论文摘要
越桔（Vaccinium uliginosum L．）酒渣是果实酿酒初级利用后的工业废弃物，花色素是其中所含的生物活性成分之一。为探寻越桔酒渣综合利用的技术途径，实现资源深度开发，本文就越桔酒渣花色素的提取精制工艺、主要化学成分类型、抗氧化、抑制肿瘤及调节血压等方面展开研究。采用单因素比较和正交试验法，首先探讨花色素提取和精制的技术条件，越桔酒渣花色素提取的最佳条件为：室温条件，80％pH3．0乙醇作浸提剂，料液比1：40，提取2．5h；用HPD100大孔树脂对色素进行精制，树脂柱径高比1：10，花色素浓度0．5g/L，流速1mL／min为最佳吸附条件，色素吸附量可达到0．0987g／mL湿树脂；60％pH3．0乙醇作洗脱液，流速1mL／min，4．5倍柱体积的洗脱液条件下解析效果最佳，色素回收率达到95．48％；制取的花色素呈紫红色，色价为91．5，得率为3．00％。研究制取花色素理化性质表明，越桔酒渣花色素（Pigment from WildVaccinium uliginosum L．Wine Pomace，简称PVP）属花色苷类，为水溶性色素。采用高效液相法对PVP进行分析，初步确定PVP中含有槲皮素、杨梅素及异鼠李素等黄酮类化合物。体外抗氧化活性试验表明，PVP表现出很强的清除DPPH·和·O2-活性，IC50分别为10．69μg／mL和224．01μg／mL。同时，一定浓度的PVP可以抑制黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，简称XO）的活性。10μg／mL的PVP能够抑制600μMH2O2对牛主动脉内皮细胞（bovine aortic endothelial cells，简称BAECs）的过氧损伤，清除细胞内活性氧（Reactive Oxygen Species，简称ROS），改善内皮功能障碍。采用MTT法观察PVP体外对人鼻咽癌（CNE）、肾癌（786-O）及结肠癌（HCT-8）细胞增殖的抑制作用，结果显示：PVP抑制人鼻咽癌细胞（CNE）增殖的IC50为80．30 mg/L；对肾癌细胞（786-O）具有一定的抑制作用，300 mg/L为抑制细胞增殖的最高临界点，抑制率为68．43％；对人结肠癌细胞（HCT-8）增殖抑制的IC50为250．29mg/L。据报道肠道具有酶解花色苷成花色素的作用，肠道对花色素苷的吸收具有重要意义，因此对人结肠癌细胞（HCT-8）展开进一步的研究。研究采用Wright染色法、吖啶橙染色法观察PVP作用HCT-8后的细胞形态，结果发现HCT-8经PVP作用后，出现凋亡特征，细胞变小皱缩，核凝固，细胞膜破裂等；流式细胞仪观察PVP对细胞周期的影响，表明PVP下调G0／G1期细胞比例，减少HCT-8细胞有丝分裂和细胞分化，从而促进细胞凋亡。采用自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，简称SHR）为模型，每日定时灌胃一次PVP，连续4周，结果发现，高剂量PVP（150mg／kg·dbw）SHR大鼠饮水量显著增高，体重增长缓慢，血压显著降低，血清甘油三酯（TG）含量显著减少，但PVP对血清葡萄糖（Glu），总胆固醇（TC），高密度脂蛋白总胆固醇（HDL-C）和总抗氧化能力（T-AOC）无显著影响，提示PVP除具一定的降压作用外还具有调节血脂的潜在作用。蓝莓软胶囊（bluebeery soft capsulem，简称BSC）是以越桔酒渣提取物为主要成分的产品，搞清楚其生物学活性对于指导产业化生产具有重要意义。本文继续将SHR大鼠诱导成高血压高甘油三酯合并的动物模型，以研究BSC对血压和血脂的调节作用。研究参考文献方法，利用高脂高糖饲料喂养SHR大鼠，同时每日定时灌胃BSC一次，观察BSC对高甘油三酯SHR大鼠的影响。结果表明饲喂高脂高糖10周后，SHR大鼠血清TG水平显著升高，同时每日灌胃BSC不能预防SHR大鼠TG的升高，但低剂量的BSC（250mg／kg bw）可以使SHR大鼠血清TG的增长缓慢。BSC可以显著降低高甘油三酯SHR大鼠的血压，降幅接近10％，起到改善血压的作用；高剂量BSC（500g／kg bw）可以显著降低高甘油三酯SHR大鼠血清TC及游离脂肪酸（FFA）含量，提高血清HDL-C和肝脏肝酯酶（HL）含量；高低剂量的BSC都可以极显著减低肝脏丙二醛（MDA）含量，起到抗氧化的作用。综上所述，越桔酒渣提取物制成品具有一定的调节SHR大鼠血压和血脂功效。
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