论文摘要
急性坏死胰腺炎（Acute necrotizing pancreatitis，ANP）是临床上一种常见的急危重病，发病机制尚未完全阐明，治疗困难，病死率高。近年来研究表明白细胞过度激活后引起机体细胞因子瀑布样释放，导致机体免疫紊乱，并发多器官功能不全（Multiple organs dysfunction syndrome，MODS）是ANP病人发病早期死亡的主要原因之一。研究表明，核转录因子-κB（Nuclear factor-κB，NF-κ3）是调控机体炎症反应的总源头，NF-κB激活后，导致如肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白细胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、白细胞介素-8（Interleukin-8，IL-8）、巨噬细胞趋化肽、细胞间粘附分子-1（Intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）和血管细胞粘附分子-1（Vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1）等基因的过度表达，从而造成ANP时的机体一系列损伤。若能降低NF-κB的活性，减轻炎症介质的释放，有望成为治疗ANP的有效方法。有关三七总皂甙（Panax notoginseng saponins，PNS）降低NF-κB的活性，减轻ANP时的机体损伤的研究，尚未见报道。【目的】本实验拟利用大鼠ANP模型，对如下问题进行探讨：1．NF-κB与ANP时胰腺、肺损伤之间的关系。2．三七总皂甙对ANP的治疗作用，三七总皂甙能否抑制急性坏死性胰腺炎时NF-κB的活性，减轻ANP时胰腺、肺损病理损害。【方法】SD大鼠30只，雌雄不限。随机分为3组：即假手术模型组（Sham operation group，SO组），急性坏死性胰腺炎组（ANP组），三七总皂甙预处理（PNS组），每组10只，SO组和ANP组造模前1小时腹腔注射0.9％生理盐水（0.1ml／100g），PNS组造模前1小时腹腔注射50mg／ml三七总皂甙（0.1 ml／100g）。5％牛磺胆酸钠大鼠胆胰管逆行注射制备大鼠急性坏死性胰腺炎模型，SO组进腹后仅翻动胰腺和十二指肠后关腹，不注入牛磺胆酸钠。各组造模后于6小时点处死大鼠，测定腹水量，血清自动生化分析仪测淀粉酶，取胰腺组织和肺组织测定湿／干重比和固定包埋后制备组织切片行HE染色，用免疫组织化学染色测其中NF-κB活性。【结果】1．腹水量、血清淀粉酶水平、胰腺和肺湿干重比：ANP组造模后6小时腹水量、血清淀粉酶水平、胰腺和肺湿干重比值明显高于SO组（P＜0.05），经PNS处理腹水量、血清淀粉酶、胰腺和肺湿干重比值较ANP组明显下降（P＜0.05）。2．胰腺和肺组织病理学变化和病理评分：PNS组胰腺和肺组织大体及光镜下病理学变化较ANP组病变明显减轻。ANP组组织学损伤程度明显高于SO组（P＜0.05），经PNS处理组织学损伤程度较ANP组明显减轻（P＜0.05）。3．胰腺和肺组织NF-κB活性：ANP组造模后6小时胰腺和肺组织NF-κB阳性细胞数和阳性单位明显高于SO组（P＜0.01），经PNS处理NF-κB阳性细胞数和阳性单位较ANP组明显下降（P＜0.05）。各组NF-κB活性变化与各组形态学变化相一致。4．相关性分析：ANP组肺组织NF-κB活性与肺组织病理评分、肺湿干重比呈正相关，相关系数分别为：r=0.73，r=0.87，（P＜0.01）。ANP组胰腺组织NF-κB活性与肺组织病理评分、肺湿干重比呈正相关，相关系数分别为：r=0.75，r=0.84，（P＜0.01）。ANP组胰腺组织NF-κB活性与胰腺组织病理评分、胰腺湿干重比、腹水量呈正相关，相关系数分别为：r=0.75，r=0.64，r=0.78（P＜0.01）。【结论】1．NF-κB在大鼠急性坏死性胰腺炎胰腺组织和肺组织中明显激活；2．NF-κB活化与大鼠急性坏死性胰腺炎胰腺组织和肺组织损伤之间正相关，这提示NF-κB活化可能与急性坏死性胰腺炎并发多器官损害有关；3．三七总皂甙可以在体内抑制NF-κB在胰腺组织和肺组织中的激活，减轻各脏器的病理损害，可望用于治疗ANP。