)%、(41.83±2.32)、(35.2+1.94)%,视网膜变性对照组和PBS组凋亡率无显著差异(P>0.05),治疗组凋亡率显著低于视网膜变性对照组(F=392.81,P<0.01)。结论:1.在碘酸钠诱导视网膜色素上皮细胞变性大鼠中,随时间延长CSPGs表达范围扩大,表达量增加。2. ChABC酶能通过降解模型大鼠视网膜上异常沉积的CSPGs,减少光感受器细胞的凋亡,从而促进模型大鼠视网膜损伤修复。

论文目录

  • 英文缩略词表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 前言
  • 第一部分 硫酸软骨素蛋白多糖在碘酸钠诱导视网膜变性大鼠中表达的研究
  • 研究背景
  • 材料与方法
  • 结果
  • 讨论
  • 第二部分 硫酸软骨素酶缓解碘酸钠诱导的视网膜变性大鼠光感受器细胞凋亡
  • 研究背景
  • 材料和方法
  • 结果
  • 讨论
  • 小结
  • 参考文献
  • 致谢
  • 综述
  • 参考文献
  • 相关论文文献

    • [1].CSPGs在大鼠脊髓损伤后的表达及其与GFAP的关系[J]. 现代生物医学进展 2010(24)
    • [2].补肾益髓方及其拆方对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的神经保护作用及NF200和CSPGs表达的影响[J]. 中华中医药杂志 2016(04)
    • [3].补肾益髓方及其拆方对星形胶质细胞胶质瘢痕中GFAP与CSPGs表达的影响[J]. 中国中医急症 2018(01)

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