3种根管冲洗剂和充填剂对根管内粪肠球菌的抗菌活性的体外研究

论文摘要

研究背景:根管充填治疗后依然存在持续性根尖周感染,这可能与根内感染、根外感染、异物反应以及真性囊肿等诸多因素有关。而根管充填后残留在根管内的细菌是造成根管治疗失败的主要原因。根管治疗失败的根管内存在的细菌与初次根管内感染所发现的细菌完全不同。初次感染的根管内存在的细菌主要为多种革兰氏染色阴性的厌氧菌菌株。而二次感染的根管中检测到的细菌类型仅为一种或几种。粪肠球菌虽然是人体的正常菌群,但在无症状持续性根尖周感染和持续性根管内感染中常被检测到。粪肠球菌在根管失败的病例中占有很高的比例,并且可以在根管内单独生存或者是作为根管内主要微生物的一种。尽管在未经治疗的根管内粪肠球菌占有相当小的比例,但在根管充填治疗后持续性的根尖周感染中起到了非常重要的作用。现在的根管机械预备方法,冲洗方法和充填材料对于清除粪肠球菌需进一步完善。本论文主要研究在体外条件下,3种根管冲洗剂和3种根管充填剂对于根管内粪肠球菌的抗菌活性。目的:（1）建立根管内感染粪肠球菌的牙齿模型。（2）比较5.25%次氯酸钠、2%氯已定、17%EDTA三种根管冲洗剂对根管内粪肠球菌的抗菌活性。（3）比较Acroseal、AH plus、Cortisomol三种根管充填剂对根管内粪肠球菌的抗菌活性。（4）比较Acroseal、AH plus、Cortisomol三种根管充填剂各自随时间对根管内粪肠球菌的抗菌活性的变化。（5）比较次氯酸钠、氯已定、EDTA三种根管冲洗剂和Acroseal、AH plus、Cortisomol三种根管充填剂联合作用对根管内粪肠球菌的抗菌活性以及其抗菌活性随时间的变化。方法:1、常规消毒、开髓,去除入选离体牙（100颗）牙髓,不锈钢K锉预备根管至40#,用17%EDTA、0.5%次氯酸钠和蒸馏水冲洗根管,用树脂封闭根尖孔。高压蒸汽消毒灭菌后,选取2个标本进行培养,检测灭菌效果。在确认所选标本无菌之后,将配制好的浓度约为1.0×108CFU/ml菌液以100μl/根管在30min内接种完毕。将标本放于BHIA中,置于CO2恒温培养箱内37℃培养。隔日更新BHIA培养基直至第21d。粪肠球菌培养至第21d时,随机抽取2个标本,用API 20strep试剂盒进行生化鉴定。2、将根管内已感染粪肠球菌的96颗离体牙随机分为四组,每组为24颗牙。分别用新鲜配制的5.25%次氯酸钠、2%氯已定、17%EDTA和0.9%Nacl作为根管冲洗剂冲洗根管,其中0.9%Nacl为阴性对照。在冲洗前和冲洗后分别提取样本。之后,进行细菌菌落计数。采用单因素方差分析计算和比较各组的CFU的变化。3、从四组冲洗组中分别随机抽取6颗牙组成新的充填组,每组也为24颗牙。用纸尖吸干根管内液体后,分别用Acroseal氢氧化钙根管封闭剂、AH Plus根管充填材料、Cortisomol根管充填材料和碳酸钙充填根管,其中碳酸钙为阴性对照。牙冠部分由可乐丽菲露光固化复合树脂充填。将标本放于BHIA中,置于CO2恒温培养箱内37℃培养。1周后,选择每一标本的根中位置,用慢速机,直径为1mm的球钻钻孔进入根管,将钻取的牙本质碎屑立即倒入装有无菌水的Eppendorf管中,小型振荡器振荡1min。取样完毕后,将标本放入新的BHIA中,置于CO2恒温培养箱内37℃继续培养。3周后和5周后的样本采集过程与1周后的操作相同。之后,对所取样本进行细菌菌落计数。采用重复测量的方差分析计算和比较各组的CFU的变化。结果:1、通过各种细菌学鉴定方法,可以确定粪肠球菌已感染牙齿根管,并且确定无杂菌污染,粪肠球菌感染牙齿根管模型成功建立。2、冲洗前各组根管内细菌数量的差异无统计学意义（F=0.023,P=0.995）。冲洗后各组根管内细菌数量的差异有统计学意义（F=67.847,P=0.000）。通过冲洗剂的冲洗,各组根管内细菌数量均有显著下降（P＜0.001）。冲洗后,各组之间CFU的减少量有统计学意义（F=103.060,P=0.000）。通过冲洗前后细菌量减少值的两两比较,5.25%次氯酸钠、2%氯既定和17%EDTA组之间差异无统计学意义（P＞0.05）,但5.25%次氯酸钠、2%氯既定和17%EDTA组的抗菌活性均明显好于0.9%Nacl（P＜0.001）。3、冲洗剂分组（4组）因素主效应（F=360.922,P=0.000）、充填剂分组（4组）因素主效应（F=96.124,P=0.000）、以及两者的交叉处理分组（16组）因素主效应（F=4.580,P=0.000）均有统计学意义;在组内效应及交互效应的比较中,测量时间因素主效应（F=286.016,P=0.000）、冲洗剂分组因素与测量时间因素的交互效应（F=6.044,P=0.000）、充填剂分组因素与测量时间因素的交互效应（F=21.290,P=0.000）,冲洗剂分组因素、充填剂分组因素与测量时间因素的交互效应（F=2.338,P=0.009）均有统计学意义。结论:1、粪肠球菌感染牙齿根管的模型可以在体外成功建立;2、5.25%次氯酸钠、2%氯已定、17%EDTA等3种根管冲洗剂冲洗根管对根管内粪肠球菌均有较好的抗菌效果,且抗菌效果无明显差别,但三者均不能完全杀灭根管内粪肠球菌;3、Acroseal、AH plus、Cortisomol等3种根管封闭剂中,AH plus和Cortisomol对根管内粪肠球菌均有较好的抗菌效果,AH plus的抗菌能力稍强于Cortisomol,而Acroseal对根管内粪肠球菌的抗菌效果较差,但三者也不能完全杀灭根管内粪肠球菌;4、5.25%次氯酸钠、2%氯已定、17%EDTA等三种根管冲洗液和Acroseal、AH plus、Cortisomol三种根管封闭剂对根管内粪肠球菌的联合作用中,5.25%次氯酸钠和AH plus的组合,抗菌效果最好;5、粪肠球菌在已充填的根管中随时间的总的变化趋势为增加。其中,Acroseal组中粪肠球菌在3周后就开始有明显增加,而其他两组的粪肠球菌则会在5周后才会有明显增加,增加的幅度小于Acroseal组。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 技术路线
• 第一章 粪肠球菌感染牙齿根管模型的建立
• 1.1 材料和方法
• 1.1.1 材料
• 1.1.2 方法
• 1.2 结果
• 1.3 讨论
• 第二章 3种根管冲洗剂对根管内粪肠球菌的抗菌效果
• 2.1 材料和方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.2 结果
• 2.3 讨论
• 第三章 3种根管充填剂对根管内粪肠球菌的抗菌效果
• 3.1 材料和方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.2 结果
• 3.3 讨论
• 全文结论
• 不足之处
• 参考文献
• 在校期间投稿与发表文章
• 文献综述
• 附录1 中英文对照缩略词表
• 附录2 附图
• 致谢