本文主要研究内容
作者耿宏叶（2019）在《菠萝AcFTL1和AcFTL2基因的克隆及功能鉴定》一文中研究指出：菠萝是世界上三大热带草本果树之一,由于其独特的风味儿和营养价值深受消费者青睐,因而具有较高的商业价值。近年来,我国菠萝产业在国内外市场中并不具备竞争优势。开花是植物从营养生长过度到生殖生长的转折阶段,对植物果实的形成、果实的产量和品质具有长远的影响。乙烯诱导菠萝开花是一种常规的栽培技术,但其分子机制的研究尚处于初始阶段。FT是植物中可将多种途径的开花诱导信号进行整合并传递给下游的花分生组织决定基因的重要调节因子,因而具有重要的研究价值。菠萝AcFT基因(NCBI注册号:HQ343233.1)的表达受乙烯调控,并且能够促进拟南芥开花时间提前大约6.8天并增加花絮的数量。本研究首先从“MD-2”菠萝中克隆了两个新的FT同源基因AcFTL1和AcFTL2,并利用实时荧光定量PCR技术检测了AcFTL1和AcFTL2基因与对照基因(AcFT)分别对低浓度(600ppm)和高浓度(1200 ppm)乙烯利的响应特性,然后通过生物信息学的方法分析了AcFTL1和AcFTL2蛋白的理化性质、保守结构域、亲缘关系和信号肽等。进一步构建了35S::AcFTL1、35S::AcFTL2过表达载体,并利用农杆菌介导法将其转化野生型拟南芥进行功能鉴定。最后利用酵母双杂交技术检测了AcFTL1、AcFTL2、AcFDL1、AcFDL2、Ac14-3-3L五个蛋白之间的相互作用关系。研究结果表明:(1)AcFTL1、AcFTL2和AcFT三个基因都能被低浓度和高浓度乙烯诱导表达,并且它们都是对高浓度乙烯更加敏感;然而AcFTL1和AcFTL2对低浓度和高浓度乙烯的敏感程度都远高于AcFT,尤其是AcFTL1;这说明AcFTL1和AcFTL2与AcFT相比更有可能是“MD-2”菠萝乙烯诱花过程中的关键基因;(2)AcFTL1和AcFTL2两个蛋白的近N端各含有一个信号肽,而且在系统进化树中,这两个蛋白与拟南芥FT/TFL亚家族中能够促进开花的成员(FT和TSF)的亲缘关系相对较近,说明它们在菠萝的细胞或组织中可能具有转运的功能,而且还可能与促进菠萝开花有关;(3)过表达AcFTL1基因可以使拟南芥花期提前11~12天左右,而且还能使拟南芥莲座叶变皱(尤其是叶尖部位);然而过表达AcFTL2基因则对拟南芥花期没有任何影响;(4)AcFTL1蛋白能分别与AcFDL1和AcFDL2蛋白相互作用,而不能与Ac14-3-3L蛋白直接相互作用,但Ac14-3-3L能够与AcFDL1和AcFDL2相互作用;而AcFTL2蛋白则不能够与AcFDL1、AcFDL2和Ac14-3-3L蛋白相互作用,说明AcFTL1、AcFDL1、AcFDL2和Ac14-3-3L蛋白可能能够形成AcFTL1-AcFDL1-Ac14-3-3L或AcFTL1-AcFDL2-Ac14-3-3L蛋白复合体,并调控下游基因的表达促进菠萝开花。
Abstract
bo luo shi shi jie shang san da re dai cao ben guo shu zhi yi ,you yu ji du te de feng wei er he ying yang jia zhi shen shou xiao fei zhe qing lai ,yin er ju you jiao gao de shang ye jia zhi 。jin nian lai ,wo guo bo luo chan ye zai guo nei wai shi chang zhong bing bu ju bei jing zheng you shi 。kai hua shi zhi wu cong ying yang sheng chang guo du dao sheng shi sheng chang de zhuai she jie duan ,dui zhi wu guo shi de xing cheng 、guo shi de chan liang he pin zhi ju you chang yuan de ying xiang 。yi xi you dao bo luo kai hua shi yi chong chang gui de zai pei ji shu ,dan ji fen zi ji zhi de yan jiu shang chu yu chu shi jie duan 。FTshi zhi wu zhong ke jiang duo chong tu jing de kai hua you dao xin hao jin hang zheng ge bing chuan di gei xia you de hua fen sheng zu zhi jue ding ji yin de chong yao diao jie yin zi ,yin er ju you chong yao de yan jiu jia zhi 。bo luo AcFTji yin (NCBIzhu ce hao :HQ343233.1)de biao da shou yi xi diao kong ,bing ju neng gou cu jin ni na gai kai hua shi jian di qian da yao 6.8tian bing zeng jia hua xu de shu liang 。