银翘散在不同煎煮时间下对致热大鼠体温及下丘脑cAMP含量的影响及其对小鼠免疫调节作用的实验研究

论文摘要

目的:银翘散是我国清代著名温病学家吴瑭创制的方剂,处方由金银花、连翘、桔梗、薄荷、竹叶、生甘草、荆芥、淡豆豉、牛蒡子九味药组成。《温病条辨》称本方为"辛凉平剂",以治疗温病以及某些杂病邪在卫分、上焦而闻名,并一直沿用至今。吴瑭对本方的煎煮时间,服用方法等作了详细的说明,方后载“香气大出,即取服,勿过煮。”此方法是取得疗效的关键。目前临床上有的忽视此煎法,结果取效不佳,反轻视该方的应用,有的虽注意到此煎法,但究竟何谓“过煮”,“香气大出”究竟是多长时间至今仍无定论,尚无系统实验研究证实,我们在长期临床实践中通过对比观察确定了煎煮时间,但尚未进行实验研究。本研究目的在于探讨银翘散“香气大出,即取服”的最佳煎煮时间及其免疫调整作用,为更加准确合理地应用该方提供客观而科学的依据,并进一步扩大其临床应用。方法:1、取雄性清洁级wistar大鼠96只,体重200-220克,随机分为12组:空白对照组,模型对照组,阿司匹林阳性对照组,银翘散煮沸后3分钟高、中、低浓度组,银翘散煮沸后6分钟高、中、低浓度组,银翘散煮沸后12分钟高、中、低浓度组。复制酵母所致大鼠发热的模型:配制20%的干酵母悬液,对各组大鼠背部皮下注射,空白组皮下注射等量生理盐水。造模后3小时30分灌胃给药,模型组及空白组予等量蒸馏水,于造模后1、2、3、4、5、6、7小时各测体温一次,之后断头处死,取下丘脑通过放射免疫法测定cAMP含量。数据采用均数±标准差（x±s）表示,应用SPSS13.0软件进行统计学处理。采用完全随机设计的方差分析进行比较,并进行组间两两比较。2、取雄性清洁级昆明小鼠88只,体重18-22克,随机分为11组:空白对照组,模型对照组,银翘散煮沸后3分钟高、中、低浓度组,银翘散煮沸后6分钟高、中、低浓度组,银翘散煮沸后12分钟高、中、低浓度组。各组采用环磷酰胺腹腔注射复制成免疫抑制模型,空白组予等量生理盐水。自造模起开始灌胃给药,空白组及模型对照组予等量蒸馏水,连续7天。于末次给药后30分进行游泳耐力实验;通过尾静脉注入墨汁法观测银翘散对小鼠网状内皮系统对血流中惰性炭粒的吞噬廓清能力的影响;摘眼球处死小鼠测定银翘散对其T细胞亚群的影响;各组称重,取脾和胸腺计算脾指数、胸腺指数。数据处理同上。结果:1、银翘散在不同煎煮时间下对致热大鼠体温及下丘脑cAMP含量的影响:空白组体温在实验过程中无明显变化,模型组体温在6h时达高峰,明显高于空白组,有显著性差异（p<0.05）;给药后30分,阿司匹林明显抑制大鼠体温的升高,与模型组相比有显著性差异（p<0.05）,其它各组与模型组相比无显著性差异（p>0.05）;给药后1小时30分,银翘散煮沸后3分钟高浓度组、中浓度组,银翘散煮沸后6分钟高浓度组、中浓度组,阿司匹林组与模型组大鼠体温相比,有显著性差异（p<0.05）,其它各组与模型组相比无显著性差异（p>0.05）;给药后2小时30分,银翘散各组和阿司匹林组与模型组大鼠体温相比,均有显著性差异（p<0.05）,银翘散煮沸后3分钟高浓度组、中浓度组,银翘散煮沸后6分钟高浓度组、中浓度组之间相互比较无显著性差异（p>0.05）,效果优于银翘散其它各组和阿司匹林组,有显著性差异（p<0.05）;给药后3小时30分,银翘散各组和阿司匹林组与模型组大鼠体温相比,均有显著性差异（p<0.05）,银翘散煮沸后3分钟高浓度组、6分钟高浓度组相互比较无显著性差异（p>0.05）,效果优于银翘散其它各组和阿司匹林组,有显著性差异（p<0.05）。