阿努达日1王波2（通讯作者）
1.内蒙古民族大学内蒙古通辽028000，2.内蒙古林业总医院内蒙古牙克石022150
摘要：目的：建立蒙古国健康成年人血清肿瘤标志物AFP、CEA的临床实验室生物参考区间。比较不同年龄分组蒙古健康人群肿瘤标志物AFP、CEA的浓度水平差异，分析并明确年龄与肿瘤标志物含量的相关性。方法：通过健康咨询和体检，筛选出1256例蒙古健康成人，男性572人，女性684人。按年龄分为六组：第一组（18-30岁）、第二组（31-40岁）、第三组（41-50岁）、第四组（51-60岁）、第五组（61-70岁）、第六组（>70岁），采用电化学发光法进行血清肿瘤标志物AFP、CEA的检测，以±1.96SD确立肿瘤标志物的参考区间；采用t检验分析AFP、CEA是否存在性别差异；利用单因素方差分析不同年龄组AFP、CEA是否存在显著性差异，并描述肿瘤标志物随年龄变化的规律。结果：蒙古健康成人肿瘤标志物参考区间为：AFP，男：0-5.10ng/ml、女：0-4.67ng/ml；CEA，男：0-3.61ng/ml、女：0-2.82ng/ml；血清AFP和CEA水平男性高于女性（P<0.05）。血清AFP、CEA水平与年龄呈正相关。结论：通过本研究建立了蒙古健康成人肿瘤标志物（AFP、CEA）临床实验室生物参考区间。发现不同性别，不同年龄蒙古人群的肿瘤标志物水平存在差异，并将此研究成果应用于蒙古国正常人群癌症初筛体检及临床辅助诊断检验报告，为相关癌症疾病的诊疗提供了理论依据。
关键词：蒙古人；肿瘤标志物；参考区间
DeterminingtheSerumLevelofTumorMarkersAFPandCEAinMongolianPeoplefortheReferenceValueandComparisonBetweenDifferentAges
SenjimAnudari1，，WangBo2*
（1.InnerMongoliaUniversityforNationalities，Tongliao028000，2.InnerMongoliaForestryGeneralHospital，Yakeshi022150）
AbstractObjective：ToestablishbiologicreferencevaluesforserumtumormarkersAFPandCEAofMongolianhealthyadultsinclinicallaboratories.TocomparethedifferenceinthelevelsoftumormarkersAFPandCEAofhealthyMongolianpopulationatdifferentages，analyzeanddefinethecorrelationbetweenageandtumormarkers.Method：Byadoptinghealthconsultationandcheckup，wescreened1256Mongolianhealthyadults，including572malesand684females.Theywerethenpidedintosixgroupsaccordingtoage：Group1（18-30yearsold），Group2（31-40yearsold），Group3（41-50yearsold），Group4（51-60yearsold），Group5（61-70yearsold）andGroup6（>70yearsold）.ElectrochemiluminescencewasappliedtodetectserumtumormarkersAFPandCEA，thereferenceintervalsofwhichwasestablishedwith±1.96SD.TtestwasusedtoanalyzewhethergenderdifferencesexistedinAFP，CEA.Thenone-wayvariancewasadoptedtoanalyzewhethersignificantdifferencesoccurredtoAFP，CEAindifferentagegroups.Inaddition，theruleoftumormarkerswasnotedinaccordancewithages.Results：ThereferencevaluesoftumormarkersforMongolianhealthyadultswas：AFP，male：0-5.10ng/ml，female：0-4.67ng/ml；CEA，male：0-3.61ng/ml，female：0-2.82ng/ml.ThelevelsofAFPandCEAinseruminmaleswerehigherthanthoseoffemales（P<0.05）.ThelevelsofAFPandCEAinserumwerepositivelycorrelatedwithage.Conclusion：ThisstudyestablishedthereferenceintervalsoftumormarkersforMongolianhealthyadults（AFP，CEA）inclinicallaboratories.WefounddifferencesoccurredtothetumormarkersinMongoliansofdifferentgendersandages.Inaddition，weappliedthisresulttotheinitialscreeningcheckupandclinicaldiagnostictestreportfornormalpopulationinMongolia，providingatheoreticalbasisforthediagnosisandtreatmentofrelatedcancerdiseases.
