论文摘要
为建立高效稳定的丝瓜离体快繁体系和开展丝瓜的遗传转化研究,本试验以普通丝瓜的子叶节为外植体,采用直接器官发生途径,比较系统地研究了子叶节直接不定芽诱导的技术体系,初步探讨了幼苗苗龄、基因型、切割方式、植物生长调节剂、蔗糖及AgNO3浓度等对普通丝瓜子叶节直接不定芽诱导的影响。结果表明:(1)不同苗龄对子叶节直接不定芽的诱导有极显著的影响,试验表明5-7 d苗龄(子叶扩展期或子叶旺盛生长期)是不定芽诱导的最佳时期;(2)子叶节的不同切割方式对直接不定芽的诱导率有显著影响,对出芽数有极显著影响,去除顶芽和腋芽、下胚轴纵切、保留2mm左右下胚轴、切除子叶的1/2为最佳切割方式;(3)不同种类和浓度的植物生长调节剂对子叶节不定芽的诱导率和出芽数有极显著的影响,其中BA具有关键作用;不同生长素种类也有重要影响,其中2,4-D的诱导率为零,而其他生长素对不定芽的诱导有促进作用,尤其是添加低浓度的IBA有助于不定芽的发生,最佳诱导培养基为:MS+BA 1.0mg/L+IBA 0.5 mg/L,不定芽诱导率可达80—87.5%,不定芽出芽数可达5.87—7.3个/外植体;(4)不同基因型对不定芽诱导率和每外植体出数均有极显著的影响,其中“早熟香丝瓜”的诱导效果最差,极显著地低于其他三个肉丝瓜品种,“大皱皮肉丝瓜”和“湖南肉丝瓜”的诱导效果最好;(5)不同蔗糖浓度对丝瓜子叶节不定芽诱导率无显著影响,但对不定芽出芽数有极显著影响,浓度过低(10g/L)或过高(60g/L)出芽数都低,而且,蔗糖有利于不定芽的生长,随着蔗糖浓度的增高,芽生长健壮,伸长明显;(6)添加低浓度(1.0、2.0 mg/L)的AgNO3对不定芽的诱导率无显著影响,但能明显抑制愈伤组织的分化,当浓度达到4.0 mg/L时,不定芽诱导率显著降低,外植体泛黄,活力受到明显抑制,同时畸形芽数量增加;(7)细胞分裂素的种类对不定芽的增殖倍数无显著影响,而细胞分裂素的浓度对增殖倍数有极显著影响,添加细胞分裂素能显著提高增值倍数,但浓度过高反而会降低增殖倍数,BA或KT的最佳浓度为0.5 mg/L和1.0 mg/L;(8)不定芽较容易生根,在试验的所有生根培养基中根的诱导率均达到100%,但在不同生根培养基上,根的生长情况有明显差异,综合考虑生根率和根生长情况,以1/2MS+NAA 0.2mg/L或MS+NAA 0.2mg/L为宜。
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