氧化低密度脂蛋白对巨噬细胞TOLL样受体4的表达效应及其机制的研究

论文摘要

第一章泡沫细胞形成过程中TOLL样受体4表达提高目的研究人单核细胞系在分化为巨噬细胞及转化为泡沫细胞过程中TOLL样受体4（TRL-4）表达的改变及其机制。方法体外培养人THP-1单核细胞系,加入佛波酯（PMA）培养48小时使其分化为巨噬细胞,后者再加入氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）进一步作用转化为泡沫细胞;此过程中用免疫细胞化学、蛋白质免疫印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测TLR-4蛋白表达及TLR-4 mRNA表达的水平。结果在单核细胞分化为巨噬细胞的过程中TLR-4 mRNA及蛋白表达水平提高,差异具有显著性（p<0.05）;在进一步转化为泡沫细胞过程中,TLR-4 mRNA及蛋白更加增高,与巨噬细胞相比差异有显著性（p<0.05）。结论单核细胞分化为泡沫细胞的过程中TLR-4转录水平的逐步上调可导致蛋白量合成不断增加,从而有可能提高泡沫细胞在动脉粥样硬化中的炎性反应能力。第二章氧化低密度脂蛋白对巨噬细胞TOLL样受体4的表达效应目的研究低密度脂蛋白（LDL）氧化对人单核细胞源巨噬细胞TOLL样受体4（TRL-4）表达的影响及其机制。方法体外培养人THP-1单核细胞系,加入佛波酯（PMA）培养48小时使其分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）或LDL,用免疫细胞化学、蛋白质免疫印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,观察脂蛋白氧化前后对巨噬细胞表达TLR-4蛋白及TLR-4 mRNA的影响。结果ox-LDL提高TLR-4蛋白及mRNA的表达,差异具有显著性（p<0.01）;LDL对表达无影响（少0.05）。结论LDL的氧化可能促进THP-1源巨噬细胞TLR-4转录水平的上调导致蛋白量合成增加;ox-LDL可能是动脉粥样硬化中炎症发生发展的原因之一。第三章干扰素-r对泡沫细胞形成过程中TOLL样受体4表达的影响目的研究人单核细胞系在分化为巨噬细胞及转化为泡沫细胞过程中干扰素-r对TOLL样受体4（TLR-4）表达的影响及其机制。方法体外培养人THP-1单核细胞系,加入佛波酯（PMA）培养48小时使其分化为巨噬细胞,后者再加入氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）进一步作用转化为泡沫细胞;此过程中用免疫细胞化学、蛋白质免疫印迹和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测干扰素-r对TLR-4蛋白表达及TLR-4 mRNA表达的作用。结果加入干扰素-r后巨噬细胞表达TLR-4 mRNA及蛋白的水平提高,差异具有显著性（p<0.05）;在进一步转化为泡沫细胞过程中,加入干扰素-r后mRNA及蛋白又增高,与泡沫细胞相比差异也有显著性（p<0.05）。结论在单核细胞分化为泡沫细胞过程中,干扰素-r增加TLR-4转录、上调蛋白的表达,提高泡沫细胞在动脉粥样硬化中的炎性反应能力。这可能是干扰素-r促进动脉粥样硬化的机制之一。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、前言
• 参考文献
• 四、正文
• 第一章 泡沫细胞形成过程中TOLL样受体4的表达
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二章 氧化低密度脂蛋白对巨噬细胞TOLL样受体4的表达效应
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第三章 干扰素对泡沫细胞形成过程中TOLL样受体4表达的影响
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 五、总结
• 六、创新
• 七、综述
• 综述一 动脉粥样硬化中的免疫反应
• 1.动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病
• 2.动脉粥样硬化是一种免疫反应过程
• 3.动脉粥样硬化中的抗原
• 4.内膜中的脂蛋白修饰
• 5.抗原的摄取
• 6.过氧化物酶体增生物激活受体
• 7.动脉粥样硬化的开始
• 8.特异性抗原引起动脉粥样硬化的适应性免疫
• 9.动脉粥样硬化中的T细胞
• 10.免疫反应在动脉粥样硬化中的作用
• 总结
• 综述二 TOLL样受体4与动脉粥样硬化
• 1.TLRs分子特征
• 2.TRLs与病原分子及内源性配体的结合
• 3.TLRs的信号转导途径
• 4.TLR-4在内皮细胞损伤中的作用机制
• 5.TLR-4与动脉粥样硬化（AS）
• 6.小结和展望
• 参考文献
• 综述三 氧化低密度脂蛋白与动脉粥样硬化
• 低密度脂蛋白的生物化学成分
• LDL氧化的机制
• 氧化低密度脂蛋白生物化学组成
• 心血管疾病中的氧化低密度脂蛋白
• 清道夫受体表达的调节
• 氧化低密度脂蛋白的生物作用
• 参考文献
• 八、攻读博士学位期间发表论文
• 九、致谢