论文摘要
动物模型研究是疾病研究中的重要手段,合适的动物模型对于人类疾病的研究意义尤其重大。但是由于转基因技术是一种基因全表达或不表达的技术,基因表达常不局限在一个器官,一个组织,简单的转基因技术无法回答基因功能的细节问题。此外,转基因动物转入的外源基因常常由于某些基因表达产物使细胞或胚胎不耐受,从而妨碍了转基因动物的建立。随着转基因技术的进步,转移至细胞和动物体内的外源基因的不可调控性正逐渐被克服。条件转基因使转基因技术有了革新性的发展,其中四环素调控系统应用最广,为转基因动物转入外源基因的诱导表达开辟了一个崭新的领域。但随着时间的验证发现该系统在缺乏诱导剂的诱导下,目的基因产生较高的基础表达水平,故迫切需要建立一个严密型四环素调控系统来克服该系统的基础泄漏表达,阻断目的基因在转基因动物胚胎期就有的基础泄漏表达,有效防止其形成“免疫耐受”。本实验构建了严密型四环素调控系统的调控部分pApoE-rtTA-tTS,首先在人HepG2细胞进行表达研究,结果表明,该系统可以在真核细胞里严密有效地调控目的基因的表达。随后,我们将构建好的片段进行显微注射制作转基因小鼠,得到了二只调控部分的首建鼠。然后,我们利用携带有目的基因HCV-C的四环素调控系统的反应部分TRE-C小鼠与我们得到的调控部分的首建鼠进行交配,得到了二只双转基因小鼠,结果表明,无诱导剂存在时,加有沉默子的四环素调控系统可以有效抑制或消除目的基因的基础泄漏表达。
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标签：严密型四环素调控系统论文; 四环素转录沉默子论文; 转基因小鼠论文; 丙型肝炎病毒论文; 核心蛋白论文;