Keywords：MongolianPeople；TumorMarker；ReferenceValue
1引言
肿瘤标志物是指存在于血液，体液和组织中可检测到的与肿瘤的发生，发展有关的物质。他们主要由蛋白质组成，且用于恶性肿瘤和良性肿瘤的确诊和诊断[1]。与本研究相关的肿瘤标志物分别为：（1）AFP：是一种酸性糖蛋白，存在胎儿发育的早期肝脏和卵黄囊中，胎儿出生后不久便逐渐消失。正常人含量极低，当含量明显升高时，有助于原发性肝癌的诊断。（2）CEA：癌胚抗原最初发现于结肠癌及胎儿肠组织中，血清CEA升高，除见于消化道癌外，也见于其他系统。连续监测癌胚抗原水平可用于肿瘤治疗的疗效观察及预后判断。一般病情好转时血清癌胚抗原水平下降，病情发展时升高。
医学实验室检测肿瘤标记物的方法包括放射免疫分析试验、酶联免疫吸附试验、荧光免疫分析试验以及化学发光技术。其中电化学发光免疫分析技术是目前检测肿瘤标记物最先进的免疫分析技术，它是将电化学发光和免疫检测这两种分析方法，与生物素、亲和素以及固相磁微珠相结合融于一体的新技术。排除了放射免疫分析试验中的辐射污染、酶联免疫吸附试验中的前后带效应和荧光免疫分析试验中试剂的毒性危害，是一种准确度、特异性好，自动化程度高的检测方法，己广泛应用于的临床实验室，对良性及恶性肿瘤可进行早期辅助诊断和鉴别诊断。
由于种族和民族的不同，肿瘤标志物的含量呈现典型和独特的区别，所以每个国家和地区，甚至每个医学实验室均有必要根据各自的测定方法确定适用于本地和本民族的癌症标志物含量和参考区间。研究目的在于建立蒙古健康成年人血清肿瘤标志物AFP、CEA的临床实验室生物参考区间。通过比较不同年龄分组蒙古健康人群肿瘤标志物AFP、CEA的浓度水平差异，分析并明确年龄与肿瘤标志物含量的相关性。根据年龄和性别差异，建立适合于蒙古健康成人的肿瘤标志物生物参考区间，并将此研究成果应用于蒙古国正常人群体检及临床辅助诊断，为蒙古人群相关癌症疾病的诊断提供可靠的理论依据。
2材料与方法
2.1研究对象
临床研究开展前均征求了受试者（体检人群）的知情同意。
研究对象为2017年1-10月前来蒙古国INTERMED医院体检中心进行体检人群，结合健康咨询和体格检查的结果，按照入选和排除标准筛选出符合要求的研究对象共1256人，年龄范围为18-86岁之间，其中男性572人，女性684人，均为蒙古国当地居民。
2.2纳入标准
本研究入选标准和排除标准参考美国临床实验室标准协会（CLSI/NCCLS）C28-A3文件制定。入选标准是能够独立配合医师完成各项检查，体重正常，无家族遗传病史的成年男女（女性不在妊娠期及哺乳期），近期无醉酒行为（＞30g/天），没有用药、手术、输血及住院治疗，血压正常，体格及内外科检查正常，无心脑血管、肝肾、肺脏、胰腺等机体重要器官的器质性疾患和功能障碍的表现，心电图、B超及胸片检查正常者，根据病史及相关资料排除肿瘤的健康体检人群，以上人群作为入选人群纳入到研究对象中。
临床实验室排除标准：血红蛋白（Hb）＜110g/L，白细胞（WBC）＜3×109或＞12×109，血小板（PLT）＜100×109，白蛋白（ALB）＜32g/L，空腹血糖（GLU）≥7.0mmol/L，甘油三酯（TG）≥2.26mmol/L，总胆固醇（CHO）≥6.22mmol/L，乙型肝炎病毒表面抗原、丙型肝炎病毒抗体、人免疫缺陷病毒抗体阳性，尿常规干化学检测异常者。
2.3样本采集
研究对象采血前一晚8：00以后禁食水，晨起抽血时采取坐姿，止血带捆绑时间应控制在1分钟以内，使用红盖（含分离胶）真空采血管采集空腹静脉血3-5mL。采集后待样本彻底凝固（约15分钟），3500转15分钟离心处理，检测前工作人员要仔细核对样本管内血清中是否含有纤维蛋白，避免加样错误，影响检测结果。溶血样本视为不合格样本不予检测，重度乳糜样本需行14000转10分钟离心后上机检测。
2.4统计学处理
利用SPSS22.0进行数据处理及统计分析，符合正态分布的计量资料采用±SD来表示，两样本均数的比较用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。采用Excel2010进行、SD统计，剔除离群值（>±3SD）后重新计算、SD，以±1.96SD来确立参考区间的上下限值。
3结果
3.1AFP的参考区间及不同年龄结果比较
