论文题目: 一种新的来源于人的穿膜肽的功能和对生物节律影响的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 生物医学工程
作者: 彭涛
导师: 王正荣
关键词: 穿膜肽,细胞膜,血脑屏障,结合序列,近日节律
文献来源: 四川大学
发表年度: 2005
论文摘要: 目的 研究一种新的人体蛋白结构域(Circadian locomoter output cycles kaput protein’s DNA-binding peptide,hCLOCK’s DNABIND,hClock-(35-47))对多种细胞细胞膜的穿膜作用及其通过大鼠血脑屏障的作用。在此基础上,进一步探讨了hClock-(35-47)通过细胞膜的一些相关机理,及其内化入细胞后对细胞近日节律基因转录的影响。 方法 化学合成hClock-(35-47),N端标记FITC绿色荧光素,与培养的血管内皮细胞(ECV-304)和原代培养的神经胶质细胞孵化一定时间后,荧光显微镜下观察其对多种细胞细胞膜的穿膜作用,并采用Image-Pro Plus(Version 4.5 for WindowsTM)来分析细胞荧光强度。采用MTT比色实验测定hClock-(35-47)的细胞毒性。在此基础上,经大鼠颈总动脉注射hClock-(35-47)后,做大鼠大脑冰冻切片,荧光显微镜下观察其通过大鼠血脑屏障进入脑细胞的情况。在培养基中加入肝素,通过在荧光显微镜下观察标记FITC的hClock-(35-47)内化入细胞的情况,来了解肝素对hClock-(35-47)内化入细胞的抑制
论文目录:
摘要
Summary
第一章 前言
1.1 通过生物膜屏障药物载体的研究现状
1.2 穿膜肽的研究现状及应用
1.3 从时间节律蛋白家族中筛选人源性穿膜肽
第二章 hClock-(35-47)通过细胞膜的实验研究
2.1 引言
2.2 材料
2.3 方法
2.4 结果
2.5 讨论
2.6 本章小结
第三章 hClock-(35-47)通过大鼠血脑屏障的实验研究
3.1 引言
3.2 材料
3.3 方法
3.4 结果
3.5 讨论
3.6 本章小结
第四章 肝素对hClock-(35-47)内化入细胞的抑制作用
4.1 引言
4.2 材料
4.3 方法
4.4 结果
4.5 讨论
4.6 本章小结
第五章 hClock-(35-47)对NIH3T3细胞穿膜作用的近日节律变化
5.1 引言
5.2 材料
5.3 方法
5.4 结果
5.5 讨论
5.6 本章小结
第六章 hClock-(35-47)内化入NIH3T3细胞后对细胞近日节律基因转录的影响
6.1 引言
6.2 材料
6.3 方法
6.4 结果
6.5 讨论
6.6 本章小结
结论及创新点
文献综述
参考文献
在读期间主要工作
申明
致谢
发布时间: 2005-10-08
参考文献
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