急慢性应激对小鼠自发行为和空间学习记忆功能的影响及其机制

急慢性应激对小鼠自发行为和空间学习记忆功能的影响及其机制

论文摘要

本研究分别采用单因素急性应激动物模型(足底电击)和多因素慢性不可预知应激动物模型(拥挤、冷/热刺激、白噪声、高台、足底电击,28天),研究了急、慢性应激条件下小鼠自发行为和空间学习记忆能力的变化及其脑内c-fos表达的变化情况。旨在探讨不同应激条件对小鼠自发行为和空间学习记忆能力的影响及其作用机制。以开场实验检测小鼠新异环境下的自发行为;采用Morris水迷宫测试小鼠的空间学习记忆能力;以酶联免疫法测定小鼠血清皮质酮含量,通过HE染色观察小鼠海马、前脑皮层及下丘脑室旁核神经元的形态学变化;并运用免疫组织化学方法检测小鼠海马、前脑皮层和下丘脑室旁核的c-fos表达。研究结果如下:1.急性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠的水平穿越格数、直立次数、粪便粒数均明显减少,中央格停留时间显著延长,但修饰次数无显著变化;慢性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠的水平穿越格数、直立次数、修饰次数均明显减少,中央格停留时间显著延长,粪便粒数明显增多。2.急性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠寻找平台的逃避潜伏期明显缩短,且在空间搜索实验中,其在目标象限停留时间明显延长;慢性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠寻找平台的逃避潜伏期明显延长,且在空间搜索实验中,其在目标象限停留时间明显缩短。3.急、慢性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠血清皮质酮含量均明显增加,但急性应激增加的程度更强。4.急性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠的神经元形态结构没有明显变化;慢性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠海马、前脑皮层及下丘脑室旁核神经元数量明显减少,细胞萎缩变性,呈现不同程度的损伤现象。5.急性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠海马、前脑皮层及下丘脑室旁核c-fos阳性细胞数明显增多,平均目标灰度值明显降低;慢性应激后,与对照组小鼠比较,应激组小鼠海马、前脑皮层及下丘脑室旁核c-fos阳性细胞数明显减少,平均目标灰度值明显增高。研究结论如下:1.急、慢性应激均减少小鼠的开场行为活动,但在慢性应激条件下更为明显。2.急性应激明显增强小鼠的空间学习记忆能力;慢性应激则明显损害小鼠的空间学习记忆能力。3.急性应激对小鼠神经元形态结构无明显影响;慢性应激则导致小鼠海马、前脑皮层和下丘脑室旁核神经元发生明显的形态学变化。4.急性应激可使小鼠海马、前脑皮层及下丘脑室旁核c-fos表达明显上调;慢性应激则使小鼠海马区、前脑皮层及下丘脑室旁核神经元中c-fos表达明显下调。研究结果表明,急性应激导致小鼠自发行为和空间学习记忆能力的变化可能与与血清皮质酮的急剧上升及脑海马、前脑皮层和下丘脑室旁核c-fos的大量表达有关;而慢性应激导致小鼠自发行为抑制和空间学习记忆能力受损亦可能与长期高水平皮质酮,脑海马、前脑皮层和下丘脑室旁核神经元的损害及c-fos表达的明显下调密切相关。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 英文缩略词
  • 第一部分 实验研究
  • 一、急性应激对小鼠自发行为和空间学习记忆功能及脑内c-fos表达的影响
  • 前言
  • 材料和方法
  • 1.实验材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 实验试剂
  • 1.3 实验仪器
  • 2.实验方法
  • 2.1 动物分组