ben yan jiu shou xian cong “MD-2”bo luo zhong ke long le liang ge xin de FTtong yuan ji yin AcFTL1he AcFTL2,bing li yong shi shi ying guang ding liang PCRji shu jian ce le AcFTL1he AcFTL2ji yin yu dui zhao ji yin (AcFT)fen bie dui di nong du (600ppm)he gao nong du (1200 ppm)yi xi li de xiang ying te xing ,ran hou tong guo sheng wu xin xi xue de fang fa fen xi le AcFTL1he AcFTL2dan bai de li hua xing zhi 、bao shou jie gou yu 、qin yuan guan ji he xin hao tai deng 。jin yi bu gou jian le 35S::AcFTL1、35S::AcFTL2guo biao da zai ti ,bing li yong nong gan jun jie dao fa jiang ji zhuai hua ye sheng xing ni na gai jin hang gong neng jian ding 。zui hou li yong jiao mu shuang za jiao ji shu jian ce le AcFTL1、AcFTL2、AcFDL1、AcFDL2、Ac14-3-3Lwu ge dan bai zhi jian de xiang hu zuo yong guan ji 。yan jiu jie guo biao ming :(1)AcFTL1、AcFTL2he AcFTsan ge ji yin dou neng bei di nong du he gao nong du yi xi you dao biao da ,bing ju ta men dou shi dui gao nong du yi xi geng jia min gan ;ran er AcFTL1he AcFTL2dui di nong du he gao nong du yi xi de min gan cheng du dou yuan gao yu AcFT,you ji shi AcFTL1;zhe shui ming AcFTL1he AcFTL2yu AcFTxiang bi geng you ke neng shi “MD-2”bo luo yi xi you hua guo cheng zhong de guan jian ji yin ;(2)AcFTL1he AcFTL2liang ge dan bai de jin Nduan ge han you yi ge xin hao tai ,er ju zai ji tong jin hua shu zhong ,zhe liang ge dan bai yu ni na gai FT/TFLya jia zu zhong neng gou cu jin kai hua de cheng yuan (FThe TSF)de qin yuan guan ji xiang dui jiao jin ,shui ming ta men zai bo luo de xi bao huo zu zhi zhong ke neng ju you zhuai yun de gong neng ,er ju hai ke neng yu cu jin bo luo kai hua you guan ;(3)guo biao da AcFTL1ji yin ke yi shi ni na gai hua ji di qian 11~12tian zuo you ,er ju hai neng shi ni na gai lian zuo xie bian zhou (you ji shi xie jian bu wei );ran er guo biao da AcFTL2ji yin ze dui ni na gai hua ji mei you ren he ying xiang ;(4)AcFTL1dan bai neng fen bie yu AcFDL1he AcFDL2dan bai xiang hu zuo yong ,er bu neng yu Ac14-3-3Ldan bai zhi jie xiang hu zuo yong ,dan Ac14-3-3Lneng gou yu AcFDL1he AcFDL2xiang hu zuo yong ;er AcFTL2dan bai ze bu neng gou yu AcFDL1、AcFDL2he Ac14-3-3Ldan bai xiang hu zuo yong ,shui ming AcFTL1、AcFDL1、AcFDL2he Ac14-3-3Ldan bai ke neng neng gou xing cheng AcFTL1-AcFDL1-Ac14-3-3Lhuo AcFTL1-AcFDL2-Ac14-3-3Ldan bai fu ge ti ,bing diao kong xia you ji yin de biao da cu jin bo luo kai hua 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自长江大学的耿宏叶，发表于刊物长江大学2019-09-04论文，是一篇关于菠萝论文,乙烯论文,基因论文,基因论文,蛋白论文,拟南芥论文,酵母论文,长江大学2019-09-04论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自长江大学2019-09-04论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。