造模后7小时,与正常对照组相比,模型组大鼠下丘脑组织中cAMP的含量明显增高,有显著性差异（p<0.05）。与模型组相比,银翘散煮沸后3分钟高、中浓度组,银翘散煮沸后6分钟高、中浓度组,阿司匹林组大鼠下丘脑组织中cAMP的含量明显降低,有显著性差异（p<0.05）;其中以银翘散煮沸后3分钟高浓度组和6分钟高浓度组效果为优,与其它组相比有显著性差异（p<0.05）。银翘散其余各组下丘脑组织中cAMP的含量虽有降低但无统计学差异（p>0.05）。2、对免疫抑制小鼠游泳耐力时间的影响:银翘散煮沸后3分钟高浓度,3分钟中浓度,6分钟高浓度可显著提高免疫抑制小鼠的游泳耐力时间,与模型组相比差异有显著性（p<0.05）,3组比较无显著性差异,银翘散其它各组游泳耐力时间虽长于模型组,但无显著性差异。3分钟高浓度和6分钟高浓度组效果优于12分钟高、中、低浓度组,差异有显著性（p<0.05）。3、对免疫抑制小鼠网状内皮系统对血流中惰性炭粒的吞噬廓清能力的影响:除银翘散煮沸后6分钟低浓度、12分钟中、低浓度外,其余各组均能显著增强免疫抑制小鼠网状内皮系统的吞噬功能,K值和α值均见明显增高,与模型组相比有显著性差异（p<0.05）。其中以银翘散煮沸后3分钟高浓度和6分钟高浓度的效果为优,两者相比无显著性差异（p>0.05）,与银翘散其它组相比差异有显著性（p<0.05）。4、对免疫抑制小鼠外周血中T细胞亚群的影响:银翘散可显著提高各组小鼠外周血中CD4+T细胞的数量,与模型组相比有显著性差异（p<0.05）,银翘散煮沸后3分钟高浓度组效果优于其它各组,且有显著性差异。银翘散各组有升高小鼠外周血中CD8+T细胞数量的趋势,但作用不显著。另外,银翘散煮沸后3分钟高、中、低浓度可显著提高小鼠外周血中CD4+T细胞和CD8+T细胞的比值,与模型组相比有显著性差异（p<0.05）。5、对免疫抑制小鼠脾脏、胸腺器官重量的影响:银翘散煮沸后3分钟高浓度组能显著性地增加各组小鼠胸腺重量和脾脏重量,与模型组相比有显著性差异（p<0.05）,银翘散其余各组小鼠胸腺和脾脏重量均有升高趋势,但作用不显著。结论:1、银翘散具有明显的解热效应,其效果以煮沸后3分钟、6分钟为优。2、银翘散可降低发热大鼠下丘脑组织中cAMP的含量,提示其解热作用机理之一可能是通过降低中枢发热介质含量而发挥其解热作用。其效果以煮沸后3分钟、6分钟为优。3、银翘散具有免疫增强作用,提高免疫抑制小鼠的游泳耐力时间以煮沸后3分钟、6分钟为优;增强免疫抑制小鼠网状内皮系统（RES）的吞噬功能以煮沸后3分钟、6分钟为优;提高免疫抑制小鼠外周血中CD4+T细胞的数量及CD4+T细胞和CD8+T细胞的比值以煮沸后3分钟为优;增加免疫抑制小鼠胸腺重量和脾脏重量以煮沸后3分钟为优。4、银翘散对CD8+T细胞数量作用不显著,可能是由于:（1）动物数量较少;（2）银翘散增强小鼠细胞免疫的功能可能主要是通过上调CD4+T细胞亚群而使CD4+T/CD8+T恢复正常比例,有待进一步研究。5、综上所述,银翘散以煮沸后3分钟效果为最佳。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 银翘散在不同煎煮时间下对致热大鼠体温及下丘脑cAMP 含量的影响及其对小鼠免疫调节作用的实验研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 银翘散的临床与药理研究进展
• 致谢
• 个人简历