刺蒺藜、染料木素对大鼠卵巢发育的影响

论文摘要

研究目的:研究刺蒺藜对大鼠卵泡发育及卵母细胞凋亡的影响及其相关调控机制。材料与方法:用刺蒺藜对出生后1-4天（d）大鼠腹腔注射（20mg/（kg.d））,分别取出生后2d,4d龄新生鼠卵巢,对受孕11.5天大鼠进行灌胃（40mg/（kg.d））直至生产,分别取出生后1d,2d,4d龄新生鼠卵巢,所取卵巢经固定、脱水、包埋后切片,应用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察刺蒺藜对大鼠卵泡发育的影响,用末端脱氧核苷酰基转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL）观察刺蒺藜对大鼠早期卵泡凋亡的影响。用免疫组化方法观察FOXO3、MnSOD2、Bim、p27和Bcl-xl在卵巢组织中的表达情况。并用刺蒺藜对3和10月龄大鼠进行灌胃（40mg/（kg.d））,连续用药4周后处死,取双侧卵巢,用HE染色观察不同发育阶段卵泡比例,同时对9-10月龄大鼠行阴道涂片,观察其动情周期变化,连续6周。结果:结果显示1,2,4d龄的大鼠卵巢中,刺蒺藜处理组中的裸露卵母细胞比例都低于对照组;在1,2d龄的大鼠卵巢中,刺蒺藜处理组的原始卵泡比例都增高,但初级卵泡变化不明显。在4d龄的大鼠卵巢中原始卵泡的比例降低而初级卵泡和次级卵泡的比例升高。刺蒺藜处理的各年龄组的新生鼠卵巢中,TUNEL阳性的卵母细胞的比例都低于相应的对照组,FOXO3a、p27和Bim阳性的卵母细胞的比例低于相应的对照组,而MnSOD2和Bcl-xl阳性的卵母细胞比例都高于相应的对照组。3月龄大鼠刺蒺藜灌胃组与对照组相比原始卵泡和闭锁卵泡的比率减少了,但窦状卵泡和黄体却增多了。10月龄大鼠刺蒺藜灌胃组中闭锁卵泡和原始卵泡的比例高于对照组,窦状卵泡的比例减少。且绝大多数刺蒺藜灌胃组中的大鼠维持正常的动情周期（4-6d）,对照组大鼠的动情周期逐渐转变成不规则或延长（4-12d）。结论:刺蒺藜可以加速大鼠卵母细胞巢破裂,促进卵泡的发育,减少卵母细胞的凋亡,抑制从出生到早期老年大鼠卵巢中卵母细胞凋亡和卵泡闭锁及推迟围绝经期的来临。刺蒺藜抑制卵母细胞凋亡的可能是通过促进MnSOD2和Bcl-xl蛋白的表达,抑制FOXO3a, p27和Bim蛋白的表达,刺蒺藜对雌性哺乳动物的生育繁殖有重要的意义。目的:探讨染料木素对中年、早期老年大鼠卵泡发育的影响。方法:用染料木素对4和10月龄大鼠进行灌胃（160mg/（kg.d））,连续用药4周后处死,分别取染料木素灌胃组和对照组大鼠双侧卵巢,用苏木素-伊红（hematoxylin-eoxin, HE）染色观察不同发育阶段卵泡比例,同时对9-10月龄大鼠行阴道涂片,观察其动情周期变化,连续6周。结果:在染料木素灌胃组4月龄大鼠卵巢内原始卵泡、次级卵泡的比例升高,窦状卵泡、闭锁卵泡的比例下降;在染料木素灌胃组的10月龄大鼠卵巢内原始卵泡、次级卵泡的比例升高,闭锁卵泡的比例下降,且灌胃组的10月龄大鼠维持着规则的动情周期。结论:染料木素能延迟中年、早期老年期大鼠卵巢内原始卵泡发育启动,抑制各级卵泡闭锁,而可能有益于延长卵巢的生殖寿命。

论文目录

第一部分

摘要

Abstract

第一章前言

第二章材料方法

第三章实验结果

第四章讨论

第五章结论

参考文献

第二部分

摘要