论文摘要
本研究通过RT-PCR和3′RACE方法,克隆了犬IgM恒定区全长基因（分泌型、跨膜型）;在此基础上,结合已知的其它Ig重链恒定区基因信息,利用5′RACE方法,研究了犬Ig重链、轻链以及犬瘟热病毒感染下可变区基因特征:来自犬四种Ig（IgM、IgD、IgG、IgA）重链可变区基因的85个VH序列属于两个家族,V、D、J重排过程中偏爱VH1家族;与其它哺乳动物相比,犬重链可变区突变指数最高;D片断长度和碱基变异较大,且有N核酸和P核酸插入。犬瘟热病毒感染下,IgM可变区的38个VH序列核苷酸同源性>90%,多克隆共用一个VH片断和D片断,表明特定抗原使抗体产生趋向单一。32个Vλ基因属于5个家族,Vλ的多家族性增加了犬Ig多样性的产生,轻链可变区的变异程度明显高于重链,说明轻链在Ig多样性的形成中可能具有重要作用。36个Vκ转录本属于1个家族。Vλ家族种间同源性高于种内同源性,说明这些家族在胚系Vλ基因形成前已经存在,而较保守的Vκ家族是进化过程中基因复制的结果。通过Real-time PCR技术分析了三种Ig在正常犬和免疫犬不同组织中的表达规律。三种Ig在脾脏、淋巴结等免疫器官中大量表达,其中IgG在病变组织呈高表达,IgA的表达量在免疫状态下小肠组织明显升高。在免疫和非免疫状态下,IgD在淋巴器官外的其它组织中表达量未见明显变化。本研究将为了解犬免疫功能实现和抗体多样性机制提供分子生物学依据。
论文目录
提要引言第一篇 文献综述第一章 免疫球蛋白的生物学特性1 免疫球蛋白分子的基本结构2 免疫球蛋白的基因结构3 免疫球蛋白基因的重排4 免疫球蛋白基因表达的调控第二章 免疫球蛋白多样性产生的机制1 转换重组2 基因转换3 体细胞高突变4 胚系中众多的V、D、J 基因片段不同的取用和重排5 V（D）J 连接的多样性6 轻、重链不同组合第三章 不同动物免疫球蛋白可变区多样性的特点1 胎盘类哺乳动物（placental mammals）可变区多样性2 有袋类哺乳动物（marsupial）的重链V 区多样性3 单孔类哺乳动物（monotremes）的重链V 区多样性4 禽类的重链V 区多样性5 鱼类的重链V 区多样性第四章 实时荧光定量PCR 技术的原理及应用1 实时荧光定量PCR 技术的原理2 实时荧光定量PCR 技术的方法3 实时荧光定量PCR 技术的定量方法4 实时荧光定量PCR 技术的应用5 存在的问题及应用前景第二篇 研究内容第一章 犬IgM 重链恒定区基因的克隆与序列分析1 材料与方法2 结果3 讨论4 小结第二章 犬Ig 重链可变区基因的克隆及多样性研究1 材料与方法2 结果3 讨论4 小结第三章 犬瘟热病毒感染下V 区的分子特征1 材料与方法2 结果3 讨论4 小结第四章 犬两型轻链恒定区基因的克隆及可变区多样性的研究1 材料与方法2 结果3 讨论4 小结第五章 IgG、IgA 及IgD 在正常犬和免疫犬的组织表达规律研究1 材料与方法2 结果3 讨论4 小结结论参考文献攻读博士期间发表及待发表的学术论文中文摘要英文摘要致谢导师简介作者简介
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标签：免疫球蛋白论文; 可变区论文; 多样性论文; 实时荧光定量论文;
