论文摘要
在浓香型白酒制曲过程中,大曲微生物区系的组成及变化决定了制曲过程中大曲微生物物质能量代谢的走向,在很大程度上决定了浓香型白酒风格的形成。本课题以稻花香酿酒大曲为研究对象,采用传统微生物分离鉴定技术结合DGGE、克隆分析、系统发育分析等现代分子生物学技术,对稻花香酿酒大曲的微生物区系动态消长及优势菌种进行了更为全面的解析。初步得到了以下成果:（1）对稻花香入房3天、入房13天、出房、储存3个月四个时期的大曲进行了传统的微生物平板培养和分类统计,结果显示大曲中主要包括细菌、酵母菌、霉菌、放线菌四类微生物种群,细菌和酵母菌呈先下降后略有回升的趋势,霉菌和放线菌呈递减趋势。（2）对四个时期的大曲进行了理化指标分析,包括水分、酸度、液化力、糖化力、淀粉含量。结果显示理化指标的变化不仅与微生物的变化呈现一定的规律,而且微生物的消长也将导致理化指标的变化。（3）基于16SrDNA的PCR-DGGE技术对稻花香四个时期的大曲中原核微生物种群结构的变化进行了研究,使用原核同源引物对（341fGC/518R）从总DNA中扩增出目的16SrDNA,对扩增出的16SrDNA进行DGGE分析,优势条带经测序后得到同源性分析结果和系统发育树图,结果显示稻花香大曲中原核微生物多样性较丰富,优势种群结构变化较明显,主要包括细菌和放线菌,其中细菌占绝大部分,以芽孢杆菌、杆菌、球菌为主,芽孢杆菌数量和种类较多,球菌和杆菌种类相对较少,放线菌较单一以链霉菌为主。（4）使用18SrDNA的PCR-DGGE和系统发育分析对稻花香四个时期的大曲中真核微生物种群结构的变化进行了研究,使用真核同源引物对（NS-GC/EF4）从总DNA中扩增出目的18SrDNA,对扩增出的18SrDNA进行DGGE分析,优势条带经回收测序后得到同源性分析结果和系统发育树图,结果显示稻花香大曲中真核微生物优势种群明显,主要包括酵母菌和霉菌,两者的多样性较丰富,霉菌以曲霉为主,群落结构和优势种群呈现一定动态规律的变化。
论文目录
摘要Abstract第1章 绪论1.1 酒曲微生物研究概况1.2 微生物多样性1.2.1 微生物多样性概述1.2.2 微生物多样性研究方法1.3 变性梯度凝胶电泳1.3.1 变性梯度电泳的原理和特点1.3.2 变性梯度电泳的缺点1.3.3 变性梯度电泳在微生物多样性研究中的应用1.4 课题研究的目的及意义第2章 稻花香酿酒大曲平板分离与分类统计2.1 试验材料2.1.1 样品来源2.1.2 培养基2.2 试验方法2.2.1 微生物分离培养与计数2.2.2 菌种鉴定2.3 结果与分析2.3.1 细菌微生物数量变化及分析2.3.2 酵母菌微生物数量变化及分析2.3.3 霉菌微生物数量变化及分析2.3.4 放线菌微生物数量变化及分析2.3.5 菌种初步鉴定结果第3章 稻花香酿酒大曲理化指标分析3.1 前言3.2 测定方法3.2.1 水分测定方法3.2.2 酸度测定方法3.2.3 液化力测定方法3.2.4 糖化力测定方法3.2.5 粗淀粉测定方法3.3 结果与分析3.3.1 水分测定结果与分析3.3.2 酸度测定结果与分析3.3.3 液化力、糖化力测定结果与分析3.3.4 粗淀粉测定结果与分析第4章 稻花香酿酒大曲原核微生物16SrDNA 系统发育分析4.1 材料与方法4.1.1 试验样品4.1.2 样品总DNA 提取4.1.3 16SrDNA 基因PCR 扩增4.1.4 PCR 产物确认4.1.5 PCR 产物纯化4.1.6 DGGE 操作步骤4.1.7 PCR 产物的变性梯度凝胶电泳4.1.8 条带的回收及测序4.2 结果与分析4.2.1 总DNA 的提取4.2.2 16SrDNA PCR 产物分析4.2.3 DGGE 图谱分析4.2.4 克隆结果的快速检测4.2.5 系统发育分析第5章 稻花香酿酒大曲真核微生物18SrDNA 系统发育分析5.1 材料与方法5.1.1 试验样品5.1.2 样品总DNA 提取5.1.3 16SrDNA 基因PCR 扩增5.1.4 PCR 产物确认5.1.5 PCR 产物纯化5.1.6 PCR 产物的变性梯度凝胶电泳5.1.7 条带的回收及测序5.2 结果与分析5.2.1 总DNA 的提取5.2.2 18SrDNA PCR 产物分析5.2.3 DGGE 图谱分析5.2.4 克隆结果的快速检测5.2.5 系统发育分析第6章 结论与展望6.1 结论6.2 展望参考文献致谢附录1
相关论文文献
标签：大曲论文; 微生物种群结构论文; 系统发育分析论文;
