具有ACE抑制活性乳酸菌的筛选及其发酵特性的研究

具有ACE抑制活性乳酸菌的筛选及其发酵特性的研究

论文摘要

本文以内蒙古锡林郭勒和巴彦淖尔地区传统乳制品中分离鉴定的52株乳酸菌为研究对象,通过ACE抑制活性、胆汁盐耐受性、人工胃液和人工肠液耐受性试验,筛选出ACE抑制活性较高且胆汁盐和人工消化液耐受性较好的菌株,探讨了筛选菌株的生长特性,分离提纯了发酵乳中产生的ACE抑制肽,并对其稳定性进行了研究。结果表明,供试52株乳酸菌中筛选出ACE抑制活性达33%以上的乳酸菌22株,经耐胆汁盐试验筛选出6株胆汁盐耐受能力较强(存活率均大于80%)的乳酸菌,再经人工胃液、人工肠液耐受性筛选出3株能耐受pH3.0人工胃液处理3h后接着经pH8.0人工肠液处理24h的乳酸菌Lactobacillus helveticus 130B4、Lactobacillus casei 325M2、Lactobacillus delbrueckii ssp. lactis QS306,他们在人工胃液和人工肠液中的增长率分别为117%、28.30%和39.55%。筛选的乳酸菌Lactobacillus helveticus 130B4在还原脱脂乳中生长较缓慢,培养36 h的酸度为0.8%,72 h的酸度可以达到1.85%,活菌数可达1.0×109CFU/g。还原脱脂乳中添加酵母浸膏、大豆肽、核酸关联物质(腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶和黄嘌呤)能对Lactobacillus helveticus 130B4的产酸能力、蛋白分解能力以及ACE抑制活性都有一定的促进作用。选用Lactobacillus helveticus 130B4发酵的乳清中,经Sephadex G15分离收集到具有ACE抑制活性的组分3个(组分A、组分B、组分C),其中组分B的ACE抑制率((69.92±0.79)%)最高,其IER((88.06±0.0728)g/L)显著高于其他组分(P<0.05)。分离提纯的ACE抑制肽对温度的检测结果显示,该ACE抑制肽具有良好的耐高温性能,100℃、20min处理时其ACE的抑制活性达到未处理的98.33%,在110℃、20 min处理时,仍保留原ACE抑制活性73.81%。体外酶解试验结果表明,胃蛋白酶对该ACE抑制肽的活性有一定的消解作用,但胰蛋白酶没有,两种酶混合消化处理时其ACE抑制活性下降不大。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 引言
  • 1.1 高血压的病因及其治疗
  • 1.2 ACE 与血压调整系统
  • 1.3 ACE 抑制肽及其降压作用
  • 1.4 产生ACE 抑制肽的益生乳酸菌
  • 1.4.1 益生菌的定义及其诸特性
  • 1.4.2 益生菌中常用菌种
  • 1.4.3 益生菌在乳制品中的应用
  • 1.4.4 产生ACE 抑制肽的乳酸菌
  • 1.5 本研究的目的、意义及内容
  • 1.5.1 目的和意义
  • 1.5.2 主要研究内容
  • 2 材料与方法
  • 2.1 材料
  • 2.2 试验仪器
  • 2.3 试验方法
  • 2.3.1 菌株的活化和ACE 抑制活性乳酸菌的筛选
  • 2.3.2 pH 值的测定
  • 2.3.3 酸度的测定
  • 2.3.4 活菌数测定
  • 2.3.5 ACE 抑制活性的测定
  • 2.3.6 乳酸菌的蛋白水解活性测定
  • 2.3.7 乳酸菌的耐胆汁盐试验
  • 2.3.8 乳酸菌的人工胃液、人工肠液耐受性试验
  • 2.3.9 Lb.helveticus 130B4促长因子的探讨
  • 2.3.10 ACE 抑制肽的凝胶柱层析分离纯化
  • 2.3.11 酶消化对ACE抑制肽的影响
  • 2.3.12 热处理对ACE抑制肽的影响
  • 2.3.13 数据处理
  • 3 结果与分析
  • 3.1 部分供试乳酸菌的ACE抑制活性
  • 3.2 乳酸菌的耐胆汁盐能力
  • 3.3 人工胃液耐受性
  • 3.4 乳酸菌株对人工肠液的耐受性
  • 3.5 Lb.helveticus 130B4在还原脱脂乳中的生长特性
  • 3.6 促长因子对pH 值和滴定酸度的影响
  • 3.7 促长因子对蛋白分解能力的影响
  • 3.8 Lb.helveticus 130B4的ACE抑制活性
  • 3.9 ACE 抑制活性肽的分离纯化
  • 3.10 酶处理对 ACE 抑制肽稳定性的影响
  • 3.11 热处理对ACE抑制肽稳定性的影响
  • 4 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 作者简介
  • 相关论文文献

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