不同性别血清AFP测定结果之间比较差异有统计学差异（P=0.026），男性平均含量高于女性见表2-1，按照±1.96SD计算参考区间，健康男性的AFP参考区间为0-5.1ng/ml，女性的参考区间为0-4.67ng/ml。按年龄将研究对象分为六组见表2-2：第一组18-30岁的含量为2.4±1.07ng/ml，第二组31-40岁的含量为2.6±1.07ng/ml，第三组41-50岁的含量为2.8±1.13ng/ml，第四组51-60岁的含量为2.8±0.99ng/ml，第五组61-70岁的含量为2.9±1.37ng/ml，第六组70以上岁的含量为3.1±1.05ng/ml，单因素方差分析显示组间差异均有统计学意义（P＜0.05），AFP含量与年龄呈正相关。
4讨论
肿瘤标志物是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身产生或者是机体对肿瘤细胞反应而产生的，能够反应肿瘤存在和生长的一类物质，它包括酶、癌基因产物、激素及蛋白质等。AFP是胎儿时期血清基本蛋白质，分子量为66000～72000D，它是含有3～5%的碳水化合物的603氨基酸构成的单链糖蛋白，负责人类AFP合成的基因位于第四染色体（4q11-22）[2-4]。AFP对于原发性肝癌的发现、诊断、确诊以及复查等具有极高的意义。世界各国进行的研究结果表明，可利用该标志物进行原发性肝癌的确诊。因此，该蛋白成为首个确诊肝癌的癌症标志物。甚至是产前检查筛查发现胎儿先天性发育异常，染色体异常等的重要指标之一[5]。那·尼玛多尔吉（1984）等的研究结果表明，对116个原发性肝癌患者进行AFP含量测定时，其中62.6%呈阳性；而对60名患有食道癌、肺癌、胃癌、子宫肿瘤以及其他部位肿瘤患者进行测定结果表明，仅有1名（患有畸胎瘤）呈阳性。
CEA是直肠癌和结肠癌的特异性标志物，与此同时也是最具有意义的肿瘤标志物，缺点是在肿瘤筛查中的阳性率比较低，主要是因为它的影响因素较多，过量吸烟、结肠息肉、胰腺炎等，均可以导致血清CEA升高。
本次研究结果显示，蒙古男性血清AFP和CEA含量明显高于女性，这可能与蒙古男性的饮食和生活习性有关，饮酒和吸烟史导致他们肝细胞轻度受损或消化系统功能紊乱，从而引起血清AFP和CEA含量高于同年龄正常女性。
正常体检人群中检测肿瘤标志物具有较高的临床应用价值，如何确定本实验室肿瘤标志物的正常参考区间对临床解释检验结果具有重要意义。本研究建立的蒙古健康成人肿瘤标志物参考区间为：AFP，男：0-5.10ng/ml、女：0-4.67ng/ml；CEA，男：0-3.61ng/ml、女：0-2.82ng/ml。结合着蒙古国当地人群特征，包括民族、生活饮食习惯、地域等，给临床癌症相关检测项目提供可靠的生物参考区间，使临床医生能够给出患者或健康体检者正确的诊断和治疗方案。
5结论
（1）本研究根据不同性别建立了蒙古国成人肿瘤标志物AFP、CEA的生物参考区间，并将其应用于蒙古国INTERMED医院临床实验室。
（2）研究显示蒙古成年男性血清AFP和CEA的水平高于女性，并且与年龄呈正相关。
（3）通过比较可见血清AFP、CEA参考区间明显低于试剂厂家提供的参考区间。
参考文献：
[1]Nyamdavaa.P.Cancermarkerstoberevealedintoserum，itssignificantofclinicalandepidemiology，MedicineofMongolia.1999；2（2）：17-20.
[2]McLeodJ，CookeNE.ThevitaminDbindingprotein，alpha-fetoprotein，albuminmultigenefamilydetectionoftranscriptsinmultipletissius.JBiolChem.1989；264：21760-21769.
[3]SipalaM，RuoslahtiE.Studiesofcarcino-fetalproteinsphysicalandchemicalpropertiesofhumanalpha-fetoproteinIns.J.Cancer.1975；7（2）：218-225.
[4]HarperME，DugaiczykA.Linkageoftheevolutionarilyrelatedserumalbuminandalpha-fetoproteingeneswithinq11-22ofhumanchromosomes.Am.J.Hum.Genet.1983；35（4）：565-572.
[5]BickDP，McCorkleD，StenleyWS，etalPrenataldiagnosis.1999；19（Lancet）：68-71.
第一作者：阿努达日，女，硕士在读，主要从事临床检验诊断学研究。