熊去氧胆酸对肝肿瘤细胞株诱导凋亡及抑制增殖的实验研究

论文摘要

目的:探讨熊去氧胆酸（UDCA）对肝肿瘤细胞株诱导凋亡及抑制增殖的作用和机制。 方法:用四氮唑蓝法检测UDCA对肝肿瘤细胞株HepG2,BEL7402及正常肝细胞株L-02的增殖抑制作用;以流式细胞术、TUNEL和DNA凝胶电泳法测定UDCA诱导HepG2,BEL7402及L—02细胞凋亡的作用和其对细胞株增殖周期的影响;通过Wright-Giemsa染色法、电镜观察经UDCA处理后细胞形态的改变;应用RT-PCR、western blot和免疫细胞化学检测UDCA对上述三种细胞株的癌基因和抑癌基因bax、bcl-2、c-myc、N-ras、p21和p53表达的影响。 结果:UDCA对HepG2,BEL7402细胞株生长的抑制作用随药物浓度增高而增强（r2=0.96,P<0.01;r2=0.97,P<0.01;48h）。UDCA对HepG2及BEL7402的IC50分别为0.92 mmol.L-1, 0.86 mmol.L-1。UDCA(1.0mmol.L-1)对HepG2及BEL7402的凋亡率分别为42±6%及44±4%,明显高于对照组（P<0.01）,并且阻滞细胞周期于G0/G1期。免疫细胞化学检测显示:以UDCA(0.8mmol.L-1)处理HepG2后bcl-2表达由24.3±2.4%降低为10.1±1.6%,Bax表达由43±5%升高为59±3%（P<0.01）;处理BEL7402细胞后bcl-2表达由21.6±1.8%降为11.6±2.1%,Bax表达由44±4%升高为59±3%（P<0.01）。RT-PCR结果表明:UDCA可以上调HepG2,BEL7402细胞bax mRNA的水平,下调HepG2,BEL7402细胞bcl-2、c-myc、N-ras mRNA的水平。Western blot

论文目录

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• 符号说明
• 前言
• 材料和方法
• 结论
• 附录
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间论文发表情况
• 学位论文评阅及答辩情况表