丹星通络汤对大鼠脑缺血再灌注损伤TNF-α、NF-κB表达的影响

论文摘要

目的:脑血管病是当今危及人类健康的三大原因之一,其中缺血性脑血管病与出血性脑血管病的发病比约为3:1,因此缺血性脑血管病已成为当前防治脑血管病的工作重点。治疗急性缺血性脑血管病的最有效措施是早期溶栓,但是由于溶栓时间窗短（≤6小时）,只有少部分病人得益于溶栓。通过溶栓或侧支循环等方法能够使缺血区大脑血流恢复,却会使原有的缺血性损伤加重,从而产生再灌注损伤,引起颅内出血、脑水肿等严重的并发症,限制了溶栓治疗的广泛应用。怎样减轻脑缺血再灌注损伤,保护神经细胞,减轻中风后遗症的发生,提高患者生存率成为目前的研究热点。中医称缺血性脑血管病为缺血性中风,此病是中老年人的常见病和多发病,具有起病急、致残率高、死亡率高的特点。很多医家认为,缺血性中风是本虚标实,虚乃肝肾阴虚或气血虚弱,肝肾阴虚于下,肝阳亢于上,复加饮食起居不当,情志刺激或感受外邪,致使气血上冲于脑,神窍闭阻。肝肾阴虚是致病之本,风、火、痰、瘀是发病之标,故在标为实。针对此病因我们应用丹星通络汤通过通腑泄热,祛痰开窍,化瘀通络法,使腑气通,痰热去,九窍利,治疗和预防本病。丹星通络汤是我科室多年的临床经验方,方中胆南星、黄芩、玄参清热化痰,丹参、川芎、三七、红花活血通络,能有效清除脑络的痰浊和瘀血,大黄、黄芩通腑泄热。诸药共奏通腑化瘀,祛痰开窍之功效。大量实验证明,脑缺血急性期炎性反应导致了缺血性神经损伤的加重,是脑缺血病理过程中极为重要的环节。其中炎性细胞和以细胞因子为代表的炎性介质肿瘤坏死因子α（TNF-α）参与了炎症反应的调控,最终促使神经细胞从早期缺血到细胞死亡的不可逆损害演变,加重脑损伤。近年来的研究发现,核因子-kappaB（NF-κB）活化与缺血性神经元损害密切相关。如何调控NF-κB的活化以及炎症因子的表达是神经保护研究的一个潜在目标。本实验通过观察TNF-α与NF-κB在大鼠脑缺血再灌注组织中的表达情况,旨在为临床应用丹星通络汤提供客观依据。方法:40只SD大鼠,雌雄不拘,随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、尼莫地平组、丹星通络汤小剂量组、丹星通络汤大剂量组,每组各8只大鼠。假手术组和脑缺血再灌注组分别灌以1.0ml/100g的生理盐水,每日灌胃一次,连续7天;尼莫地平组每日尼莫地平灌胃一次（1.0ml/100g）,连续7天;丹星通络汤小剂量组（0.75ml/100g）、大剂量组（1.5ml/100g）每日丹星通络汤灌胃一次,连续7天,于第7天给药2h后开始手术。采用大脑中动脉线栓法制作局灶脑缺血再灌注大鼠模型（假手术组不予处理）。大鼠局灶性脑缺血2h,然后进行再灌注,于再灌注24h后进行观察,采用Longa评分标准,合格者检测TNF-α和NF-κB的阳性细胞表达水平。结果:1.利用HE快速常规染色技术对大鼠脑缺血再灌注后脑组织超薄切片进行形态学观察结果显示:假手术组大鼠大脑组织结构正常,海马神经元呈圆形或椭圆形,胞体较大,染色质分布均匀,核仁明显。缺血再灌注组大鼠大脑皮质层及海马锥体层的神经细胞间隙增宽,海马区神经元明显变性,胞浆变红,核模糊不清,核固缩或消失,胶质细胞数量增多。各用药组大鼠海马区也可见神经元变性,核模糊不清,核固缩或消失,但数量明显少于缺血再灌注组,且呈剂量依赖性,大剂量组及尼莫地平组改善最明显。2.通过免疫组织化学方法检测脑组织TNF-α、NF-κB阳性细胞的表达,结果表明脑缺血再灌注组的TNF-α及NF-κB的表达明显增加（P<0.01）,丹星通络汤大、小剂量组TNF-α及NF-κB的表达明显降低（P<0.01）。提示丹星通络汤对脑缺血再灌注损伤的保护作用与抑制炎症反应密切相关。结论:丹星通络汤对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,丹星通络汤的神经保护作用机制可能与其减轻细胞因子介导的炎症反应有关。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附图
• 综述
• 参考文献
• 致谢