胰岛素—低分子季铵化壳聚糖复合物的制备、理化性质及其生物活性研究

论文摘要

胰岛素（Insulin,Ins）作为治疗糖尿病的首选药物,临床应用已有70多年的历史。由于胰岛素是多肽类药物,易被胃肠道蛋白酶水解破坏,因而口服无效,所以,临床多年来一直是通过注射给药。但长期频繁使用注射液也会对患者产生诸多不良反应,如过敏、组织纤维化等,这给患者带来了极大的身体、心理和经济负担。因此,研究非注射用胰岛素及其制剂是当今国内外医药界共同关注的课题。 本课题选择LTMC,利用静电作用对胰岛素的结构进行修饰,制备非注射用胰岛素。该修饰条件温和,工艺简单,产率高,修饰后的胰岛素生物活性不受影响。用LTMC作为胰岛素修饰剂,可起到保护胰岛素和促进胰岛素吸收的作用。另外,本文通过舌下和口服给药研究证实其降血糖效果显著。因此,经修饰的胰岛素适用于非注射给药及其制剂的研究。 本课题研究内容、方法及结果主要有以下几个方面。 1 LTMC的制备及理化性质 在前期研究工作的基础上,对制备LTMC的部分工艺进行了改进,由CTS制备LTMC,并对其理化性质进行测定。工艺改进后制备的LTMC样品,其黏均分子量约为7KDa,季铵化度为46.64%,分子量分布均一,而且纯度较高,并通过紫外和红外初步确定了LTMC的季铵基团及其特征。 2 Ins-LTMC制备工艺研究 根据质量比,利用结合沉淀法筛选制备Ins-LTMC的Ins及LTMC的用量和最佳pH等,并通过正交试验设计研究温度、时间和溶液体积对Ins-LTMC制备的影响。初步确定了生产工艺路线,即在pH6.5溶液中,LTMC的用量为Ins的1～

论文目录

• 符号说明
• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1 胰岛素的性质
• 2 非注射用胰岛素及其新剂型的研究进展
• 2.1 口服给药系统
• 2.2 肺部给药系统
• 2.3 口腔给药系统
• 2.4 鼻腔给药系统
• 2.5 经皮给药系统
• 2.6 直肠给药系统
• 2.7 眼部给药系统
• 2.8 植入给药系统
• 3 壳聚糖及TMC在多肽类药物给药系统中的作用研究
• 3.1 壳聚糖及TMC的性质
• 3.2 壳聚糖及TMC的促吸收作用
• 3.3 壳聚糖及TMC的黏膜黏附性及毒性试验
• 3.4 壳聚糖及TMC在胰岛素制剂中的应用
• 第二章 LTMC的制备及理化性质研究
• 1 材料
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 2 方法和结果
• 2.1 LTMC的制备工艺流程图
• 2.2 操作方法
• 2.2.1 LCTS的制备
• 2.2.2 LTMC的制备
• 2.3 LTMC的理化性质研究
• 2.3.1 性状及溶解性
• 2.3.2 黏均分子量的测定
• 2.3.3 分子量的分布
• 2.3.4 季铵化度的测定
• 2.3.5 紫外扫描
• 2.3.6 红外扫描
• 3 讨论
• 第三章 Ins-LTMC的制备工艺研究
• 1 材料
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 2 方法和结果
• 2.1 Ins-LTMC制备条件的选择
• 2.1.1 LTMC用量的选择
• 2.1.2 pH值的选择
• 2.1.3 温度、溶液体积、结合时间的影响
• 2.2 制备工艺流程图
• 2.3 操作方法
• 3 讨论
• 第四章 Ins-LTMC理化性质的研究
• 1 材料
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 2 方法和结果
• 2.1 外观性状
• 2.2 溶解度
• 2.3 修饰物中LTMC的百分含量测定
• 2.4 Ins-LTMC中胰岛素的含量测定
• 2.5 等电聚焦电泳
• 2.6 SDS-聚丙稀酰胺凝胶电泳
• 2.7 葡聚糖凝胶G-75过滤层析
• 2.8 紫外扫描
• 2.9 红外扫描
• 3 讨论
• 第五章 Ins-LTMC的生物效价测定
• 1 材料
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 动物
• 2 方法
• 2.1 标准品溶液的配制
• 2.2 标准品稀释液的配制
• 2.3 Ins-LTMC溶液的配制
• 2.4 Ins-LTMC稀释液的配制
• 2.5 动物分组
• 2.6 给药及血糖测定
• 2.7 数据处理
• 3 结果
• 4 讨论
• 第六章 Ins-LTMC舌下给药降糖效果的研究
• 1 材料
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 动物
• 2 方法和结果
• 2.1 药物的制备
• 2.2 动物分组
• 2.3 给药及血样制备
• 2.4 数据处理
• 2.5 药理相对生物利用度（Fp）的计算
• 3 讨论
• 第七章 Ins-LTMC口服降糖效果研究及LTMC对胰蛋白酶活性的影响
• 1 材料
• 1.1 试剂
• 1.2 仪器
• 1.3 动物
• 2 方法和结果
• 2.1 Ins-LTMC修饰物口服降糖效果研究
• 2.1.1 Ins-LTMC和胰岛素溶液的配制
• 2.1.2 实验动物分组
• 2.1.3 给药方法
• 2.1.4 血糖测定及降糖效果测定
• 2.1.5 数据处理
• 2.2 不同浓度LTMC对胰蛋白酶活性的影响
• 2.2.1 底物溶液的配备
• 2.2.2 供试品溶液的配备
• 2.2.3 LTMC溶液的配制
• 2.2.4 测定法
• 3 讨论
• 第八章 课题总结与展望
• 1 课题总结
• 2 研究主要解决的问题及其创新
• 3 展望
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表的论文