灰树花菌质多糖分离纯化及其降血糖功能活性研究

灰树花菌质多糖分离纯化及其降血糖功能活性研究

论文摘要

灰树花(Grifola frondosa)作为一种珍贵的食药用菌,当前已经备受科学家的关注,其菌丝体中的生物活性成分多糖更是科学研究的焦点。本文研究了对灰树花液态发酵的碳氮源调控,灰树花液态发酵培养条件分析和多糖提取条件分析,并对灰树花菌丝体多糖进行了降血糖和结构研究。研究结果如下:1.以糯米粉,马铃薯淀粉、玉米粉、蔗糖、麦芽糖和可溶性淀粉为碳源时,可以得出糯米粉作为碳源时菌丝体和多糖产量较优;在以氯化铵、硫酸铵、尿素、酵母粉、麸皮作为氮源时,可以得出在以麸皮为氮源时,菌丝体和多糖产量均为最高。2.以葡萄糖、蛋白胨、VitB1、KH2PO4为考察因素时,以胞外多糖为考察指标,得到的最佳液态发酵条件为:葡萄糖30g/L,蛋白胨5g/L,VitB1 1.5mg/L,KH2PO41.5g/L,此时得到灰树花胞外多糖可达32.13mg/100mL。3.以浸提时间、料液比、微波功率、微波时间为考察因素时,以提出的粗多糖为考察指标,得出最佳提取条件为:微波功率450W,微波时间4min,浸提时间4.5h,料液比1:45,此时,多糖提取率最高,多糖得率可达3.21%。4.通过Alloxan建立小鼠高血糖症模型,探讨了灰树花粗多糖的体内降血糖活性,结果表明,各处理组能改善糖尿病小鼠体重减轻、多食、多饮、多尿的“三多一少”病症;与高血糖模型组比较,GFP低剂量组与中药复方高剂量组具有显著的降血糖活性(P<0.05)。其中,中药复方高剂量组处理的小鼠27天后,其血糖值下调至10.94 mmol/L,达到糖尿病诊断标准11.1mmol/L以下。5..GFP经DEAE Sephadex A-50柱层析分离纯化得到三个主要的多糖组分,分别命名为GFP1、GFP2和GFP3,并对GFP1和GFP2进行200-700nm波长扫描,确定其中蛋白、核酸和色素去除较为彻底,并对GFP1和GFP2进一步利用Sephadex G-200进行分离纯化,GFP1得到了单一吸收峰,证明其为单一多糖组分,运用红外光谱扫描和400M核磁共振氢谱研究了纯多糖GFP1的化学结构,表明GFP1具有多糖的特征。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 缩略语一览表
  • 第一章 绪论
  • 1.1 引言
  • 1.2 灰树花研究概况
  • 1.2.1 灰树花简介
  • 1.2.2 灰树花的栽培史
  • 1.2.3 灰树花的营养医学价值
  • 1.3 真菌多糖的提取分离纯化方法
  • 1.3.1 真菌多糖的提取方法
  • 1.3.2 真菌多糖的分离纯化方法
  • 1.4 真菌多糖分子结构鉴定
  • 1.4.1 真菌多糖纯度鉴定
  • 1.4.2 真菌多糖分子特征鉴定
  • 1.5 本项目研究的目的、意义和内容
  • 1.5.1 本项目研究的目的和意义
  • 1.5.2 本项目研究的内容
  • 参考文献
  • 第二章 灰树花液体发酵条件优化分析
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 试验材料
  • 2.1.2 主要仪器
  • 2.2 试验方法
  • 2.2.1 培养基配制
  • 2.2.2 液体发酵试验参数评价方法
  • 2.2.3 苯酚-浓硫酸法测定多糖含量测定方法
  • 2.2.4 灰树花液体发酵条件优化
  • 2.3 结果与分析
  • 2.3.1 不同碳氮源对灰树花液态发酵影响
  • 2.3.2 各因素对灰树花液体发酵影响
  • 2.4 结论与讨论
  • 参考文献
  • 第三章 灰树花菌丝体粗多糖提取条件优化
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 实验材料
  • 3.1.2 主要仪器
  • 3.1.3 实验方法
  • 3.2 结果与分析
  • 3.2.1 微波功率对多糖得率影响
  • 3.2.2 微波辐照处理时间对多糖的率影响
  • 3.2.3 浸提时间对多糖得率影响
  • 3.2.4 料液比对多糖得率影响
  • 3.2.5 灰树花菌丝体多糖提取正交试验结果
  • 3.3 结论与讨论
  • 参考文献
  • 第四章 灰树花多糖提取物的降血糖活性研究
  • 4.1 引言
  • 4.2 实验材料与实验仪器
  • 4.2.1 实验材料
  • 4.2.2 实验仪器
  • 4.3 实验方法与结果
  • 4.3.1 四氧嘧啶糖尿病小鼠造模方法及分组
  • 4.3.2 小鼠体重测定
  • 4.3.3 小鼠空腹血糖指标测定
  • 4.3.4 糖尿病小鼠糖耐量指标测定
  • 4.4 小结与讨论
  • 参考文献
  • 第五章 灰树花多糖的分离纯化及基本结构
  • 5.1 材料与方法
  • 5.1.1 实验材料
  • 5.1.2 主要仪器
  • 5.1.3 实验方法
  • 5.2 结果与讨论
  • 5.2.1 脱色效果分析
  • 5.2.2 柱层析纯化结果
  • 5.2.3 GFP1和GFP2进行200-700nm波长扫描
  • 5.2.4 Sephadex G-200柱层析纯化结果
  • 5.2.5 GFP1红外光谱扫描结果
  • 5.2.6 GFP1的1H NMR结果
  • 5.3 小结与讨论
  • 参考文献
  • 总结和展望
  • 本论文的特色和创新点
  • 致谢
  • 相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  ;  

    灰树花菌质多糖分离纯化及其降血糖功能活性研究
    下载Doc文档

    猜你喜欢