论文摘要
目的本实验的目的是在制备戊四氮点燃大鼠模型的基础上,观察厄多司坦在对致痫大鼠海马中超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力和及丙二醛（MDA）含量的变化以及神经元损伤的影响,研究厄多司坦清除自由基、保护神经元的作用,探讨其抗癫痫作用的机理以及癫痫大鼠神经元凋亡与氧化应激的关系。方法1.实验动物及分组:健康成年雄性SD大鼠,随机分为3组:戊四氮组（n=10）,厄多司坦组（n=10）和对照组（n=10）。2.癫痫模型的制备及干预:采用Dihel点燃癫痫模型制作方法,对戊四氮组和厄多司坦组大鼠每日一次腹腔注射戊四氮50mg/kg制作癫痫点燃模型,厄多司坦组于点燃前用厄多司坦50mg/kg腹腔注射进行干预处理。模型动物连续3次达到Ⅳ-Ⅴ级发作后观察30分钟,记录首次发作潜伏期与发作时间。3.取材及实验测定:达到点燃标准后全体模型实验动物被断头取脑,迅速取出海马组织,采用比色法检测大鼠海马SOD、GSH-Px活力以及MDA含量。采用TUNEL染色法及HE染色法观察大鼠海马神经元损伤情况。结果1.按照Racine的标准,戊四氮组与厄多司坦组动物均达到点燃,对照组无癫痫发作。戊四氮组中一只动物死亡,从本实验排除。厄多司坦组大鼠发作时间较戊四氮组显著减少,（P＜0.05）。两组首次发作潜伏期无显著性差异,（P＞0.05）。2.戊四氮组和厄多司坦组大鼠海马SOD活力与正常组相比较均显著降低:戊四氮组与对照组间具有显著性差异,（P＜0.01）;厄多司坦组与对照组间也具有显著性差异,（P＜0.05）。厄多司坦组较戊四氮组SOD活力显著升高,（P＜0.05）。戊四氮组与对照组比较,MDA含量显著升高,（P＜0.01）,厄多司坦组与对照组比较无显著差别,（P＞0.05）。戊四氮组GSH-Px活力显著低于对照组和厄多司坦组,（P＜0.01）,厄多司坦组与对照组之间无显著性差异,（P＞0.05）。3.HE染色结果:对照组大鼠海马神经元排列紧密,边缘清晰,胞浆透明,细胞核形态正常,未见嗜酸性神经元。厄多司坦组大鼠海马神经元排列较紧密,可见有散在的神经元嗜酸性改变。戊四氮组大鼠海马神经元排列散乱、胞体皱缩胞浆红染及核固缩。厄多司坦组较戊四氮组嗜酸性神经元显著减少,（P＜0.01）。TUNEL染色结果:与对照组相比,厄多司坦组和戊四氮组TUNEL阳性细胞均显著增多,（P＜0.01）,厄多司坦组较戊四氮组TUNEL阳性细胞显著减少,（P＜0.01）。4.癫痫组（戊四氮组与厄多司坦组）大鼠海马凋亡神经元数量与SOD活力和MDA含量之间的相关性分析,凋亡神经元数量与SOD活力呈负相关,（r=-0.482,P＜0.05）,凋亡神经元数量与MDA含量呈正相关（r=0.875,P＜0.01）。结论厄多司坦能减轻癫痫大鼠海马氧化应激水平。厄多司坦预处理不能完全防止癫痫发生,但可以减少发作时间,减轻神经元损伤程度,提示其神经保护作用的存在。厄多司坦可能通过减轻癫痫发生时氧化应激水平起到减轻神经元损伤,保护神经的作用。癫痫发作后神经元凋亡水平与SOD活力呈负相关,与MDA含量呈正相关。