论文摘要
CBL蛋白（calcineurin B-like protein）是近年来发现的植物和某些原生动物所特有的一类Ca2+感受器,CBL与其相互作用的蛋白激酶CIPK（CBL Interacting Protein Kinase）构成Ca2+ -CBL-CIPK信号系统,在非生物逆境如高盐、干旱、低温等的信号传递中发挥着很重要的作用。本研究克隆得到了小麦TaCBL3基因的cDNA全长序列,并构建了TaCBL3基因的真核过表达载体,通过基因枪转化法将其导入到小麦中,获得了转基因小麦。主要进行了以下几个方面的工作:（1）首先在数据库中搜索并拼接小麦TaCBL基因的ESTs序列,然后设计特异性RT-PCR引物,克隆到一条CBL基因。（2）通过对该基因序列的生物信息学分析发现,该基因编码的蛋白含有和该家族其它蛋白不同数目的EF-hand结构域,拟南芥和水稻中CBL蛋白都有4个EF-hand结构域,而该蛋白只有3个EF-hand结构域。通过序列比对以及进化树分析发现,这个基因和OsCBL3的同源性最高,因此将其命名为TaCBL3基因。（3）已有的研究表明,OsCBL3基因能应答高盐、干旱、低温等多种非生物逆境信号。为了验证TaCBL3基因在非生物逆境胁迫中的作用,以及培育出新的抗逆小麦品系,我们将TaCBL3基因插入到pAHC25载体中,构建了小麦TaCBL3基因的过表达真核载体。利用基因枪转化技术将小麦TaCBL3基因导入到郑麦9023盾片中,通过组培技术,获得小麦转基因再生植株。（4）通过pAHC25载体上的bar基因序列,对小麦转基因再生植株进行bar基因的PCR扩增,筛选鉴定出7株阳性的转基因小麦。本文的研究结果为深入了解TaCBL3基因在小麦响应非生物逆境胁迫中的作用奠定了基础。