  • 2.2 急性应激动物模型的建立
  • 2.3 小鼠行为学检测
  • 2.3.1 开场(Open field)行为测定
  • 2.3.2 Morris水迷宫学习记忆能力检测
  • 2.4 血清皮质酮(CORT)含量测定
  • 2.4.1 皮质酮测定原理
  • 2.4.2 操作步骤
  • 2.5 不同脑区神经元形态学观察及c-fos表达检测
  • 2.5.1 取材
  • 2.5.2 苏木素-伊红染色(HE染色)
  • 2.5.3 免疫组织化学
  • 2.5.4 图像分析
  • 2.6 统计学处理
  • 结果
  • 1.急性应激对小鼠开场行为的影响
  • 2.急性应激对小鼠空间学习记忆能力的影响
  • 2.1 急性应激对小鼠定位航行学习能力的影响
  • 2.2 急性应激对小鼠空间搜索能力的影响
  • 3.急性应激后小鼠血清皮质酮的变化
  • 4.急性应激后小鼠各脑区神经元形态的变化
  • 5.急性应激对小鼠各脑区c-fos表达的影响
  • 5.1 c-fos在小鼠不同脑区表达的差异性
  • 5.2 急性应激后小鼠不同脑区c-fos表达的变化
  • 5.2.1 开场实验(急性应激1h)后小鼠脑内c-fos表达
  • 5.2.2 水迷宫实验后小鼠脑内c-fos表达
  • 6.小鼠开场行为指标间及与血清皮质酮的相关性分析
  • 讨论
  • 二、慢性应激对小鼠自发行为和空间学习记忆功能及脑内c-fos表达的影响
  • 前言
  • 材料和方法
  • 1.实验材料
  • 1.1 实验动物
  • 1.2 实验试剂
  • 1.3 实验仪器
  • 2.实验方法
  • 2.1 动物分组
  • 2.2 慢性应激动物模型的建立
  • 2.3 小鼠行为学检测
  • 2.3.1 开场(Open field)行为测定
  • 2.3.2 Morris水迷宫学习记忆能力检测
  • 2.4 血清皮质酮(CORT)测定
  • 2.4.1 皮质酮的测定原理
  • 2.4.2 操作步骤
  • 2.5 不同脑区神经元形态学观察及c-fos表达检测
  • 2.5.1 取材
  • 2.5.2 苏木素-伊红染色(HE染色)
  • 2.5.3 免疫组织化学
  • 2.5.4 图像分析
  • 2.6 统计学处理
  • 结果
  • 1.慢性应激对小鼠体重的影响
  • 2.慢性应激对小鼠开场行为的影响
  • 3.慢性应激对小鼠空间学习记忆能力的影响
  • 3.1 慢性应激对小鼠定位航行学习能力的影响
  • 3.2 慢性应激对小鼠空间搜索能力的影响
  • 4.慢性应激后小鼠血清皮质酮的变化
  • 5.慢性应激对小鼠各脑区神经元形态的影响
  • 6.慢性应激对小鼠各脑区c-fos表达的影响
  • 6.1 c-fos在小鼠不同脑区表达的差异性
  • 6.2 慢性应激对小鼠不同脑区c-fos表达的影响
  • 7.小鼠开场行为指标间及与血清皮质酮的相关性分析
  • 讨论
  • 结论
  • 附图
  • 参考文献
  • 第二部分 文献综述 急慢性应激对动物学习记忆功能的影响及其机制的研究进展
  • 1. 急慢性应激对动物机体的影响
  • 1.1 应激源与应激反应
  • 1.2 与应激反应相关的脑区
  • 1.2.1 前额叶皮层
  • 1.2.2 海马
  • 1.2.3 下丘脑
  • 2.学习记忆功能的研究进展
  • 2.1 学习记忆的神经细胞学机制
  • 2.2 学习记忆的脑功能定位
  • 2.2.1 海马
  • 2.2.2 前额叶皮层
  • 2.3 糖皮质激素对学习记忆过程的影响
  • 2.3.1 糖皮质激素的生物学特性
  • 2.3.2 糖皮质激素与学习记忆的关系
  • 2.4 c-fos基因对学习记忆功能的影响
  • 2.4.1 c-fos基因的生物学特性
  • 2.4.2 c-fos基因与学习记忆的关系
  • 参考文献
  • 在校期间的研究成果及发表的学术论文
  • 致谢
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