酸枣仁提取分离新工艺及成分分析研究

论文摘要

本研究采用多种生产技术分别提取分离酸枣仁脂肪油和皂苷两大类有效成分,探索酸枣仁提取分离新工艺,并通过过程优化确定最佳工艺条件。此外,本研究还全面分析测定酸枣仁油的化学成分及理化特性,并建立酸枣仁皂苷含量测定的高效液相色谱法,以达到深入开发酸枣仁药材的目的。本研究采用超临界二氧化碳萃取技术提取酸枣仁油,并依次通过单因素试验和正交试验设计,考察压力、温度、粉末粒度及萃取时间四个因素对提取率的影响,探索超临界萃取酸枣仁油新工艺。结果显示最佳工艺条件为：粉末粒度（60mesh）、压力（30 MPa）、温度（45℃）、萃取时间（100 min）,在此条件下,酸枣仁油提取率高达31.1%,同时考虑到超临界萃取技术具有节能环保等优点,因此认为该技术更加适用于酸枣仁油的提取。本研究对超临界二氧化碳萃取得到的酸枣仁油进行化学成分（脂肪酸成分及非皂化成分）分析及理化性质（酸值、碘值、皂化值、酯值及过氧化值）测定,深入研究该天然产物的本质特征。GC-MS结果显示酸枣仁油脂肪酸成分以9-十八烯酸和9,12-十八碳二烯酸为主,而其非皂化成分则以β-谷甾醇和角鲨烯含量最多,此外酸枣仁油理化参数则从多个方面反映酸枣仁油的整体特征。这些基本信息的获得对酸枣仁油质控指标的建立和药理作用的深入研究提供了充足的数据支持和坚实的理论依据。本研究首次采用三效罐组式逆流提取技术提取酸枣仁皂苷,并通过正交试验设计考察溶剂种类及倍量、提取温度及时间四个因素对提取结果的影响,以优化最佳提取工艺。最佳工艺确定为：提取溶剂（70%乙醇）、提取温度（70℃）、提取时间（30 min）、溶剂倍量（8 mL/g）。在此条件下,酸枣仁皂苷含量高达0.901 mg/g。此外,通过与热回流提取技术在提取效果及能量、时间、溶剂消耗等方面的比较,三效罐组式逆流提取技术高效、节能等优点得以证实,同时也预示着该技术在医药行业的广泛应用前景。本研究首次以酸枣仁皂苷A和皂苷B的含量为双指标,探索D-101大孔树脂纯化酸枣仁皂苷的新工艺,确定最佳纯化工艺为：吸附流速为8 BV/h；洗脱流速为4 BV/h；蒸馏水和70%乙醇各3 BV洗脱,收集70%乙醇洗脱部位。在此条件下,酸枣仁皂苷A、B的总洗脱率均达到90%以上,精制率均达到650%以上。最终产品中酸枣仁皂苷A和皂苷B的总含量平均达到7.3%,其中皂苷A的含量达到5.3%。综上所述,本研究全面而深入的研究了酸枣仁中脂肪油和皂苷两大类有效成分,在实际生产方面,探索出提取纯化这两类有效成分的三条效果显著的新工艺；在理论研究方面,分析测定了酸枣仁油的化学成分及理化性质,建立了同时测定酸枣仁皂苷A和皂苷B含量的高效液相色谱法,为中药酸枣仁的综合开发提供了生产参数及理论依据。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语
• 目次
• 绪论
• 1 酸枣仁油超临界萃取工艺研究
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 超临界二氧化碳萃取酸枣仁油
• 1.2.1.1 超临界二氧化碳萃取操作步骤
• 1.2.1.2 单因素试验设计
• 1.2.1.3 正交试验设计
• 1.2.1.4 验证性试验
• 1.3 试验结果及分析
• 1.3.1 单因素试验结果及分析
• 1.3.1.1 萃取时间的影响
• 1.3.1.2 萃取压力的影响
• 1.3.1.3 萃取温度的影响
• 1.3.1.4 粉末粒度的影响
• 1.3.2 正交试验结果及分析
• 1.3.3 验证性试验结果及分析
• 1.3.3.1 验证性试验-1
• 1.3.3.2 验证性试验-2
• 1.4 试验结论
• 2 酸枣仁油化学成分分析及理化性质测定
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 酸枣仁油脂肪酸成分分析
• 2.2.1.1 甲酯化条件
• 2.2.1.2 GC-MS条件
• 2.2.2 酸枣仁非皂化成分分析
• 2.2.2.1 皂化条件
• 2.2.2.2 GC-MS条件
• 2.2.3 酸枣仁油理化性质测定
• 2.3 试验结果及分析
• 2.3.1 酸枣仁油脂肪酸成分结果
• 2.3.2 酸枣仁油非皂化成分分析结果
• 2.3.3 酸枣仁油理化性质测定结果
• 2.4 试验结论
• 3 酸枣仁皂苷逆流提取工艺研究
• 3.1 试验材料
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 三效逆流提取酸枣仁皂苷
• 3.2.1.1 三效逆流提取操作步骤
• 3.2.1.2 三效逆流提取正交试验设计
• 3.2.2 热回流提取酸枣仁皂苷
• 3.2.3 HPLC测定酸枣仁皂苷含量
• 3.2.3.1 对照液制备
• 3.2.3.2 样品预处理
• 3.2.3.3 色谱条件
• 3.2.3.4 标准曲线
• 3.3 试验结果及分析
• 3.3.1 三效逆流提取工艺优化结果及分析
• 3.3.2 三效逆流提取与热回流提取结果比较及分析
• 3.4 试验结论
• 4 酸枣仁皂苷大孔树脂纯化工艺研究
• 4.1 试验材料
• 4.2 试验方法及结果
• 4.2.1 HPLC-ELSD测定皂苷含量
• 4.2.1.1 色谱条件
• 4.2.1.2 样品液制备
• 4.2.1.3 标准曲线
• 4.2.1.4 精密度试验
• 4.2.1.5 稳定性试验
• 4.2.1.6 重复性试验
• 4.2.1.7 加样回收率试验
• 4.2.2 上样液的指标成分测定
• 4.2.3 大孔树脂工艺考察
• 4.2.3.1 大孔树脂种类的选择
• 4.2.3.2 大孔树脂预处理
• 4.2.3.3 吸附流速及洗脱流速考察
• 4.2.3.4 洗脱剂种类及用量考察
• 4.2.3.5 验证性试验
• 4.2.3.6 D-101大孔树脂重复使用次数考察
• 4.2.3.7 放大性试验
• 4.3 试验结论
• 总结和展望
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 作者简介及其科研成果