论文摘要
过敏性紫癜（HSP）是以坏死性小血炎为主要病理改变的全身性疾病。紫癜性肾炎（HSPN）是继发于HSP的肾脏损害,为儿童常见的继发性肾小球疾病之一。近年来有研究表明,HSPN所致的血管炎中有很多细胞因子的参与,其中白细胞介素-8（IL-8）的作用较为明显,它是一种中性粒细胞趋化因子,参与免疫复合物介导的血管炎的病理过程,与HSPN的临床表现密切相关;IL-8基因依据其3’端2767位点单核苷酸多态性,而在人群中表现为AA型、GG型和GA型, IL-8的基因多态性现象与HSPN患者的易感性密切相关。为进一步阐明HSPN与IL-8的关系,本课题研究HSPN患儿外周血中IL-8的表达,并进行相关的基因多态性检测,分析其表达、基因多态性与HSPN的关系,从而评估IL-8在HSPN发病过程中的影响和作用。对象与方法1.选择HSPN急性期患儿42例,随访的HSPN恢复期患儿28例,对照组20例,来自健康体检儿童。2.对急性期组42例、恢复期组28例及对照组患儿20例采用Real-Time PCR的方法测定IL-8的CT值,并计算出Delter delter CT值,以数学公式定量计算RNA表达水平。3.对患病组患儿68例（包括急性期组和恢复期组患儿）及对照组患儿20例采用Pyrosequencing（焦磷酸测序）法对IL-8基因多态性分析。结果1.外周血中IL-8中RNA表达的平均定量结果为:42例急性期病例组患儿为2-（3.5079±1.14947）, 28例恢复期组为2-（5.9782±0.81948）,20例对照组为2-（7.3095±0.67266）。急性期患儿外周血中IL-8的RNA表达水平明显高于恢复期组及健康对照组,而恢复期组与急性期病例组比较,外周血IL-8的RNA表达的平均定量水平虽有明显的降低,但仍然高于对照组。经过方差分析,两两比较有统计学意义上的显著性差异（P<0.05）。2.68例患病组（急性期组和恢复期组）中,纯合子41例（60.3%）,其中AA型9例（13.2%）,GG型32例（47.1%）,杂合子（GA型）27例（39.7%）,20例健康对照组中纯合子5例（25.0%）,其中AA型2例（10.0%）,GG型3例（15.0%）,杂合子（GA型）15例（75.0%）。患病组中纯合子分布的频率明显高于对照组,经检验,P值<0.05。提示IL-8纯合子基因型的患儿对于紫癜性肾炎更易感。对比患病组及对照组中的IL-8基因纯合子（AA/GG）出现频率,经检验,并经Fisher’s精确检验校正,P值<0.05。即纯合子中GG出现的频率又高出AA出现的频率,并表现出统计学上的明显差异。提示在我国紫癜性肾炎患儿中,纯合子相对易感,其中尤以GG型者为甚。并且样本分布符合Hardy-Weiberg平衡。结论IL-8参与了紫癜性肾炎的发病及病理过程,并可能与其临床表现相关;IL-8基因型纯合子（AA/GG）,尤其是GG型,出现频率的增高将使过敏性紫癜更易进展为紫癜性肾炎。IL-8的基因多态性在紫癜性肾炎发病过程中起显著作用,提示紫癜性肾炎的发病很可能与其基因背景有关。