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Tau和GR减轻I/R诱导的大鼠心肌氧化应激损伤机制研究

2020-12-10阅读(363)

Tau和GR减轻I/R诱导的大鼠心肌氧化应激损伤机制研究

论文摘要

目的：研究渐增再灌注（gradual reperfusion, GR）和牛磺酸（Taurine, Tau）对缺血再灌（I/R）诱导的大鼠离体心肌氧化损伤的保护作用,探讨该作用是否与Akt和Erk信号通路有关。方法：采用Langendorff离体心脏灌流法制备离体大鼠心肌缺血/再灌注模型。SD大鼠随机分为7组：正常对照组（Nor）,缺血/再灌注组（I/R）,渐增再灌注组（GR）,Tau低浓度组（T20）,Tau高浓度组（T40）,渐增再灌注联合Tau低浓度组（GT20）,渐增再灌注联合Tau高浓度组（GT40）。记录心功能指标,包括：左室发展压（LVDP）、左室内压上升最大速度（+dp/dtmax）、左室内压下降最大速度（-dp/dtmax）及冠脉流量（CF）；TTC染色法测定心肌梗死面积；检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶（LDH）的活性；HE染色观察心肌形态学的改变；比色法测定总超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase, T-SOD）和Mn超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase, Mn-SOD）活力以及丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量;Western blot检测心肌组织中Akt和Erk蛋白的磷酸化水平。结果：1.GR和Tau减轻I/R诱导的大鼠离体心肌氧化损伤与I/R组比较,GR组、GT20组和GT40组显著提高LVDP、+dp/dtmax和-dp/dtmax,减少梗死面积,降低LDH,减轻心肌形态学损伤。与I/R组比较,GR组、GT20组、GT40组可以显著提高T-SOD（124.26±12.49,140.76±10.36,163.13±16.30vs.100.68±7.86, P<0.01）和Mn-SOD（74.86±7.03,81.65±7.02,96.31±7.03vs.48.06±5.11, P<0.01）,降低MDA（1.98±0.16,1.86±0.11,1.37±0.15vs.2.28±0.18,P<0.01）。2.GR和Tau可能通过Akt通路减轻I/R诱导的大鼠离体心肌氧化损伤Western blot结果显示,与I/R组比较, GR组、GT20组、GT40组均可显著上调心肌组织中p-Akt蛋白表达水平（P<0.01）,但p-Erk蛋白表达水平没有统计学差异。结论：1.GR增加大鼠心肌冠脉流量,减少缺血的梗死面积,降低LDH,减轻心肌形态学损伤,可以显著提高T-SOD和Mn-SOD含量,降低MDA含量,减轻氧化应激损伤,促进心肌的功能恢复。Tau增加大鼠心肌冠脉流量,减少缺血的梗死面积,降低LDH,减轻心肌形态学损伤,可以显著提高T-SOD和Mn-SOD含量,降低MDA含量,减轻氧化应激损伤,促进心功能恢复。Tau预适应联合GR对缺血心肌有更好的保护作用,其强度强于单用GR或Tau。2.Tau和GR提高缺血心肌Akt的磷酸化。Tau和GR可能通过Akt通路减轻I/R诱导的大鼠离体心肌氧化损伤。

论文目录

  • 中文摘要
  • Abstract
  • 缩略语
  • 前言
  • 研究现状、成果
  • 研究目的、方法
  • 对象与方法
  • 1 动物
  • 2 主要仪器
  • 3 药品与试剂
  • 4 实验方法
  • 4.1 主要溶液配置
  • 4.2 大鼠离体心脏Langendorff灌流模型制备
  • 4.3 大鼠离体心脏Langendorff灌流I/R模型制备
  • 4.4 大鼠离体心脏Langendorff灌流GR模型制备
  • 4.5 实验分组和灌注方案
  • 4.6 指标测定及方法
  • 4.6.1 冠脉流量（CF）和心脏血流动力学检测
  • 4.6.2 乳酸脱氢酶（LDH）含量测定
  • 4.6.3 心肌梗死面积测定
  • 4.6.4 苏木精-伊红染色法观察心肌细胞形态
  • 4.6.5 心肌组织MDA检测
  • 4.6.6 心肌组织SOD检测
  • 4.6.7 心肌组织蛋白定量心肌组织蛋白定量心肌组织蛋白定量
  • 5 数据处理
  • 结果
  • 1 Nor组模型的稳定性
  • 2 GR和Tau对离体大鼠LVDP的影响
  • 3 GR和Tau对离体大鼠+dp/dtmax的影响
  • 4 GR和Tau对离体大鼠-dp/dtmax的影响
  • 5 GR和Tau对离体大鼠CF的影响
  • 6 GR和Tau对离体大鼠LDH活性的影响
  • 7 GR和Tau对离体大鼠心肌梗死面积的影响
  • 8 离体大鼠心肌形态学观察
  • 9 各组大鼠心肌组织MDA含量
  • 10 各组大鼠心肌组织T-SOD含量
  • 11 各组大鼠心肌组织Mn-SOD含量
  • 12 p-Akt/t-Akt蛋白表达变化
  • 13 p-Erk/t-Erk蛋白表达变化
  • 讨论
  • 结论
  • 参考文献
  • 发表论文和参加科研情况说明
  • 综述
  • 氧化应激在缺血后适应中的研究
  • 综述参考文献
  • 致谢

    • 相关论文文献

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