论文摘要
硫代葡萄糖苷（简称硫苷）是广泛存在于十字花科植物中的含硫次生代谢产物。此类化合物及其降解产物具有广泛的生物活性，不仅可以抑致细菌和微生物的生长，还具有很好的抗癌活性。因此，对硫苷的分离提纯及其结构鉴定在食品科学、生物医学等方面有着重要的实践意义。逆流色谱是一种不用固态支撑体或载体的液液分配色谱技术，它可以实现连续高效的分离和制备。本论文应用逆流色谱技术分离油菜籽中的硫代葡萄糖苷，为硫代葡萄糖苷的分离制备打下技术基础。本研究对逆流色谱分离油菜籽中的硫代葡萄糖苷的溶剂系统进行了研究，找到了合适的溶剂系统正丁醇-乙腈-10％硫酸铵溶液（1：0.5：2.2）。采用柱容积200 ml的HSCCC-D200型高速逆流色谱仪分离400mg油菜籽粗提物，得到13.6mg A2组分（主要为烯丁基硫苷，下同）和47.2mg B组分（主要为2-羟基-3-烯丁基硫苷，下同），分离时间8.5小时。采用柱容积3400 ml的SRCCC-D3400型低速逆流色谱仪分离7g油菜籽粗提物，得到86.3mg A2组分和521.4mg B组分，分离时间22个小时。本实验还研究了流动相流速、色谱柱转速、进样量等参数对固定相的保留率及分离效果的影响，优化了分离条件。逆流色谱分离获得的硫代葡萄糖苷组分，经制备高效液相色谱等进一步纯化得到三种硫代葡萄糖苷单体：（1）E-（N）-烯丁基硫苷（2）Z-（N）-烯丁基硫苷（3）2-羟基-3-烯丁基硫苷。它们的结构经ESI—MS和1HNMR、13CNMR进行了鉴定。E-（N）-烯丁基硫苷Z-（N）-烯丁基硫苷2-羟基-3-烯丁基硫苷应用柱容积1200ml的HSCCC-D1200型高速逆流色谱仪对高速逆流色谱仪分离油菜籽硫代葡萄糖苷进行了放大实验，3g油菜籽粗提物，经23个小时分离，得到364.5mgB组分。应用柱容积22L的SRCCC-D22L型低速逆流色谱仪对低速逆流色谱仪分离油菜籽硫代葡萄糖苷进行了放大实验，50g油菜籽粗提物经65小时分离，得到3.37gB组分。高速逆流色谱被放大到g级规模；低速逆流色谱被放大到10g级规模。