论文摘要
背景与目的：原发性肝细胞癌是我国最常见的恶性肿瘤，并且肝癌的发生率仍在持续上升。虽然现代诊疗技术有了长足进步，但是肝癌的预后仍不容乐观。其中，最主要的原因之一在于：肝内的侵袭性播散和远处的转移，造成肝癌难以切除或术后的复发，所以寻找准确评估肝癌原发灶转移能力和预后的肿瘤标记物，对肝癌的诊断、治疗都具有重大意义。HCC的发生和发展是一个多基因参与和多因素影响的复杂过程。由蛋白质酪氨酸激酶和蛋白质酪氨酸磷酸酶精确调控的蛋白质酪氨酸磷酸化水平在此过程中起着重要的作用。由于很多蛋白质酪氨酸激酶都是由原癌基因编码的，因此一直以来都有人推论某些编码蛋白质酪氨酸磷酸酶的基因可能在体内起抑癌基因的作用，但这个结论直到PTEN／MMAC1／TEP1（后简称PTEN）基因发现后才得到证实。作为一个编码蛋白质酪氨酸磷酸酶的抑癌基因，PTEN自1997年3月被国际上三个研究小组相继独立地克隆后立即成为细胞信号转导、分子生物学和肿瘤病理学等领域的研究热点。目前的研究认为，PTEN基因的突变与很多恶性肿瘤如神经胶质母细胞瘤、前列腺癌、黑色素瘤、乳腺癌等的发生密切相关。原发性肝细胞癌的病理学特点是细胞外基质丰富，大约80％的原发性肝癌被纤维结缔组织包裹。所以，原发性肝癌要发生侵袭和转移，降解细胞外基质是关键性的一步，而基质金属蛋白酶家族（MMPs）在这一过程中起着关键性的作用。MMPs是一类蛋白结构近似，编码基因与胶原酶基因同源的蛋白分解酶家族，具有以下特征：（1）能分解细胞外基质的一种或多种成分；（2）在活化位点上含锌离子，而且能被鳌合剂阻断，酶在中性PH时有最好的催化功能；（3）以酶原形式分泌，须经活化后才具有蛋白水解酶的活性；（4）可被基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）所抑制；（5）它们具有同源的氨基酸序列。其中，MMP-2（明胶酶A）是分解基质中Ⅳ型胶原的最主要的基质金属蛋白酶，不但外周基质中存在Ⅳ型胶原，同时Ⅳ型胶原也是基底膜的主要成分之一。本研究旨在通过检测HCC组织和正常肝组织中PTEN和MMP-2的表达，探讨PTEN及MMP-2在HCC发生、发展中的作用，为评估HCC的发生、发展、预后及诊疗提供一定的理论依据。材料和方法：（1）选取2004—2005年郑州大学第一、二附属医院61例HCC手术切除标本为实验组，选取17例正常肝组织为对照组。全部病例均经病理证实。所有标本经10％福尔马林固定，常规脱水后石蜡包埋。（2）应用免疫组化SABC法检测PTEN和MMP-2在HCC和正常肝组织中的表达情况。（3）统计学工具采用SPSS13.0版软件包，统计方法采用x2检验和spearman检验，显著性水准取α=0.05，P＜0.05认为差别有统计学意义。结果：（1）．PTEN主要定位于胞浆内，在正常肝组织中阳性表达率高达94.1％。在61例HCC组织中39例呈阳性表达，阳性率为63.9％。HCC组织和正常肝组织中PTEN表达差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）．HCC组织中，PTEN的表达与组织学分级和肿瘤的侵袭性有关，差异有统计学意义（P＜0.05）；而与患者年龄、性别、HBsAg、AFP值、肿瘤直径均无相关性（P＞0.05）。（3）．MMP-2主要定位于胞浆内，在正常肝组织中阳性表达率为11.8％。在61例HCC组织中29例呈阳性表达，阳性率为47.5％。HCC组织和正常肝组织中MMP-2表达差异有统计学意义（P＜0.05）。（4）．HCC组织中，MMP-2的表达与肿瘤的侵袭性有关，差异有统计学意义（P＜0.05）；而与患者年龄、性别、HBsAg、AFP值、肿瘤直径和肿瘤的病理分级均无相关性（P＞0.05）。（5）．HCC组织中，MMP-2的表达与PTEN呈明显负相关，经spearman相关性分析表明，相关系数R=-0.599，P＜0.05。结论：（1）．PTEN在HCC组织中的低表达提示其可能在HCC的发生，发展中起重要作用，并且与肿瘤的病理学分级和侵袭性相关。（2）．MMP-2在肿瘤组织中呈高表达，并与肿瘤的侵袭性有关，提示MMP-2的表达与肿瘤的恶性生物学行为有关。（3）．HCC组织中MMP-2与PTEN表达呈明显负相关。