葛根素心肌保护，调节血脂和舒血管的药理作用机制

论文摘要

1 葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌损伤的保护作用 在我国，葛根素，葛根中提取的主要异黄酮活性物质，被广泛用在心血管疾病的临床治疗上。尤其对心肌梗塞有显著疗效。然而，其中的药理作用机制还不是很清楚。研究表明环氧酶—2（COX—2）和一氧化氮（NO）在心肌梗塞中起着重要的作用。我们猜想葛根素的心脏保护功能可能与COX-2和一氧化氮合酶（NOS）特异的NO有所关联。通过连续皮下注射异丙肾上腺素三天（ISO，150mg／kg/d）来建立急性心肌损伤模型。治疗组大鼠在注射异丙肾上腺素之前和同时连续腹腔注射葛根素（30mg/kg／d，100mg/kg／d，300mg/kg／d）十天。最后一次注射异丙肾上腺素24小时后，通过Ⅱ导联心电图，血清乳酸脱氢酶（LDH），磷酸激酶（CK）活性，脂质过氧化物MDA的含量和心室／体重指数来判断心肌损伤与否。通过蛋白印迹或荧光定量RT—PCR来检测左心室NOS，炎症介导因子COX-2和肿瘤坏死因子（TNF-α）以及心肌纤维化相关蛋白胶原蛋白Ⅰ，胶原蛋白Ⅲ，纤连蛋白和层粘连蛋白的表达水平。结果发现，异丙肾上腺素模型组死亡率很高，存活大鼠的ST段显著上抬，血清LDH和CK活性，MDA含量以及心室／体重指数均增加。而葛根素治疗组死亡率显著降低，ST段，LDH和CK，MDA以及心室／体重指数都趋于正常。进一步研究发现，异丙肾上腺素模型组内皮一氧化氮合酶（eNOS）和神经一氧化氮合酶（nNOS）的表达水平显著降低，诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达水平显著增加：炎症介导因子，COX-2和TNF-α的mRNA水平显著增加；对于心肌纤维化相关蛋白，尽管胶原蛋白Ⅰ，胶原蛋白Ⅲ的mRNA水平没有显著性改变，但纤连蛋白的层粘连蛋白的mRNA水平显著升高。值得注意的是，葛根素能够阻止eNOS表达水平的下降，并能够下调COX-2和TNF-α，纤连蛋白和层粘连蛋白的表达水平。综上，葛根素能够有效防止异丙肾上腺素诱导的心肌损伤。这种心肌保护功能可能与其上调eNOS表达水平和／或抵抗炎症反应有关。对于葛根素抗炎的相关机制还有待于进一步的研究。

论文目录

• 英文缩略语词表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌损伤的保护作用
• 前言
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 药品
• 1.2 引物
• 1.3 试剂
• 1.4 仪器
• 1.5 动物
• 2 方法
• 2.1 实验动物分组与模型的建立
• 2.2 心电图记录
• 2.3 心室／体重指数检测
• 2.4 肌酸激酶（CK）,乳酸脱氢酶（LDH）的活性检测
• 2.5 心肌脂质过氧化物（MDA）水平测定
• 2.6 心肌—氧化氮的测定
• 2.7 荧光定量RT-PCR（Real time RT-PCR）
• 2.8 蛋白印迹（Western-blotting）
• 2.9 统计分析
• 结果
• 1 死亡率
• 2 心电图记录
• 3 心室／体重指数
• 4 血清CK和LDH活性
• 5 心肌脂质过氧化物（MDA）的水平
• 6 心肌NO水平
• 7 左心室心肌胶原蛋白Ⅰ,胶原蛋白Ⅲ,纤连蛋白和层粘连蛋白的mRNA转录水平
• 8 左心室心肌TNF-α和COX-2的mRNA转录水平
• 9 左心室心肌三种一氧化氮合酶的表达水平
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第二章 葛根素对大鼠膳食诱导的高胆固醇血症的血脂调节作用
• 前言
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 药品
• 1.2 引物
• 1.3 试剂
• 1.4 仪器
• 1.5 动物
• 2 方法
• 2.1 实验动物分组与模型的建立
• 2.2 血清血脂水平的测定
• 2.3 肝脏总胆固醇的含量的测定
• 2.4 肝脏脂质过氧化物（MDA）含量测定
• 2.5 荧光定量RT-PCR（Real time RT-PCR）
• 2.6 大鼠胸主动脉条的制备及其收缩记录
• 2.7 蛋白印迹（Western-blotting）
• 2.8 统计分析
• 结果
• 1 葛根素对大鼠体重的影响
• 2 葛根素对血脂水平的影响
• 3 葛根素对肝脏MDA的影响
• 4 与胆固醇平衡的相关酶蛋白的表达水平
• 5 胸主动脉内皮依赖性舒张反应
• 6 葛根素对eNOS表达水平的影响
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 第三章 葛根素对大鼠胸主动脉的舒张作用及其机制
• 前言
• 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 药品
• 1.2 试剂
• 1.3 仪器
• 1.4 动物
• 2 方法
• 2.1 体内给予葛根素试验
• 2.1.1 动物分组及给药
• 2.1.2 大鼠胸主动脉条的制备及其收缩记录
• 2.2 体外给予葛根素试验
• 2.2.1 大鼠胸主动脉条的制备及其收缩记录
• 2.2.2 葛根素对苯肾上腺素或KC1预收缩的大鼠胸主动脉条的舒张作用
• 2.2.3 葛根素对苯肾上腺素诱导大鼠胸主动脉条收缩的影响
• 2.2.4 葛根素对KCl诱导大鼠胸主动脉条收缩的影响
• 2诱导大鼠胸主动脉条收缩的影响'>2.2.5 葛根素对CaCl₂诱导大鼠胸主动脉条收缩的影响
• 2.2.6 葛根素对苯肾上腺素,KCl诱导的大鼠去内皮胸主动脉收缩的影响
• 2.2.7 葛根素对葛根素对内钙释放的影响的影响
• 2.2.8 葛根素舒血管作用机制的探究
• 2.2.9 统计分析
• 结果
• 1 体内给予葛根素试验
• 2 体外给予葛根素试验
• 2.1 葛根素对肾上腺素或KCl预收缩血管的舒张作用
• 2.2 葛根素对苯肾上腺素量—效曲线的影响
• 2.3 葛根素对KCl量—效曲线的影响
• 2量效曲线的影响'>2.4 葛根素对CaCl₂量效曲线的影响
• 2.5 葛根素对胞内钙释放的影响
• 2.6 环氧化酶抑制剂吲哚美辛对葛根素舒血管作用的影响
• 2.7 NO-cGMP通路抑制剂或激动剂对葛根素舒血管作用的影响
• 2.8 钾离子通道抑制剂对葛根素舒血管作用的影响
• 2.9 雌激素受体抑制剂对葛根素舒血管作用的影响
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述一 葛根素的基础研究及临床应用新进展
• 附录
• 致谢