论文摘要
目的:①通过对喘息性支气管炎和儿童哮喘的β2-肾上腺素能受体（β2-AR）基因核苷酸第46、79位点突变导致第16、27位氨基酸多态性频率的分析,及对各位点突变基因型的血浆总IgE和嗜酸性粒细胞（EOS）计数的特点分析,从分子水平探讨两病的相关性,为哮喘的早期诊断提供分子生物学依据。②寻找喘息性支气管炎患儿日后继发儿童哮喘的高危因素,为婴幼儿哮喘的早期干预提供依据。方法:研究对象均来源于我院儿科住院及门诊就诊的患儿,哮喘组:2006年10月至2007年9月之间,217例哮喘患儿均为急性发作期,其中男性135例,女性82例,年龄最大17岁,最小1.1岁,平均5.5岁,其中有婴幼儿哮喘35人。喘支组:共119例,均为2006年10月至2007年2月之间就诊,其中男78人,女41人;年龄最大2.9岁,最小0.3岁,平均1.8岁。对照组为本院儿保门诊健康儿童,50例,其中男32例,女18例,年龄最小2岁,最大13岁,平均4.9岁。所有研究对象均为重庆藉,汉族儿童。收集各组患儿及健康儿详细的回顾性问卷调查,问卷涉及既往反复喘息的病史及就诊情况、个人过敏史（湿疹、过敏性鼻炎、食物药物过敏等）、家族史（父母哮喘及过敏史、二级亲属哮喘及过敏史等）及母乳喂养情况。采用PCR-限制性核酸内切酶分析法检测β2-AR 16、27位点基因多态性,比较三组研究对象β2-AR 16、27位的基因型频率及等位基因频率;用ELISA法检测血浆总IgE,对三组的血浆总IgE均值进行比较分析,对每组中各基因型的血浆总IgE均值的差异进行比较;外周血嗜酸性粒细胞计数采用伊红染色法,由本院检验科实验室计数。对喘息性支气管炎患儿追踪随访12个月,根据随访结果,分析影响喘支日后继发哮喘的危险因素。结果:①儿童哮喘组β2-AR第16位点基因型频率:Arg/Arg0.37,Arg/Gly0.51,Gly/Gly0.12,与健康人群对照组比较差异无显著性（P>0.05）;Gly等位基因频率为0.37,与健康人群对照组比较,差异无显著性（P>0.05）;喘息性支气管炎组β2-AR第16位点基因型频率:Arg/Arg0.35,Arg/Gly0.48,Gly/Gly0.17,与健康对照组比较差异无显著性（P>0.05）,与哮喘组比较差异也无显著性;Gly等位基因频率为0.41,与对照组及哮喘组比较均无显著性差异（P>0.05）。哮喘组第27位点基因频率:Gln/Gln0.25,Gln/Glu0.55,Glu/Glu0.20,Glu/Glu基因型频率明显低于对照组（P<0.05）;Glu等位基因频率为0.48,明显低于对照组（P<0.05）;喘支组27位点基因频率:Gln/Gln0.24,Gln/Glu0.50,Glu/Glu0.26,与对照组无显著差异,与哮喘组也无显著性差异（P>0.05）;喘支组Glu等位基因频率为0.51,与对照组及哮喘比较均无显著性差异（P>0.05）;②哮喘组血浆总IgE和外周血EOS计数均高于喘支组和正常对照组（P<0.05）,喘支组的总IgE和外周血EOS计数都明显高于对照组（P<0.05）;③β2-AR基因16位点各基因型间的血浆总IgE水平差异无显著性（P>0.05）;哮喘和喘支组27位点中Gln/Gln基因型的总IgE水平都明显高于Gln/Glu及Glu/Glu基因型（P<0.05）,Gln/Glu和Glu/Glu基因型之间的IgE水平无显著差异（P>0.05）。④对119例喘息性支气管炎追踪随访12个月,成功随访的有108例,其中有66例（61.11%）有明确喘息又发作两次以上,可诊断为儿童哮喘,为哮喘组;有42例（38.89%）喘支的患儿这12个月未再有喘息发作,仍诊断为喘息性支气管炎,为未再发作组。对7种危险因素进行分析,单因素分析:个人湿疹史、个人过敏史、母亲过敏史、父亲过敏史、母乳不足4个月与喘支发展为婴幼儿哮喘有统计学意义。Logistic分析示:个人湿疹史（OR=2.820,95%CI:1.107～7.184, P<0.05）、个人过敏史（OR=2.756,95%CI:1.097～6.925,P<0.05）、母亲过敏史（OR=2.860,95%CI:1.070～7.642, P<0.05）、母乳不足4个月（OR=2.901,95%CI:1.176～7.155, P<0.05）是喘支发展为婴幼儿哮喘的危险因素。哮喘患儿的血浆总IgE和外周血EOS计数均明显高于未再发作喘息患儿（P<0.05）。结论:①β2-AR基因第16位点基因多态性与儿童哮喘和喘息性支气管炎的发病无关联;在β2-AR基因27位点与喘息性支气管炎与支气管哮喘有相关性,尤其是具有Gln/Gln基因型和Gln等位基因的喘支与哮喘的关系更为密切;②血浆总IgE水平和外周血EOS计数升高不仅是哮喘免疫病理变化指标,也是喘支患儿的特征,喘息性支气管炎具有和哮喘相似的病理过程;③喘支与哮喘一样,27位点Gln/Gln基因型的血浆总IgE值都明显高于其它基因型,故对于具有27位点的Gln/Gln基因型且血浆总IgE增高的喘支与哮喘的关系更为密切。④喘息性支气管炎日后继发为婴幼儿哮喘的危险因素是患儿湿疹史和过敏史、母亲过敏史、母乳喂养不足4个月,患儿性别、父亲过敏史和二级亲属过敏史不是儿童哮喘的危险因素,因此婴幼儿哮喘为多种因素相互作用的复杂结果,且具有上述危险因素及血浆总IgE和外周血EOS计数增高的喘息性支气管炎发展为儿童哮喘的危险性较大,应高度警惕,尽早给与干预,以降低儿童哮喘的发生率。
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